Polipéptidos homólogos IL-17 y usos terapéuticos de los mismos.

Anticuerpo que se une a un polipeptido que tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoacidos con:

(a) residuos 1 o Y a Z o 502 del polipeptido mostrado en la figura 12, siendo Y cualquier numero de 10 a 20 y siendo Z cualquier numero de 284 a 294; o

b) la secuencia de aminoacidos codificada por la secuencia codificante de longitud completa del ADNc depositado bajo el numero de acceso ATCC PTA-202;

y que es capaz de inhibir la union de dicho polipeptido a un polipeptido PRO10272 tal como se muestra en la figura 6 (SEQ ID NO:6).

Polipéptidos homólogos IL-17 y usos terapéuticos de los mismos CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere generalmente a la identificación y aislamiento de ADN y a la producción recombinante de polipéptidos nuevos con similitud de secuencia con la interleucina-17 y la proteína receptora interleucina-17, designada aquí como polipéptidos "PRO".

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Las proteínas extracelulares juegan un papel importante en, entre otras cosas, la formación, la diferenciación y el mantenimiento de los organismos multicelulares. El destino de muchas células individuales, es decir, la proliferación, migración, diferenciación, o la interacción con otras células, normalmente se rigen por la información recibida de otras células y/o el entorno inmediato. Esta información se suele transmitir por polipéptidos secretados (por ejemplo, factores mitogénicos, factores de supervivencia, factores citotóxicos, factores de diferenciación, neuropéptidos y hormonas) que es, a su vez, recibida e interpretada por diversos receptores de las células o proteínas de membrana. Estos polipéptidos secretados o moléculas de señalización normalmente pasan por la vía de secreción celular para llegar a su sitio de acción en el medio extracelular.

Las proteínas secretadas tienen diversas aplicaciones industriales, incluyendo los productos farmacéuticos, de diagnóstico, biosensores y biorreactores. La mayoría de los fármacos de proteínas disponibles en la actualidad, tales como agentes trombolíticos, interferones, interleucinas, eritropoyetina, factores estimulantes de colonias, y otras varias citoquinas, son proteínas secretoras. De sus receptores, que son proteínas de membrana, también tienen potencial como agentes terapéuticos o de diagnóstico.

Las proteínas unidas a la membrana y receptores pueden desempeñar un papel importante en, entre otras cosas, la formación, la diferenciación y el mantenimiento de los organismos multicelulares. El destino de muchas células individuales, es decir, proliferación, migración, diferenciación, o interacción con otras células, normalmente se rigen por la información recibida de otras células y/o el entorno inmediato. Esta información se suele transmitir por polipéptidos secretados (por ejemplo, factores mitogénica, factores de supervivencia, factores citotóxicos, factores de diferenciación, neuropéptidos y hormonas) que es, a su vez, recibida e interpretada por diversos receptores de las células o proteínas de membrana.

Dichas proteínas unidas a la membrana y receptores de la célula incluyen, pero no están limitados a, los receptores de las citoquinas, receptores quinasas, fosfatasas de los receptores, los receptores implicados en las interacciones célulacélula, y las moléculas de adhesina celular como selectinas e integrinas. Por ejemplo, la transducción de señales que regulan el crecimiento y la diferenciación celular está regulada en parte por la fosforilación de varias proteínas celulares. Quinasas tirosina de proteínas, enzimas que catalizan este proceso, también puede actuar como receptores del factor de crecimiento. Los ejemplos incluyen los receptores de factor de crecimiento de fibroblastos y factor de crecimiento del nervio receptor de factor.

De manera similar a las proteínas secretadas, las proteínas unidas a la membrana y las moléculas de los receptores tienen diversas aplicaciones industriales, incluso como agentes farmacéuticos y de diagnóstico. Inmunoadhesinas receptoras, por ejemplo, pueden ser empleadas como agentes terapéuticos para bloquear las interacciones receptorligando. Las proteínas unidas a la membrana también pueden ser empleadas para la detección de péptido o inhibidores de molécula pequeña potenciales de la interacción receptor/ligando relevante.

