Agentes inhibidores de la ciclopropil polimerasa.

Un compuesto de fórmula I:

incluyendo cualesquiera posibles estereoisómeros del mism,

en donde:

R2 es hidrógeno o alquilo de C1-C4;

R3 y R4 se seleccionan independientemente entre el conjunto que consiste en hidrógeno, -C(≥O)R5,

y -C(≥O)CHR6-NH2; o

R3 es hidrógeno y R4 es un éster monofosfato, difosfato o trifosfato; o

R3 es hidrógeno, -C(≥O)CHR5, o -C(≥O)CHR6-NH2 y R4 es un grupo de fórmula **Fórmula**

Agentes inhibidores de la ciclopropil polimerasa Campo técnico Este invento se refiere a unos derivados de nucleósidos que son agentes inhibidores de los virus de la hepatitis C (VHC) así como a su uso en el tratamiento o la profilaxia de los VHC.

Antecedentes del invento Un VHC es un virus de ARN de sentido positivo, de una sola hebra, que pertenece a la familia de virus Flaviviridae en el género de los hepacivirus. A continuación de una infección aguda inicial, una mayoría de los individuos infectados desarrollan una hepatitis crónica, puesto que el VHC se replica preferentemente en hepatocitos, pero no es directamente citopático. En particular, se manifiesta que la falta de una enérgica respuesta a los linfocitos T y la alta propensión del virus a mutarse favorecen una alta tasa de infecciones crónicas. Una hepatitis crónica puede progresar hasta convertirse en una fibrosis hepática, conduciendo a una cirrosis, una enfermedad del hígado en etapa terminal, y a un HCC (carcinoma hepatocelular) , convirtiéndose en la causa principal de trasplantes de hígado.

Hay seis genotipos principales de los VHC y más de 50 subtipos, que están distribuidos geográficamente de una manera diferente. El genotipo 1 de los VHC es el genotipo predominante en Europa y en los Estados Unidos de América. La extensa heterogeneidad genética de los VHC tiene importantes implicaciones diagnósticas y clínicas, que explican posiblemente las dificultades en el desarrollo de vacunas y la limitada eficacia de la actual terapia.

La transmisión de los VHC puede producirse mediante contacto con una sangre contaminada o con productos sanguíneos contaminados, por ejemplo a continuación de una transfusión de sangre o de un uso de fármacos por vía intravenosa. La introducción de ensayos de diagnóstico usados para la exploración de una sangre ha conducido a una tendencia descendente en la incidencia de los VHC después de una transfusión. Sin embargo, la lenta progresión hasta la enfermedad hepática en etapa terminal, las infecciones existentes continuarán presentando una grave carga médica y económica durante un período de tiempo muy largo.

El actual patrón de cuidados contra los VHC está basado en un alfa interferón (IFN-α) (pegilado) en combinación con ribavirina. Esta terapia en combinación proporciona una respuesta virológica prolongada en aproximadamente un 50 % de los pacientes que están afectados con los VHC del genotipo 1 y aproximadamente un 80 % de los que están infectados con los genotipos 2 y 3. Junto a la limitada eficacia del genotipo 1 de los VHC, esta terapia en combinación tiene importantes efectos colaterales y es malamente tolerada en muchos pacientes. Los efectos colaterales principales incluyen síntomas similares a la influenza (gripe) , anormalidades hematológicas y síntomas neuropsiquiátricos. Por lo tanto existe una necesidad de unos tratamientos más efectivos y convenientes y mejor tolerados.

La experiencia obtenida con los fármacos contra los VIH (virus de la deficiencia humana) , en particular con agentes inhibidores de proteasas de los VIH ha enseñado que una farmacocinética inferior a la óptima y unos regímenes de dosificación complejos dan como resultado unos inadvertidos fallos de la capacidad de distensión (compliancia) . Esto a su vez significa que la concentración a lo largo de 24 horas (concentración mínima en plasma) para los respectivos fármacos en un régimen contra los VIH desciende frecuentemente por debajo del umbral de CI90 o DE90 durante grandes partes del día. Se considera un nivel mantenido a lo largo de 24 horas de por lo menos la CI50, y de manera más realista, la CI90 o DE90, es esencial para decelerar el desarrollo de mutantes de escape de fármacos. La consecución de la farmacocinética y del metabolismo de fármacos que se necesitan para permitir dichos niveles continuos proporciona un reto exigente para el diseño de fármacos.

