Mesilato de etilamida del ácido 5-(2,4-dihidroxi-5-isopropil-fenil)-4-(4-morfolin-4-il-metil-fenil)-isoxazol-3-carboxílico, hidratos y polimorfos del mismo y formulaciones que comprenden estas formas.

Mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3carboxílico.

Mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico, hidratos y polimorfos del mismo y formulaciones que comprenden estas formas La presente invención se refiere a nuevas formas de sal de mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico, a hidratos y polimorfos de una nueva sal de este tipo y a nuevas formulaciones que comprenden tales sales.

La familia de chaperonas Hsp90 está comprendida por cuatro miembros conocidos: Hsp90a y Hsp901, ambos en el citosol, grp94 en el retículo endoplásmico, y trap-1 en la mitocondria. Hsp90 es una chaperona celular abundante requerida para el repliegue dependiente del ATP de las proteínas desnaturalizadas o “desplegadas”, y para la maduración conformacional de una variedad de proteínas clave implicadas en la respuesta de crecimiento de la célula a los factores extracelulares. Estas proteínas, que se denominan como proteínas cliente, incluyen los receptores de esteroides, así como diversas proteínas cinasas. Hsp90 es esencial para la sobrevivencia celular eucariótica, y se sobreexpresa en muchos tumores. Las células cancerosas parecen ser sensibles a la inhibición transitoria de la actividad de ATPasa de Hsp90, sugiriendo que los inhibidores de Hsp90 podrían tener un potencial como nuevos fármacos anticancerígenos. Cada miembro de la familia Hsp90 tiene un sitio de unión de ATP conservado en su dominio N-terminal, que se encuentra en otras pocas proteínas de unión de ATP. La débil actividad de la ATPasa de Hsp90 se estimula después de su interacción con diversas proteínas co-chaperonas. Varios compuestos naturales, tales como geldanamicina o radicicol, se unen al sitio de unión de ATP de Hsp90, inhibiendo su actividad de ATPasa. En los sistemas celulares e in vivo, estos fármacos, al unirse a Hsp90, impiden el pliegue de las proteínas cliente, que entonces se degradan en el proteasoma. La 17-alil-amino-17-desmetoxigeldanamicina (17-AAG) , un derivado de geldanamicina, se somete a prueba en estudios clínicos de fase I. Las experiencias clínicas iniciales con la 17-AAG han ofrecido una evidencia preliminar de que pueden alcanzarse concentraciones del fármaco asociadas con la actividad en sistemas pre-clínicos en seres humanos con una toxicidad tolerable, y han proporcionado una primera evidencia de la modulación objetivo en al menos ciertos compartimientos tumorales y sustitutos. La toxicidad limitante de la dosis de la 17-AAG es la toxicidad hepática. La pobre solubilidad de la 17-AAG la hace difícil de formular/administrar, y es difícil su síntesis (en general se obtiene mediante fermentación) . Por consiguiente, se necesitan compuestos alternativos con mejores propiedades fisicoquímicas, y quizás de una especificidad más alta (la 17-AAG inhibe los cuatro parálogos de Hsp90) . El documento WO 2004/072051 da a conocer tales compuestos alternativos, más específicamente una serie de derivados de isoxazol con propiedades de inhibición para las proteínas de choque térmico.

La etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico es un inhibidor de Hsp90 descrito en el documento WO 2004/072051 (ejemplo 78) . El compuesto puede prepararse, por ejemplo, tal como se da a conocer en esta publicación. La etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico es un compuesto poco soluble en agua, que muestra una solubilidad en agua de menos de 0, 1 mg/ml. La solubilidad de la base libre en HCl 0, 1N es de aproximadamente 1 a 2, 5 mg/ml. Adicionalmente, la base libre es ligeramente higroscópica, mostrando una máxima absorción del 1, 8% de agua con una humedad relativa del 80% (r. h.) a 25ºC.

Sorprendentemente, se encontraron nuevas formas de sal de la etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) 4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico, incluyendo la sal de clorhidrato, tartrato, fosfato, hemi-fumarato y mesilato. Se encontró que estas sales y la base libre son cristalinas, haciendo que estas formas sean particularmente adecuadas para el desarrollo farmacéutico.

No se encontró que el mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) isoxazol-3-carboxílico ni el clorhidrato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metilfenil) -isoxazol-3-carboxílico fueran higroscópicos.