Se están realizando esfuerzos tanto por la industria y el mundo académico para identificar nuevas proteínas secretadas nativas y el receptor nativo o proteínas unidas a la membrana. Muchos esfuerzos se centran en la selección de las librerías de ADN recombinante de mamíferos para identificar las secuencias que codifican las nuevas proteínas secretadas. Ejemplos de procedimientos y técnicas están descritos en la literatura [ver, por ejemplo, Klein et al., Proc. Natl. Acad. Sci.., 93:7108-7113 (1996) ; U. S. Patent No. 5.536.637) ].

En este sentido, la presente invención se refiere a la identificación de nuevos polipéptidos y receptores secretados de la familia de la interleucina-17 (IL-17) que han demostrado estar relacionados con las enfermedades inmuno-mediadas e inflamatorias. Enfermedades inmunes e inflamatorias relacionadas son la manifestación o consecuencia a menudo de varias vías biológicas interconectadas bastante complejas, que en la fisiología normal son críticas para responder al ataque o lesión, iniciar la reparación del ataque o lesión, y montar la defensa innata y adquirida frente a los organismos extraños. La enfermedad o patología se produce cuando estas vías fisiológicas normales causan un ataque o lesión adicional ya sea directamente relacionado con la intensidad de la respuesta, como consecuencia de la regulación anormal o excesiva estimulación, como reacción a la misma, o como una combinación de éstas.

Aunque la génesis de estas enfermedades a menudo involucra vías de varias etapas y a menudo caminos múltiples sistemas y vías biológicos diferentes, la intervención en los puntos críticos en una o más de estas vías puede tener un efecto paliativo o terapéutico. La intervención terapéutica puede ocurrir ya sea por antagonismo de un proceso/vía de detrimento o la estimulación de un proceso/vía beneficioso.

Muchas enfermedades autoinmunes relacionadas son conocidas y han sido ampliamente estudiados. Esas enfermedades incluyen son las enfermedades inflamatorios inmuno-mediadas (como la artritis reumatoide, enfermedad renal inmuno-mediada, enfermedades hepatobiliares, enfermedad inflamatoria intestinal (EII) , psoriasis y asma) , enfermedades inflamatorias no inmuno mediadas, enfermedades infecciosas, enfermedades de inmunodeficiencia, la neoplasia, etc.

Los linfocitos T (células T) son un componente importante de una respuesta inmune de los mamíferos. Las células T reconocen los antígenos que están asociados con una auto-molécula codificada por los genes del complejo principal de histocompatibilidad (MHC) . El antígeno se puede mostrar junto con las moléculas de MHC en la superficie de células que presentan antígenos, células infectadas por virus, células cancerosas, injertos, etc. El sistema de células T elimina estas células alteradas que representan una amenaza para la salud del mamífero huésped. Las células T incluyen linfocitos colaboradores T y células T citotóxicas. Las células T colaboradoras proliferan de manera extensiva a raíz del reconocimiento de un complejo antígeno-MHC en la presentación de un antígeno de la célula. Las células T colaboradoras también secretan una gran variedad de citocinas, es decir, linfocinas, que desempeñan un papel central en la activación de células B, células T citotóxicas y una variedad de otras células que participan en la respuesta inmune.

Un acto central, tanto en las respuestas inmunes humoral y mediada por células es la activación y expansión clonal de las células T colaboradoras. La activación de células T colaboradoras se inicia por la interacción del receptor de células T (TCR) -complejo CD3 con un antígeno-MHC en la superficie de una célula que presente un antígeno. Esta interacción media en una cascada de eventos bioquímicos que inducen al descanso de células T auxiliares para entrar en un ciclo celular (el G0 a la transición G1) y resulta en la expresión de un receptor de alta afinidad para IL-2 y algunas veces IL-4. La célula T activada avanza a través del ciclo proliferando y diferenciándose en las células de memoria o células efectoras.

