Composiciones farmacéuticas de CD5 para el tratamiento de procesos infecciosos e inflamatorios de origen fúngico.

Ectodominio soluble de CD5 humana para su uso en un procedimiento de prevención y/o tratamiento deinfección fúngica y/o septicemia fúngica y/o cualquier trastorno inflamatorio desencadenado por componentes fúngicos.

Composiciones farmacéuticas de cd5 para el tratamiento de procesos infecciosos e inflamatorios de origen fúngico.

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención pertenece al campo de las infecciones fúngicas. Se refiere específicamente a composiciones farmacéuticas que comprenden el ectodominio de CD5 soluble para la prevención y/o el tratamiento de infecciones fúngicas y/o septicemia fúngica, además de trastornos inflamatorios de origen fúngico.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

El reconocimiento de patógenos por el sistema inmunitario innato se basa en un número limitado de receptores codificado por la línea germinal fija que se han desarrollado para identificar estructuras microbianas conservadas tanto no compartidas por el huésped como esenciales para su supervivencia, los llamados patrones moleculares asociados a patógenos (PAMP) (1, 2) . Ejemplos de PAMP son lipopolisacárido (LPS) de bacterias Gram-negativas, ácido lipoteicóico (LTA) y peptidoglicano (PGN) de bacterias Gram-positivas, lipoarabinomanano de micobacterias y 1-glucanos y mananos de hongos. Existen varias clases estructuralmente y funcionalmente diversas de receptores de reconocimiento de patrones (PRR) que inducen diversas rutas de defensa del huésped. Los dominios de proteína implicados en el reconocimiento de patrones incluyen, entre otros, el dominio de lectina de tipo C de lectinas de células dendríticas (DC) , la repetición rica en leucina (LRR) de receptores similares a Toll (TLR) y el rico en cisteína de receptores depuradores (SRCR) (2) . El último se describió por primer vez tras la clonación del receptor depurador de macrófagos de clase A tipo I de ratón (SR-AI) (3) . La comparación de secuencias con varias otras proteínas, tales como el receptor speract de erizo marino, CD5 humana y de ratón y factor I del complemento revelaron la existencia de un motivo conservado de 100 aminoácidos de longitud característico de una nueva superfamilia de receptores de proteína, llamada SRCR-SF. Esta familia está actualmente compuesta por más de 30 proteínas de la superficie celular y/o secretadas diferentes con representantes en la mayoría de los filos animales, de invertebrados inferiores a mamíferos (4) . Los miembros de SRCR-SF se dividen en dos grupos: los miembros del grupo A contienen dominios SRCR compuestos por 6 cisteínas y codificados por dos exones, mientras que aquellos del grupo B contienen 8 cisteínas y están codificados por un único exón. Datos estructurales recientes indican, sin embargo, que tanto los dominios SRCR del grupo A como B comparten un andamiaje similar (un núcleo central formado por dos hojas 1 antiparalelas y una hélice a) , siendo observadas las principales diferencias en los bucles de conexión (5) . Esta situación recuerda la de otros módulos de proteína satisfactorios del sistema inmunitario de cuya evolución se ha establecido y construido una miríada de proteínas diferentes (por ejemplo, dominio de inmunoglobulina) . La versatilidad de estos dominios conservados se basa en el hecho de que residuos clave que estabilizan la estructura del dominio se conservan mediante la evolución, mientras que otros pueden desarrollarse libremente (especialmente aquellos en los bucles externos) , dando lugar a gran diversidad funcional (6) . Por consiguiente, a pesar de su alto grado de conservación estructural y filogenética, no hay una función unificadora informada para los dominios de SRCR. Algunos de ellos participan en interacciones proteína-proteína, siendo los ejemplos más bien estudiados la interacción del receptor de linfocitos CD6 con CD166/ALCAM, una molécula transmembrana de adhesión que pertenece a la superfamilia de Ig (7, 8) , y la del receptor de macrófagos CD163/M130 con el complejo de hemoglobina-haptoglobina (9) . Algunos miembros de SRCR-SF de tanto el grupo A (es decir, SR-AI/II, MARCO y SCARA5) como B (es decir, DMBT1, Spa y CD6) también son conocidos por interaccionar con PAMP presentes sobre superficies bacterianas tales como LPS, LTA y PGN. Aunque estas interacciones se mapearon inicialmente fuera del dominio de SRCR (10) , pruebas recientes demuestran la participación directa de dominios de SRCR en ellas (11-14) . Por tanto, queda por analizar si la depuración de patógenos es o no una propiedad general compartida por todos los miembros de SRCR-SF o solo por un grupo seleccionado de sus miembros.

