PROCEDIMIENTO DE PRONÓSTICO DE LA ISQUEMIA CEREBRAL.

Procedimiento de pronóstico de la isquemia cSector de la técnica 5 La presente invención se enmarca en el campo de la medicina para pronosticar el riesgo de isquemia cerebral. Antecedentes 1 O 15 El ictus es una de las principales causas de muerte en los países desarrollados que además puede generar una gran incapacidad, tanto por el grado de dependencia de los supervivientes como por afectar a muchas personas en edad laboral. Menos de la mitad de los pacientes que sufren infarto cerebral son capaces de retomar una vida normal (la prevalencia de recuperación incompleta es de 460/1000 supervivientes) . Estos enfermos demandan cuidados que han de ser suplidos por su familia, lo que repercute en la calidad de vida del paciente y sus cuidadores, o por instituciones públicas y privadas, lo que conlleva una importante inversión económica. 20 El ictus tiene dos causas principales: la obstrucción trombótica de un vaso sanguíneo (ictus isquémico que da cuenta del 80% de los casos) y la hemorragia (ictus hemorrágico, por rotura de vasos, que da cuenta del 20% restante) . Los síntomas del ictus (pérdida de fuerza en la mitad del cuerpo, dificultad para hablar o entender, pérdida parcial de la visión y vértigo, entre otros) aparecen de forma brusca. Sin embargo, ha de transcurrir un tiempo hasta que se produce la lesión cerebral por muerte neuronal. Este tiempo es la "ventana terapéutica", en la que los neurólogos deben evitar la muerte neuronal en la parte del cerebro donde se produjo el infarto o la hemorragia. 25 30 El cerebro es un órgano con un alto contenido de glutamato, el más importante de los neurotransmisores excitatorios. El glutamato resulta de vital importancia para el correcto funcionamiento del sistema nervioso, sin embargo, sus propiedades exciatorias lo convierten en una sustancia altamente deletérea para las neuronas en situaciones en las que su concentración alcanza niveles elevados ( < 200 ¡.tM) , y la isquemia cerebral es un claro ejemplo de este efecto. Durante un episodio de isquemia cerebral, se produce una alta liberación de glutamato en el medio extracelular del tejido cerebral, lo que desencadena una serie de eventos moleculares que conducen a la muerte neuronal. En consecuencia, debido al importante papel que juega el glutamato durante el episodio de isquemia, lo convierte en una buena diana para la búsqueda de nuevos agentes neuroprotectores para el ictus isquémico. La escasa terapia existente para el tratamiento de esta enfermedad hace necesano 5 desarrollar nuevas terapias que puedan ser aplicables al mayor número posible de pacientes, así como métodos de pronóstico que permitan intervenir o tratar con mayor eficacia al paciente tras la isquemia cerebral. Descripción de la invención 1 O La presente invención aporta un procedimiento pronóstico de isquemia cerebral basado en un nuevo marcador pronóstico. La invención se basa en la observación de pacientes que presentaban un episodio de ictus isquémico con menos de 12 horas desde el comienzo de los síntomas. La invención demuestra que pacientes con concentraciones elevadas de las enzima 15 glutamato piruvato transaminasa (GPT) presentan buen pronóstico después de un episodio de isquemia cerebral; por el contrario, pacientes con concentraciones bajas de GPT presentan un mal pronóstico después de un episodio de isquemia cerebral, evolucionan peor. Por lo tanto, los niveles de GPT son un factor relevante para pronosticar la evolución de 20 un paciente con isquemia cerebral, y así la invención proporciona un procedimiento para su pronóstico estableciendo un punto de corte de los valores de GPT. Una ventaja adicional de la invención, supone que disponer de los niveles de GPT como marcador útil para determinar si un paciente tendrá un buen o mal pronóstico, permitirá estratificar los pacientes, de forma que aquellos pacientes con mal pronóstico serán 25 candidatos a recibir terapias más agresivas que aquellos con buen pronóstico. De este modo, en un aspecto la invención se dirige a un procedimiento para pronosticar la isquemia cerebral, que comprende: i) medir en una muestra de sangre de un paciente la concentración de la enzima 30

glutamato piruvato transaminasa (GPT) , y ii) comparar la concentración de GPT con el valor de punto de corte establecido, 5 de forma que cuando la concentración de GPT sea superior o igual al valor del punto de corte, entonces el paciente presenta una predisposición favorable para un buen pronóstico, y cuando las concentración de GPT sea inferior al valor del punto de corte el paciente presenta una predisposición favorable para un mal pronóstico (Figura 1 ) . En otro aspecto, la invención se dirige a un procedimiento para pronosticar la isquemia cerebral, que comprende: i) medir en una muestra de un paciente la concentración de GPT y otro marcador de isquemia cerebral, 1O ii) comparar la concentración de GPT y del otro marcador con el valor de punto de corte establecido, 15 de forma que cuando las concentraciones GPT y el otro marcador de isquemia cerebral sean superiores o iguales al valor del punto de corte, entonces el paciente presenta una predisposición favorable para un buen pronóstico, y cuando las concentraciones de GPT y el otro marcador de isquemia cerebral sean inferiores al valor del punto de corte el paciente presenta una predisposición favorable para un mal pronóstico. 20 En un aspecto particular, el valor del punto de corte establecido para la GPT es de 21 mU/mL, con una sensibilidad de 43% y una especificidad del 74%, determinado mediante un análisis estadístico de los datos obtenidos por observación de pacientes (área de la curva ROC 0.594, (p>0.002) . Niveles de GPT superiores o iguales a 21 mU/ml predicen buen pronóstico funcional. 25 En la presente invención se entiende por "buen pronóstico" una puntuación en la Escala de Rankin Modificada menor o igual a 2, a los 3 meses de evolución. Definiéndose la Escala de Rankin Modificada como la escala que evalúa la situación funcional del paciente. Esta escala va de 0-6, siendo Oun paciente sin ninguna discapacidad funcional y 6 es indicativo de muerte. El punto de corte de menor o igual a 2 en esta Escala de Rankin nos indica que el paciente es independiente. Niveles de GPT inferiores a 21 mU/ml predicen mal pronóstico funcional. 30