Además de las señales mediadas por el TCR, la activación de células T implica coestimulación adicional inducida por citocinas liberadas por las células que presentan antígenos o por medio de interacciones con las moléculas unidas a la membrana de la célula que presenta el antígeno y la célula T. Las citocinas IL-1 e IL-6 se ha demostrado que proporcionan una señal de coestimuladora. Además, la interacción entre la molécula B7 expresada en la superficie de células presentadoras de un antígeno y moléculas CD28 y CTLA-4 expresadas en la superficie de las células T efectúan la activación de células T. Las células T activadas expresan un... [Seguir leyendo]

1. Anticuerpo que se une a un polipéptido que tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con:

(a) residuos 1 o Y a Z o 502 del polipéptido mostrado en la figura 12, siendo Y cualquier número de 10 a 20 y siendo Z cualquier número de 284 a 294; o b) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia codificante de longitud completa del ADNc depositado bajo el número de acceso ATCC PTA-202; y que es capaz de inhibir la unión de dicho polipéptido a un polipéptido PRO10272 tal como se muestra en la figura 6 (SEQ ID NO:6) .

2. Anticuerpo según la reivindicación 1, en el que dicho anticuerpo es un anticuerpo monoclonal, un anticuerpo humanizado, un fragmento de anticuerpo o un anticuerpo de cadena sencilla.

3. Composición que comprende el anticuerpo según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en combinación con un portador.

4. Composición según la reivindicación 3, en la que el portador es farmacéuticamente aceptable.

5. Anticuerpo según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 o la composición según la reivindicación 3 ó 4 para utilizar en un método de tratamiento de una enfermedad relacionada con el sistema inmune.

6. Método de identificación de un compuesto que inhibe la unión de un polipéptido PR05801 y un polipéptido PRO10272, comprendiendo dicho método poner en contacto un polipéptido PRO5801 y un polipéptido PRO10272 bajo condiciones que permiten su unión, y valorar dicha unión en presencia o ausencia de un compuesto de prueba; en el que dicho polipéptido PRO10272 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con los residuos 1 o X a 177 del polipéptido mostrado en la figura 6, en el que X es cualquier número de 28 a 38; y en el que dicho polipéptido PRO5801 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con:

(a) los residuos 1 o Y a Z o 502 del polipéptido mostrado en la figura 12, siendo Y cualquier número de 10 a 20 y siendo Z cualquier número de 284 a 294; o b) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia codificante de longitud completa del ADNc depositado bajo el número de acceso ATCC PTA-202.

7. Método de detección de un polipéptido PRO5801 en una muestra sospechosa de contener un polipéptido PRO5801, comprendiendo dicho método poner en contacto dicha muestra con un polipéptido PRO10272 y determinar la formación de un conjugado de polipéptidos PRO5801/PRO10272 en dicha muestra, en el que la formación de dicho conjugado es indicativa de la presencia de un polipéptido PRO5801 en dicha muestra, en el que:

dicho polipéptido PRO10272 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con los residuos 1

o X a 177 del polipéptido mostrado en la figura 6, en el que X es cualquier número de 28 a 38; y en el que dicho polipéptido PRO5801 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con:

(a) los residuos 1 o Y a Z o 502 del polipéptido mostrado en la figura 12, siendo Y cualquier número de 10 a 20 y siendo Z cualquier número de 284 a 294; o b) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia codificante de longitud completa del ADNc depositado bajo el número de acceso ATCC PTA-202.