Adicionalmente, se encontró que el mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico es superior, comparándose con la base libre, así como con otras sales en cuanto a solubilidad. Además de la ventaja de presentar una alta solubilidad en agua, la sal de mesilato también es adecuada para fabricarse de una manera reproducible en una clara razón de ácido/base. Este hallazgo hace que la sal de mesilato sea particularmente adecuada para el uso en formulaciones líquidas para administración oral, así como para formulaciones intravenosas.

Todas las sales de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3carboxílico muestran una solubilidad más alta, comparándose con la base libre.

La solubilidad de la sal de clorhidrato en agua es de 2, 5 -5 mg/ml; a un pH de 5 es de aproximadamente 1 -2, 5 mg/ml, y es menor de 1 mg/ml en HCl 0, 1N.

La solubilidad de la sal de tartrato en agua es mayor de 2 mg/ml.

La solubilidad de la sal de fosfato en agua es de aproximadamente 0, 5 -1, 0 mg/ml.

La solubilidad de la sal de hemi-fumarato en agua es de aproximadamente 0, 1 -0, 25 mg/ml.

La solubilidad de la sal de mesilato a un pH de 5 es de aproximadamente 1 -2, 5 mg/ml, y de 10 -20 mg/ml en HCl 0, 1N. Se encontró que la solubilidad en agua a un pH de 4 es de 33, 5 mg/ml.

Además de lo anterior, se ha encontrado que el mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico, puede obtenerse en forma de hidratos. La modificación A es una forma anhidra del mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) isoxazol-3-carboxílico, y las formas HA y HB son las formas hidratadas del mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico.

Como un aspecto adicional de la presente invención, se ha encontrado que pueden obtenerse diferentes formas cristalinas de la base libre y de la sal de mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico.

Finalmente, se encontró que la forma cristalina del clorhidrato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropilfenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico no cambiaba mediante su equilibrio en suspensión sobre un intervalo de condiciones aplicadas. La falta de polimorfismo es una propiedad benéfica para una forma sólida diseñada para desarrollarse como medicamento.

Por tanto, en un primer aspecto, la presente invención se refiere a nuevas sales de etilamida del ácido 5- (2, 4dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico, concretamente a mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico, y la presente descripción describe adicionalmente clorhidrato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico, tartrato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico, fosfato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-ilmetil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico, y hemi-fumarato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico.

En un segundo aspecto, la presente invención se refiere a nuevas formas cristalinas e hidratos del mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico.

Adicionalmente, la presente invención se refiere al uso de mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropilfenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil)... [Seguir leyendo]

1. Mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3carboxílico.

2. Forma cristalina de mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) isoxazol-3-carboxílico.

3. Forma cristalina según la reivindicación 2, que es un anhidrato de mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico.

4. Forma cristalina I de anhidrato de mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico que tiene un patrón de difracción de rayos-X, expresado en cuanto a valores de 2 theta, que comprende picos a 8, 0, 11, 9, 13, 9, 14, 2, 16, 7, 18, 5, 19, 4, 22, 7, 23, 3 ± 0, 2 grados.

5. Forma cristalina según la reivindicación 2, que es un hidrato de mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico.

6. Forma de hidrato HA de mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metilfenil) -isoxazol-3-carboxílico que muestra un diagrama de difracción de rayos-X, expresado en cuanto a valores de 2 theta, que comprende picos a 11, 0, 11, 6, 14, 1, 18, 1, 20, 1, 20, 5, 21, 1, 21, 7, 21, 9, 25, 8 ± 0, 2 grados.

7. Forma de hidrato HB de mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metilfenil) -isoxazol-3-carboxílico que muestra un diagrama de difracción de rayos-X, expresado en cuanto a valores de 2 theta, que comprende picos a 6, 2, 10, 1, 12, 6, 14, 5, 18, 0, 18, 5, 19, 0, 20, 4, 20, 9, 21, 8, 22, 2, 25, 4 ± 0, 2 grados.

8. Formulación que comprende mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-ilmetil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico que es una disolución acuosa que comprende mesilato de etilamida del ácido 5 (2, 4-dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico, que está libre de cualquier otra sal, que tiene un pH de entre 3, 2 y 5, 2.

9. Formulación que consiste en una disolución acuosa isotónica de la sal de mesilato de etilamida del ácido 5- (2, 4dihidroxi-5-isopropil-fenil) -4- (4-morfolin-4-il-metil-fenil) -isoxazol-3-carboxílico y el 5% p/p de glucosa o manitol.