En la presente invención se entiende por "mal pronóstico" una puntuación en la Escala de Rankin Modificada superior a 2, a los 3 meses de evolución. Indica que el paciente vivirá sin independencia física con riesgo de muerte. En otro aspecto particular, el paciente isquémico. sufrió previamente un episodio de ictus Descripción detallada de la invención 5 1O Para la presente invención se entiende por "pronosticar" procedimientos mediante los cuales los expertos en la técnica pueden predecir el curso o resultado de una afección en un paciente. Se entiende que "buen pronóstico" se refiere a un aumento en la probabilidad de que una afección evolucione de forma favorable permitiendo la recuperación del paciente. En este sentido, el valor de un marcador de buen pronóstico asociado a la patología de ictus isquémico permite determinar la probabilidad de que un paciente evolucione con buen o mal pronóstico. En la invención se entiende por "muestra de un paciente" a una muestra obtenida de un mamífero con el propósito de diagnóstico o pronóstico o evaluación, en un procedimiento in vitro. En un aspecto particular, la muestra del paciente es una muestra de sangre o suero. En otro aspecto particular, el paciente es humano. 15 20 Para la presente invención se entiende por "terapias agresivas" aquellas que suponen un riesgo sobre el paciente sobre el que se aplique, pero que en el caso de los pacientes con mal pronóstico, la probabilidad de éxito en la aplicación de estas técnicas es mayor que si no se realizara. Son terapias agresivas, por ejemplo, la técnica de neurointervencionismo que consiste en una intervención quirúrgica en la que se introduce un catéter a través de la arteria femoral hasta llegar al lugar del trombo para eliminarlo, lo que supone un riesgo para el paciente por la complejidad de la técnica. 25 La enzima glutamato piruvato transaminasa (GPT) es una enzima que normalmente está presente en las células del hígado y del corazón y es liberada en la sangre cuando estos órganos están dañados, con variaciones significativas entre sujetos (Lin, J.D., et al., Serum glutamic-oxaloacetic transaminase (GOT) and glutamic-pyruvic transaminase (GPT) levels in children and adolescents with intellectual disabilities. Res Dev Disabil. 31 (1) : p. 172-7; Ladue, J.S., F. Wroblewski, and A. Karmen, Serum glutamic oxaloacetic transaminase activity in human acute transmural myocardial infarction. Science, 1954. 120 (3117) : p. 497-9) ; 30

La enzima GPT, fue purificada...

l. Procedimiento para pronosticar la isquemia cerebral, que comprende i) medir en una muestra de un paciente la concentración de la enzima glutamato piruvato transaminasa (GPT) , 5 ii) comparar la concentración de GPT con el valor de punto de corte establecido, de forma que cuando la concentración de GPT sea superior o igual al valor del punto de corte, entonces el paciente presenta una predisposición favorable para un buen pronóstico, y cuando las concentración de GPT sea inferior al valor del punto de corte el paciente presenta una predisposición favorable para un mal pronóstico. 1 O 2. Procedimiento según la reivindicación 1, donde el punto de corte para la GPT es 21 mU/mL. 3. Procedimiento para pronosticar la isquemia cerebral, que comprende: i) medir en una muestra de un paciente la concentración de glutamato piruvato transaminasa (GPT) y glutamato oxalacetato transaminasa (GOT) , 15 ii) comparar la concentración de GPT corte establecido, y del otro marcador con el valor de punto de 20 de forma que cuando las concentraciones GPT y GOT sean superiores o iguales al valor del punto de corte, entonces el paciente presenta una predisposición favorable para un buen pronóstico, y cuando las concentraciones de GPT y GOT sean inferiores al valor del punto de corte el paciente presenta una predisposición favorable para un mal pronóstico. 25 4. Procedimiento según la reivindicación 3, donde el punto de corte para la GOT es 24 mU/mL y para la GPT es 21 mU/mL. 5. Procedimiento según las reivindicaciones 1 y 3, donde la muestra es de sangre o suero. 6. Procedimiento según las reivindicaciones anteriores, donde el paciente es humano. 7. Procedimiento según las reivindicaciones anteriores, donde el paciente sufrió previamente un episodio de ictus isquémico.