8. Método de detección de un polipéptido PRO10272 en una muestra sospechosa de contener un polipéptido PRO10272, comprendiendo dicho método poner en contacto dicha muestra con un polipéptido PRO5801 y determinar la formación de un conjugado de polipéptidos PRO5801/PRO10272 en dicha muestra, en el que la formación de dicho conjugado es indicativa de la presencia de un polipéptido PRO10272 en dicha muestra, en el que:

dicho polipéptido PRO10272 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con los residuos 1

o X a 177 del polipéptido mostrado en la figura 6, en el que X es cualquier número de 28 a 38; y en el que dicho polipéptido PRO5801 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con:

(a) los residuos 1 o Y a Z o 502 del polipéptido mostrado en la figura 12, siendo Y cualquier número de 10 a 20 y siendo Z cualquier número de 284 a 294; o b) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia codificante de longitud completa del ADNc depositado bajo el número de acceso ATCC PTA-202.

9. Método según la reivindicación 7 o la reivindicación 8, en el que dicha muestra comprende células sospechosas de expresar dicho polipéptido.

10. Método según la reivindicación 7, en el que dicho polipéptido PRO10272 está marcado con un marcador detectable,

o según la reivindicación 8, en el que dicho polipéptido PRO5801 está marcado con un marcador detectable.

11. Método según la reivindicación 7, en el que dicho polipéptido PRO10272 está unido a un soporte sólido, o según la reivindicación 8, en el que dicho polipéptido PR05801 está unido a un soporte sólido.

12. Método ex vivo de unión de una molécula bioactiva a una célula que expresa un polipéptido PRO5801, comprendiendo dicho método poner en contacto dicha célula con un polipéptido PRO10272 que está unido a dicha molécula bioactiva y permitir que dichos polipéptidos PR05801 y PRO10272 se unan entre sí, uniendo así dichas moléculas bioactivas a dicha célula, en el que:

dicho polipéptido PRO10272 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con los residuos 1

o X a 177 del polipéptido mostrado en la figura 6, en el que X es cualquier número de 28 a 38; y en el que dicho polipéptido PRO5801 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con:

(a) los residuos 1 o Y a Z o 502 del polipéptido mostrado en la figura 12, siendo Y cualquier número de 10 a 20 y siendo Z cualquier número de 284 a 294; o b) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia codificante de longitud completa del ADNc depositado bajo el número de acceso ATCC PTA-202.

13. Método ex vivo de unión de una molécula bioactiva a una célula que expresa un polipéptido PRO10272, comprendiendo dicho método poner en contacto dicha célula con un polipéptido PRO5801 que está unido a dicha molécula bioactiva y permitir que dichos polipéptidos PR05801 y PRO10272 se unan entre sí, uniendo así dichas moléculas bioactivas a dicha célula, en el que:

dicho polipéptido PRO10272 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con los residuos 1

o X a 177 del polipéptido mostrado en la figura 6, en el que X es cualquier número de 28 a 38; y en el que dicho polipéptido PRO5801 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con:

(a) los residuos 1 o Y a Z o 502 del polipéptido mostrado en la figura 12, siendo Y cualquier número de 10 a 20 y siendo Z cualquier número de 284 a 294; o b) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia codificante de longitud completa del ADNc depositado bajo el número de acceso ATCC PTA-202.

14. Método según la reivindicación 12 o la reivindicación 13, en el que dicha molécula bioactiva es una toxina, un marcador radioactivo o un anticuerpo.

15. Método según la reivindicación 14, en el que dicha molécula bioactiva provoca la muerte de dicha célula.

16. Método ex vivo de modulación de por lo menos una actividad biológica de una célula que expresa un polipéptido PRO5801, comprendiendo dicho método poner en contacto dicha célula con un polipéptido PRO10272, mediante lo cual dicho polipéptido PRO10272 se une a dicho polipéptido PR05801, o con un anticuerpo según la reivindicación 1 ó 2, modulando así por los menos una actividad biológica de dicha célula, en el que:

dicho polipéptido PRO10272 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con los residuos 1

o X a 177 del polipéptido mostrado en la figura 6, en el que X es cualquier número de 28 a 38; y en el que dicho polipéptido PRO5801 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con:

(a) los residuos 1 o Y a Z o 502 del polipéptido mostrado en la figura 12, siendo Y cualquier número de 10 a 20 y siendo Z cualquier número de 284 a 294; o b) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia codificante de longitud completa del ADNc depositado bajo el número de acceso ATCC PTA-202 y en el que dicha actividad biológica es una función inmune, o en la que se elimina la célula.