La región NS5B de los poligenes de ARN codifica una polimerasa de ARN dependiente de ARN (RdRp) , que es esencial para la replicación de los virus. Por lo tanto, esta enzima ha suscitado un importante interés entre los profesionales químicos medicinales. Se conocen agentes inhibidores de la NS5B que son tanto nucleósidos como no nucleósidos. Los agentes inhibidores que son nucleósidos pueden actuar o bien como un agente terminador de cadena o como un agente inhibidor competitivo, que interfiere con la fijación de nucleótidos a la polimerasa. Para funcionar como un agente terminador de cadena, el compuesto análogo a nucleósidos debe ser asimilado por la célula y convertido in vivo en un trifosfato. Esta conversión en el trifosfato es mediada corrientemente por unas cinasas celulares, que imparten requisitos estructurales adicionales a un potencial agente inhibidor de polimerasas que es un nucleósido. Además, esto limita la evaluación directa de ciertos nucleósidos como agentes inhibidores de la replicación de los VHC en ensayos basados en células, que son capaces de una fosforilación in situ.

Se han hecho varios intentos de desarrollar unos nucleósidos como agentes inhibidores de una RdRp de VHC pero mientras que una gran cantidad de compuestos han entrado en un desarrollo clínico, ninguno ha avanzado todo el camino hasta llegar a ser registrado. Entre los problemas con los que los nucleósidos dirigidos al VHC se han encontrado hasta la fecha, están los de toxicidad, mutagenicidad, falta de selectividad, mala eficacia, mala biodisponibilidad, regímenes de dosificación inferiores a los óptimos y una consiguiente alta carga con píldoras, y el coste de los productos.

Varias patentes y solicitudes de patente así como publicaciones científicas describen unos compuestos análogos a nucleósidos que tienen una actividad inhibidora de los VHC. El documento de solicitud de patente internacional WO 2004/002999 describe unos profármacos de 2’ y 3’-nucleósidos modificados para tratar infecciones causadas por los flaviviridae. El documento WO 2008/043704 describe la 4-amino-1- ( (2R, 3S, 4S, 5R) -5-azido-4-hidroxi-5-hidroximetil-3metil-tetrahidrofuran-2-il) -1H-pirimidin-2-ona y sus derivados ésteres como agentes inhibidores de la polimerasa de VHC. Murakami Eisuke y colaboradores en Antimicrobial Agents and Chemotherapy (agentes antimicrobianos y quimioterapia) , American Society for Microbiology (Sociedad americana de microbiología) , volumen 51, nº 2, páginas 503-509 (2007) describen la fosforilación y la inhibición de la polimerasa de NS5B de VHC efectuada por la β-D-2’desoxi-2’-fluoro-2’C-metil citidina y algunos compuestos análogos. El documento WO2006/021341 describe unos 4’azido-nucleósidos antivíricos como agentes inhibidores de la polimerasa de VHC. El documento WO02/100415 describe unos nucleósidos sustituidos en posición 4’ para el tratamiento de enfermedades mediadas por los VHC. Ninguno de estos compuestos tiene un sustituyente 2’-espiro-ciclopropilo.

Existe una necesidad de agentes inhibidores de los VHC que puedan superar una o más de las desventajas de la actual terapia contra los VHC, tales como efectos colaterales, limitada eficacia, aparición de una resistencia y fallos de capacidad de distensión, así como que mejoren una respuesta prolongada de los virus.