Los receptores de tipo I transmembrana CD5 y CD6 son dos miembros del grupo B linfoide de SRCR-SF. Ambos comparten importantes similitudes a nivel estructural y funcional y están codificados por genes contiguos en la misma región del cromosoma que se cree que se derivan de la duplicación de un gen ancestral común (15, 16) . CD5 y CD6 se expresan en timocitos de fases tempranas de su desarrollo, sobre linfocitos T periféricos maduros y en células B1a, un pequeño subconjunto de linfocitos B maduros responsables de la producción de anticuerpos naturales polirreactivos y que se expande en ciertas enfermedades autoinmunitarias y en leucemias linfocíticas crónicas de linfocitos B (17) . Las regiones extracelulares de tanto CD5 como CD6 están compuestas exclusivamente de tres dominios de SRCR del grupo B consecutivos, que muestran la amplia identidad de secuencias de aminoácidos (5) . Las principales diferencias entre CD5 y CD6 se encuentran en sus grandes regiones citoplásmicas, ambas de las cuales carecen de actividad catalítica intrínseca, pero contienen varios motivos estructurales compatibles con una función en la transducción de señales (18, 19) . A ese aspecto, CD5 y CD6 están físicamente asociados al complejo específico para antígeno presente en linfocitos T (TCR) y B (BCR) (20, 21) y se co-localizan con él en el centro de la sinapsis inmunológica (21, 22) . Por tanto, CD5 y CD6 están bien posicionados para modular tanto positivamente como negativamente la activación y diferenciación de señales generadas por el receptor específico para antígeno (22-26) por rutas de señalización todavía incompletamente entendidas y complejas (23, 27-29) . Esto se alcanza probablemente mediante el engranaje de los ectodominios de CD5 y CD6 por diferentes contra-receptores de la superficie celular. Aunque está bien establecido que CD6 se une a CD166/ALCAM (30) , todavía hace falta un ligando de CD5 fiable (31-35) . De forma interesante, CD5 y CD6 parecen diferenciarse en los residuos críticos para unirse a CD166/ALCAM (36) .

Axtell y col., J. Immunol. (2004) 173: 2928 - 2932, investigan la función de CD5 en encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) en ratones y muestran que puede promoverse la recuperación de EAE usando CD5-Fc murino soluble.

En un estudio previo se exploraron las capacidades de unión bacterianas de los ectodominios de CD5 y CD6, ambos conocidos por también existir como formas solubles que circulan en suero (37, 38) . Los datos informados indicaron que tanto las formas solubles como de membrana de CD6, pero no de CD5, se unen a la superficie de bacterias Gramnegativas y Gram-positivas mediante el reconocimiento de PAMP específicos (concretamente LPS y LTA, respectivamente) (39) .

Otros estudios han mostrado que aquellas células, tanto linfocitos T como linfocitos B, que expresan receptor de CD5 en la superficie tienen la capacidad de reconocer y afectar, a un mayor o menor grado, el desarrollo normal de C. neoformans y C. albicans (48, 49) .

Sin embargo, no se ha descrito ni sugerido el mecanismo por el que este receptor reconoce o tiene la afinidad por células fúngicas.

Ahora, los autores de la presente invención han extendido esos estudios al análisis del reconocimiento y propiedades de unión de CD5 y CD6 a estructuras fúngicas y han mostrado que, en comparación con CD6, el ectodominio de CD5 es muy apto para el reconocimiento de componentes conservados sobre superficies celulares fúngicas, que muestra por primera vez que dicha región extracelular aislada del receptor de CD5 puede proporcionar por sí misma profilaxis in vivo contra una infección fúngica general, no solo contra C. neoformans y C. albicans.

Los autores han mostrado que las células fúngicas son específicamente reconocidas, unidas y agregadas por formas solubles del ectodominio de CD5. Esto se hace mediante el reconocimiento de 1-glucanos, un componente estructural conservado de paredes celulares fúngicas, por el ectodominio de CD5 soluble.

Además, los autores de la presente invención han encontrado sorprendentemente que los ectodominios de CD5 solubles tiene un efecto protector en el modelo de ratón de síndrome similar a choque séptico inducido por zymosan.

Estos resultados respaldan la utilidad terapéutica de la infusión de ectodominio de CD5 humana soluble para el tratamiento de síndrome de choque séptico u otros... [Seguir leyendo]

1. Ectodominio soluble de CD5 humana para su uso en un procedimiento de prevención y/o tratamiento de infección fúngica y/o septicemia fúngica y/o cualquier trastorno inflamatorio desencadenado por componentes fúngicos.

2. Ectodominio soluble de CD5 humana para el uso según la reivindicación 1, en el que la infección y/o septicemia 5 y/o el trastorno inflamatorio es producido por Candida albicans o Criptococcus neoformans.

3. Una composición farmacéutica que comprende el ectodominio soluble de CD5 humana y al menos un excipiente farmacéutico para su uso en un procedimiento de prevención y/o tratamiento de infección fúngica y/o septicemia fúngica y/o cualquier trastorno inflamatorio desencadenado por componentes fúngicos.

4. La composición farmacéutica para el uso según la reivindicación 3, en la que el excipiente está seleccionado de 10 sacarosa y glicerol.

5. La composición farmacéutica para el uso según la reivindicación 3, en la que la composición está en forma inyectable.

. La composición farmacéutica para el uso según cualquiera de las reivindicaciones 3 a 5, en la que la infección y/o septicemia y/o el trastorno inflamatorio es producido por Candida albicans o Criptococcus neoformans.