17. Método ex vivo de modulación de por lo menos una actividad biológica de una célula que expresa un polipéptido PRO10272, comprendiendo dicho método poner en contacto dicha célula con un polipéptido PRO5801, mediante lo cual dicho polipéptido PRO5801 se une a dicho polipéptido PRO10272, modulando así por los menos una actividad biológica de dicha célula, en el que:

dicho polipéptido PRO10272 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con los residuos 1

o X a 177 del polipéptido mostrado en la figura 6, en el que X es cualquier número de 28 a 38; y en el que dicho polipéptido PRO5801 tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con:

(a) los residuos 1 o Y a Z o 502 del polipéptido mostrado en la figura 12, siendo Y cualquier número de 10 a 20 y siendo Z cualquier número de 284 a 294; o

b) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia codificante de longitud completa del ADNc depositado bajo el número de acceso ATCC PTA-202 y en el que dicha actividad biológica es una función inmune, o en la que se elimina la célula.

18. Utilización de un polipéptido PRO10272 en la preparación de un medicamento para unir una molécula bioactiva a una célula que expresa un polipéptido PRO5801 o modular por lo menos una actividad biológica de una célula que expresa un polipéptido PRO5801, en la que dicha actividad biológica es una función inmune, y en la que dichos PRO10272 y PRO5801 son tal como se definen en la reivindicación 17.

19. Utilización de un polipéptido PR05801 en la preparación de un medicamento para unir una molécula bioactiva a una célula que expresa un polipéptido PRO10272 o modular por lo menos una actividad biológica de una célula que expresa un polipéptido PRO10272, en la que dicha actividad biológica es una función inmune, y en el que dicho PRO5801 y PRO10272 son tal como se definen en la reivindicación 17.

20. Polipéptido PRO10272 para utilizar en un método de tratamiento que comprende unir una molécula bioactiva a una célula que expresa un polipéptido PRO5801 o modular por lo menos una actividad biológica de una célula que expresa un polipéptido PRO5801, en la que dicha actividad biológica es una función inmune, y en la que dichos PRO10272 y PRO5801 son tal como se definen en la reivindicación 17.

21. Polipéptido PR05801 para utilizar en un método de tratamiento que comprende unir una molécula bioactiva a una célula que expresa un polipéptido PRO10272 o modular por lo menos una actividad biológica de una célula que expresa un polipéptido PRO10272, en la que dicha actividad biológica es una función inmune, y en la que dichos PRO5801 y PRO10272 son tal como se definen en la reivindicación 17.

22. Utilización según la reivindicación 18 ó 19, o el polipéptido para utilizar según la reivindicación 20 ó 21, donde dicha molécula bioactiva es una toxina, un marcador radioactivo o un anticuerpo.

23. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 18 ó 19, o el polipéptido para utilizar según la reivindicación 20 ó 21, en la que dicha molécula bioactiva provoca la muerte de la célula.

24. Utilización de un anticuerpo según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en la preparación de un medicamento para modular por lo menos una actividad biológica de una célula que expresa un polipéptido PRO5801, en la que dicha actividad biológica es una función inmune y en la que dicho PR05801 es tal como se define en la reivindicación 17.

25. Anticuerpo según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para utilizar en un método de tratamiento que comprende modular por lo menos una actividad biológica de una célula que expresa un polipéptido PRO5801, en el que dicha actividad biológica es una función inmune y en el que dicho PR05801 es tal como se define en la reivindicación 17.