El presente invento concierne a unas 4-amino-1- (7-hidroxi-6-hidroximetil-5-oxa-espiro[2, 4]hept-4-il) -1H-pirimidin-2ºnas inhibidoras de los VHC con útiles propiedades en lo que concierne a uno o más de los siguientes parámetros: eficacia antivírica, favorable perfil de desarrollo de resistencia, un perfil virológico favorable, un perfil toxicológico y genotoxológico favorable, y una farmacocinética y una farmacodinámica favorables, y una facilidad de formulación y administración. Uno de dichos compuestos, a saber el 4-amino-1- ( (4R, 6R, 7S) -7-hidroxi-6-hidroximetil-5-oxaespiro[2, 4]hept-4-il) -1H-pirimidin-2-ona, también citado como 2’-desoxi-2’-espiro-ciclopropil citidina, ha sido descrito en Can. J. Chem., volumen 71, páginas 413-416, pero no como un agente inhibidores de los VHC.

Los compuestos del invento pueden también ser atractivos debido al hecho de que ellos carecen de actividad contra otros virus, en particular contra los VIH. Los pacientes infectados con los VIH padecen con frecuencia de infecciones concomitantes tales como las causadas por los VHC. El tratamiento de dichos pacientes con un agente inhibidor de los VHC que también inhiba a los VIH puede conducir a la aparición de cepas de VIH resistentes.

Descripción del invento En un aspecto, el presente invento proporciona unos compuestos que pueden ser representados por la fórmula I:

incluyendo a cualesquiera posibles estereoisómeros de los mismos,... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de fórmula I:

incluyendo cualesquiera posibles estereoisómeros del mism, en donde: R2 es hidrógeno o alquilo de C1-C4; R3 y R4 se seleccionan independientemente entre el conjunto que consiste en hidrógeno, -C (=O) R5,

y -C (=O) CHR6-NH2; o R3 es hidrógeno y R4 es un éster monofosfato, difosfato o trifosfato; o 10 R 3 es hidrógeno, -C (=O) CHR5, o -C (=O) CHR6-NH2 y R4 es un grupo de fórmula cada R5 se selecciona independientemente entre el conjunto que consiste en hidrógeno, alquilo de C1-C6 y cicloalquilo de C3-C7; R6 es hidrógeno o alquilo de C1-C6;

R7 es fenilo, opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes que están seleccionados, cada uno de ellos Independientemente, entre halo, alquilo de C1-C6, alquenilo de C3-C6, alcoxi de C1-C6, hidroxi, y amino, o R7 es naftilo; o R7 es indolilo; R8 es hidrógeno, alquilo de C1-C6 o bencilo; R8’ es hidrógeno, alquilo de C1-C6 o bencilo; o R8 y R8, conjuntamente con el átomo de carbono al que ellos están unidos, forman un cicloalquilo de C3-C7; R9 es alquilo de C1-C6, bencilo o fenilo, en donde dicho fenilo puede estar opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes, cada uno de los cuales está seleccionado independientemente entre hidroxi, alcoxi de C1-C6, amino, mono-y di-alquil de C1-C6-amino; con la condición de que R2, R3 y R4 no han de ser todos ellos hidrógeno;

o las sales o los solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R2 es hidrógeno.

3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R3 y R4 son hidrógeno.

4. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 2, en donde R3 es hidrógeno y R4 es un grupo de fórmula

5. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 2 o la reivindicación 4, en donde R7 es fenilo, opcionalmente sustituido con halo, o alquilo de C1-C6, o R7 es naftilo.

6. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 2 o las reivindicaciones 4 ó 5, en donde R8 es hidrógeno y R8’ es hidrógeno o alquilo de C1-C6.

7. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 2 o las reivindicaciones 4 ó 5, en donde uno de los R3 y R4 es -C (=O) R5; y el otro de los R3 y R4 es hidrógeno; o en donde ambos R3 y R4 son -C (=O) R5; y en donde R5 es alquilo de C1-C6.

8. El compuesto de la reivindicación 7, en donde R5 es isopropilo.

9. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-2 o las reivindicaciones 4 – 8, en donde R9 es alquilo de C1-C6 o bencilo.

10. El compuesto de la reivindicación 1, en donde el compuesto tiene la fórmula:

11. El compuesto de la reivindicación 10, en donde el compuesto está en forma libre.

12. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz anti-víricamente de un compuesto de fórmula I como se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1-11 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

13. Un compuesto de fórmula I, como se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1-11, así como el compuesto de fórmula I, en la que R2, R3 y R4 son todos ellos hidrógeno, para usarse como un agente inhibidor de los VHC.

14. Un compuesto de fórmula I, para usarse como un agente inhibidor de los VHC, de acuerdo con la reivindicación 13, en donde en el compuesto de fórmula I R2, R3 y R4 son todos ellos hidrógeno.

15. Un compuesto de fórmula I, para usarse como un agente inhibidor de los VHC, de acuerdo con la reivindicación 14, en donde el compuesto está en forma libre.

16. Una combinación que comprende un compuesto de fórmula I, así como el compuesto de fórmula I en la que R2, 20 R3 y R4 son todos ellos hidrógeno, con otro agente inhibidor de los VHC.

17. Un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula I, como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1-11, en el que (a) se prepara un compuesto de fórmula I en la que R3 y R4 son ambos hidrógeno, aquí representado por la fórmula I-a, por una reacción de conversión de uracilo en citosina a partir de una 2’-desoxi-2’-espirociclopropil uridina 1f para dar la correspondiente 2’-desoxi-2’-espirociclopropil citidina 1g, seguida por una eliminación de los grupos protectores PG, proporcionando el compuesto I-a:

(b) se prepara un compuesto de fórmula I en la que R3 es hidrógeno y R4 es haciendo reaccionar un compuesto Ia con un fósforo-cloridato 2a en la presencia de una (c) se prepara un compuesto de fórmula I, en la que R3 es hidrógeno y R4 es -C (=O) R5 o -C (=O) CHR6-NH2, aquí representado por R4a y dicho compuesto representado por la fórmula I-c; o R3 y R4 independientemente uno de otro son -C (=O) R5 o -C (=O) CHR6-NH2, seguidamente representado por R3a y respectivamente R4a y dicho compuesto representado por la fórmula I-d; y en donde el grupo amino es -C (=O) CHR6-NH2 puede ser protegido con un grupo protector de amino que se puede eliminar posteriormente:

protegiendo selectivamente el grupo 5’-hidroxi en un compuesto intermedio 3a proporcionando un compuesto intermedio 3b, el cual a su vez es esterificado para dar un compuesto intermedio 3c, seguido por una conversión de uracilo en citosina para dar un compuesto intermedio 3d; desprotegiendo a este último para dar el 3’-monoéster I-c; o esterificando el 5’-hidroxi en I-c para dar un compuesto I-d; o esterificando selectivamente el grupo 5’-hidroxi en un compuesto intermedio 3a introduciendo de esta manera un grupo R4a , dando como resultado un compuesto intermedio 3e, y esterificando el compuesto intermedio 3e subsiguientemente con un ácido diferente, introduciendo de esta manera un grupo R3a, proporcionando un compuesto intermedio di-éster 3f, que es sometido a una conversión de uracilo en citidina, para proporcionar un compuesto I-d:

R4a

(d) se prepara un compuesto de fórmula I en la que R3 es hidrógeno y R4 es como más arriba se ha especificado, siendo representado dicho compuesto por la fórmula I-e, protegiendo el hidroxi libre en un compuesto intermedio 3b con un grupo protector de hidroxi que es disociable selectivamente hacia el otro grupo protector de 5 hidroxi dando como resultado un compuesto intermedio 4a; eliminando el grupo protector de 5’-hidroxi proporcionando un compuesto intermedio 4b; esterificando a este último para dar un compuesto intermedio 4c, sometiendo a este último a una conversión de uracilo en citosina obteniendo de esta manera un derivado de citidina protegido en 4’-hidroxi 4d, que es desprotegido para proporcionar un compuesto Ie; como se representa en el siguiente esquema, en donde el grupo PGa tiene los mismos significados que PG, pero se selecciona de manera tal

que es disociable selectivamente hacia el grupo PG:

Esquema 4: Síntesis de monoésteres (e) se prepara un compuesto de fórmula I en la que R3a y R4a son iguales y son como más arriba se ha especificado, siendo representado dicho compuesto por la fórmula I-f, por esterificación de ambos grupos hidroxi en un compuesto intermedio 3a: