Una proteína BTL-II aislada que comprende una secuencia de aminoácidos que consiste en los aminoácidos 29 a457 de SEC ID Nº: 4.

Ácidos nucleicos, proteínas y anticuerpos BTL-II.

La presente solicitud reivindica el beneficio de la solicitud provisional de EE.UU. nº 60/436.185 presentada el 23 de diciembre de 2002 y la solicitud provisional de EE.UU. nº 60/525.298 presentada el 26 de noviembre de 2003.

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La invención se refiere a proteínas similares a butirofilina, específicamente proteínas similares a butirofilina de la subfamilia B7, que son conocidas por modular la función de células efectoras inmunitarias tales como, por ejemplo, linfocitos B y/o linfocitos T. También están incluidos los ácidos nucleicos que codifican tales proteínas, procedimientos para producir tales proteínas, anticuerpos que se unen a tales proteínas, composiciones farmacéuticas que contienen tales proteínas o anticuerpos, procedimientos de uso de tales ácidos nucleicos, proteínas y anticuerpos contra tales proteínas.

ANTECEDENTES

La modulación de una respuesta inmunitaria o inflamatoria puede ser una herramienta valiosa en controlar diversos tipos de enfermedades que incluyen enfermedades autoinmunitarias, enfermedades caracterizadas por inflamación y/o respuesta inmunitaria anormal, e infecciones. En el tratamiento de enfermedades caracterizadas por inflamación y/o respuestas inmunitarias anormales, tales como enfermedades inflamatorias del intestino y enfermedades autoinmunitarias o inflamatorias, se desea la modulación por disminución de una respuesta inmunitaria. En otras situaciones, por ejemplo, cuando se vacuna un paciente para conferir inmunidad a una enfermedad infecciosa, se desea la estimulación de una respuesta inmunitaria. En el ámbito de las vacunas, los adyuvantes que pueden aumentar una respuesta inmunitaria a un antígeno coadministrado pueden ser valiosos en proporcionar protección a largo plazo contra la enfermedad. Particularmente lo que falta en la materia son adyuvantes que puedan estimular una respuesta inmunitaria de la mucosa. Una respuesta inmunitaria de la mucosa, a diferencia de una respuesta inmunitaria sistémica, es valiosa debido a que puede atacar una infección en un punto común de entrada, es decir, en una superficie de la mucosa. La presente invención trata estas necesidades en la materia proporcionando agentes terapéuticos para diagnosticar y tratar enfermedades caracterizadas por inflamación y/o respuestas inmunitarias inapropiadas y/o anormales y agentes terapéuticos que pueden actuar de adyuvantes para estimular una respuesta inmunitaria, particularmente una respuesta inmunitaria de la mucosa.

RESUMEN

La invención engloba proteínas BTL-II aisladas, ácidos nucleicos, anticuerpos, inhibidores y agonistas de BTL-II, y procedimientos para usar estas composiciones.

Se proporciona una proteína BTL-II aislada que comprende una secuencia de aminoácidos que consiste en los aminoácidos x-y de SEC ID Nº: 4 en la que x es el aminoácido en la posición 29 de SEC ID Nº: 4 e y el aminoácido en la posición 457 ó 482 de SEC ID Nº: 4. Tal proteína BTL-II puede comprender los aminoácidos 29 a 457; y/o 29 a 482 de SEC ID Nº: 4. La invención proporciona además una proteína BTL-II aislada que comprende un polipéptido que consiste en una secuencia de aminoácidos al menos el 85%, opcionalmente al menos el 90%, 92%, 94%, 96% o el 98%, idéntica a los aminoácidos 127 a 157 de SEC ID Nº: 10 o SEC ID Nº: 14, o los aminoácidos 126 a 156 de SEC ID Nº: 16, en la que la región de identidad de la secuencia de aminoácidos alineada con los aminoácidos 127 a 157 de SEC ID Nº: 10 o SEC ID Nº: 14, o los aminoácidos 126 a 156 de SEC ID Nº: 16, tiene al menos 20, opcionalmente al menos 25 ó 30, aminoácidos de longitud y el polipéptido puede unirse a un receptor de la superficie celular expresado sobre linfocitos B o linfocitos T y/o puede inhibir la proliferación de linfocitos T. Una secuencia de aminoácidos tal tiene al menos 150 aminoácidos de longitud y es al menos el 85%, opcionalmente al menos el 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% o el 99, 5%, idéntica a los aminoácidos 30 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14 o SEC ID Nº: 16, en la que la región de identidad de la secuencia de aminoácidos alineada con los aminoácidos 30 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14 o SEC ID Nº: 16 tiene al menos 150, opcionalmente al menos 200, 250 ó 300, aminoácidos. Además, la secuencia de aminoácidos puede ser al menos el 90%, opcionalmente al menos el 92%, 94%, 96%, 98%, 99% o el 99, 5%, idéntica a los aminoácidos 30 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14 o SEC ID Nº: 16, 18 y/o puede comprender los aminoácidos 30 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14, SEC ID Nº: 16 o SEC ID Nº: 18.

Por tanto, la invención engloba una proteína BTL-II aislada que comprende un polipéptido que consiste en una secuencia de aminoácidos al menos el 90%, opcionalmente al menos el 92%, 94%, 96%, 98%, 99% o el 99, 5%, idéntica a los aminoácidos 30 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14 o SEC ID Nº: 16, en la que la región de identidad de la secuencia de aminoácidos alineada con los aminoácidos 30 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14 o SEC ID Nº: 16 tiene al menos 150 aminoácidos, en la que la secuencia de aminoácidos es al menos el 85%, opcionalmente al menos el 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% o el 99, 5%, idéntica a los aminoácidos 127 a 157 de SEC ID Nº: 10 o SEC ID Nº: 14, o los aminoácidos 126 a 156 de SEC ID Nº: 16, en la que la región de identidad de la secuencia de aminoácidos alineada con los aminoácidos 127 a 157 de SEC ID Nº: 10 o SEC ID Nº: 14, o los aminoácidos 126 a 156 de SEC ID Nº: 16, tiene al menos 20 aminoácidos de longitud, y en la que el polipéptido puede inhibir la proliferación de linfocitos T. La primera secuencia de aminoácidos puede ser idéntica a los aminoácidos 127 a 157 de SEC ID Nº: 10 o SEC ID Nº: 14, o los aminoácidos 126 a 156 de SEC ID Nº: 16;

Aquí se describe una proteína BTL-II aislada que comprende un polipéptido que consiste en una secuencia de aminoácidos al menos el 80%, opcionalmente al menos el 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% o el 99, 5%, idéntica a los aminoácidos 30 a 457 de SEC ID Nº: 4, en la que el polipéptido comprende no más o menos de 2 dominios similares a Ig, y en la que el polipéptido puede inhibir la proliferación de linfocitos T. La secuencia de aminoácidos puede ser al menos el 80%, 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99%, 99, 5% o el 100% idéntica a los aminoácidos 30 a 247 de SEC ID Nº: 8 o a los aminoácidos 30 a 243 de SEC ID Nº: 12. La secuencia de aminoácidos puede ser al menos el 90%, opcionalmente al menos el 92%, 94%, 96%, 98%, 99%, 99, 5% o el 100%, idéntica a los aminoácidos 30 a 457 de SEC ID Nº: 4.

Aquí se describe una proteína BTL-II de la invención que comprende un primer polipéptido que consiste en una primera secuencia de aminoácidos al menos el 80%, opcionalmente al menos el 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% o el 99, 5%, idéntica a los aminoácidos 247 a 452 de SEC ID Nº: 4 o a los aminoácidos 248 a 447 de SEC ID Nº: 6, en la que la primera secuencia de aminoácidos no comprende una secuencia de aminoácidos al menos el 80%, opcionalmente al menos el 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% o el 99, 5%, idéntica a los aminoácidos 32 a 232 de SEC ID Nº: 4 o a los aminoácidos 27 a 232 de SEC ID Nº: 6 con una región de identidad de la primera secuencia de aminoácidos alineada con SEC ID Nº: 4 de al menos 25, opcionalmente, al menos 50, 75, 100 ó150, aminoácidos, y en la que la proteína no comprende un segundo polipéptido que consiste en una segunda secuencia de aminoácidos al menos el 80%, opcionalmente al menos el 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% o el 99, 5%, idéntica a los aminoácidos 32 a 232 de SEC ID Nº: 4 o a los aminoácidos 27 a 232 de SEC ID Nº: 6 con una región de identidad de la segunda secuencia de aminoácidos alineada con SEC ID Nº: 4 de al menos 25, opcionalmente al menos 50, 75, 100 ó 150, aminoácidos, y en la que el primer polipéptido puede inhibir la proliferación de linfocitos T.

En el presente documento también se describe una proteína BTL-II aislada que comprende un primer polipéptido que consiste en una primera secuencia de aminoácidos al menos el 80%, opcionalmente al menos el 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% o el 99, 5%, idéntica a los aminoácidos 32 a 242 de SEC ID Nº: 8 o SEC ID Nº: 12, en la que la región de identidad de la primera secuencia de aminoácidos alineada con SEC ID Nº: 8 o SEC ID Nº: 12 tiene al menos aproximadamente 50, opcionalmente al menos el aproximadamente 75, 100, 150 ó 200, aminoácidos de longitud, en la que el primer polipéptido comprende un segundo polipéptido... [Seguir leyendo]

1. Una proteína BTL-II aislada que comprende una secuencia de aminoácidos que consiste en los aminoácidos 29 a 457 de SEC ID Nº: 4.

2. La proteína BTL-II de la reivindicación 1 que comprende los aminoácidos 29 a 482 de SEC ID Nº: 4.

3. Una proteína BTL-II aislada que comprende un polipéptido que consiste en una secuencia de aminoácidos al menos un 85% idéntica a los aminoácidos 30 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14, o SEC ID Nº: 16, en la que la región de identidad de la secuencia de aminoácidos alineada con los aminoácidos 30 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14 o SEC ID Nº: 16 tiene al menos 150 aminoácidos, en la que la secuencia de aminoácidos es al menos un 85% idéntica a los aminoácidos 127 a 157 de SEC ID Nº: 10 o SEC ID Nº: 14, o los aminoácidos 126 a 156 de SEC ID Nº: 16, en la que la región de identidad de la secuencia de aminoácidos alineada con los aminoácidos 127 a 157 de SEC ID Nº: 10 o SEC ID Nº: 14 o los aminoácidos 126 a 156 de SEC ID Nº: 16 tiene al menos 20 aminoácidos de longitud, y en la que el polipéptido puede inhibir la proliferación de linfocitos T.

4. La proteína BTL-II de la reivindicación 3, en la que la secuencia de aminoácidos es al menos unl 90% idéntica a los aminoácidos 30 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14 o SEC ID Nº: 16.

5. La proteína BTL-II de la reivindicación 3 ó 4, en la que la secuencia de aminoácidos es al menos un 90% idéntica a los aminoácidos 127 a 157 de SEC ID Nº: 10 o SEC ID Nº: 14 o los aminoácidos 126 a 156 de SEC ID Nº: 16.

6. La proteína BTL-II de una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 5 que comprende los aminoácidos 30 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14, o SEC ID Nº: 16.

7. Una proteína BTL-II aislada que comprende un polipéptido que consiste en una secuencia de aminoácidos al menos un 80% idéntica a los aminoácidos 32 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14 o SEC ID Nº: 16, en la que la región de identidad de la secuencia de aminoácidos alineada con los aminoácidos 32 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14 o SEC ID Nº: 16 tiene al menos 275 aminoácidos, y en la que el polipéptido puede inhibir la proliferación de linfocitos T.

8. La proteína BTL-II de la reivindicación 7, en la que la secuencia de aminoácidos es al menos un 90% idéntica a los aminoácidos 32 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14 o SEC ID Nº: 16.

9. La proteína BTL-II de la reivindicación 8, en la que la secuencia de aminoácidos comprende los aminoácidos 32 a 358 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14 o SEC ID Nº: 16.

10. Una proteína BTL-II aislada que comprende un primer polipéptido que consiste en una primera secuencia de aminoácidos al menos un 85% idéntica a los aminoácidos 32 a 358 de SEC ID Nº: 10, en la que la región de identidad de la primera secuencia de aminoácidos alineada con SEC ID Nº: 10 tiene al menos aproximadamente 175 aminoácidos de longitud, en la que la primera secuencia de aminoácidos no tiene más de aproximadamente 390 aminoácidos de longitud, en la que el primer polipéptido puede inhibir la proliferación de linfocitos T, en la que la primera secuencia de aminoácidos no es al menos un 80% idéntica a los aminoácidos 148 a 232 de SEC ID Nº: 4 con una región de identidad de la primera secuencia de aminoácidos alineada con los aminoácidos 148 a 232 de SEC ID Nº: 4 de al menos aproximadamente 40 aminoácidos, y en la que la proteína BTL-II no comprende una segunda secuencia de aminoácidos que es al menos un 80% idéntica a los aminoácidos 148 a 232 de SEC ID Nº: 4 con una región de identidad de la segunda secuencia de aminoácidos alineada con los aminoácidos 148 a 232 de SEC ID Nº: 4 de al menos aproximadamente 40 aminoácidos.

11. La proteína BTL-II de la reivindicación 10, en la que la primera secuencia de aminoácidos no tiene más de aproximadamente 270 aminoácidos de longitud.

12. La proteína BTL-II de la reivindicación 10 ó 11, en la que la primera secuencia de aminoácidos es al menos un 90% idéntica a SEC ID Nº: 10.

13. La proteína BTL-II de una cualquiera de las reivindicaciones 10 a 12 que comprende los aminoácidos 32 a 242 de SEC ID Nº: 8 o SEC ID Nº: 12.

14. La proteína BTL-II de la reivindicación 1, 3, 7, ó 10 que comprende además un polipéptido heterólogo.

15. La proteína BTL-II de la reivindicación 14, en la que el polipéptido heterólogo es una región Fc de un anticuerpo.

16. Un fragmento inmunogénico de una secuencia seleccionada del grupo que consiste en SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14, o SEC ID Nº: 16,

en el que el fragmento inmunogénico atraviesa las posiciones 141 a 143 de SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 14 o SEC ID Nº: 16, en el que el fragmento inmunogénico es capaz de provocar anticuerpos que se unen específicamente al fragmento inmunogénico, y en el que el fragmento inmunogénico tiene al menos 10 aminoácidos de longitud.

17. Un anticuerpo aislado que se une específicamente a una proteína BTL-II que consiste en los aminoácidos 1 a 457 de SEC ID Nº: 4 para su uso en promover una respuesta sistémica o inmunitaria de la mucosa contra un antígeno, en el que el anticuerpo es un antagonista de BTL-II.

18. Un anticuerpo aislado que se une específicamente a una proteína BTL-II que consiste en una secuencia de

aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en: aminoácidos 1 a 247 de SEC ID Nº: 8; aminoácidos 1 a 363 de SEC ID Nº: 10; aminoácidos 1 a 243 de SEC ID Nº: 12; aminoácidos 1 a 359 de SEC ID Nº: 14; y aminoácidos 1 a 358 de SEC ID Nº: 16

para su uso en promover una respuesta sistémica o inmunitaria de la mucosa contra un antígeno, en el que el anticuerpo es un antagonista de BTL-II.

19. El anticuerpo de la reivindicación 17 ó 18, en el que el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal.

20. El anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 17 a 19, en el que el anticuerpo es un anticuerpo humano.

21. Un ácido nucleico BTL-II aislado que comprende un polinucleótido, o su complemento, que consiste en los nucleótidos 1 a 1371 de SEC ID Nº: 3.

22. Un ácido nucleico BTL-II aislado o su complemento, en el que el ácido nucleico BTL-II codifica la proteína BTL-II

o un fragmento inmunogénico de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16.

23. Un vector que comprende el ácido nucleico BTL-II de la reivindicación 21 ó 22.

24. Una célula hospedadora que contiene el vector de la reivindicación 23.

25. Un procedimiento para producir una proteína BTL-II o fragmento inmunogénico que comprende cultivar la célula hospedadora de la reivindicación 24 en condiciones que permiten la expresión de la proteína BTL-II o un fragmento inmunogénico.

26. Una célula huésped genéticamente manipulada para expresar la proteína BTL-II o fragmento inmunogénico de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16.

27. La célula hospedadora de la reivindicación 26, en la que la célula hospedadora es una célula de mamífero.

28. La célula hospedadora de la reivindicación 27, en la que la célula hospedadora es una célula CHO.

29. Un procedimiento para producir una proteína BTL-II o un fragmento inmunogénico que comprende cultivar la célula hospedadora de la reivindicación 26 en condiciones que permiten la expresión de la proteína BTL-II o un fragmento inmunogénico.

30. El procedimiento de la reivindicación 25 ó 29 que comprende además aislar la proteína BTL-II de las células hospedadoras o del medio.

31. Una proteína BTL-II de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 para su uso en terapia.

32. Una proteína BTL-II de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 para su uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria del intestino.

33. La proteína BTL-II para el uso de la reivindicación 32, en la que la enfermedad inflamatoria del intestino es la enfermedad de Crohn o la colitis ulcerosa.

34. Un antagonista de BTL-II para su uso para inducir una respuesta inmunitaria contra un antígeno, en el que el antagonista de BTL-II se administra junto con el antígeno, en el que el antagonista de BTL-II es un anticuerpo antiBTL-II.

35. El antagonista de BTL-II para el uso de la reivindicación 34, en el que la respuesta inmunitaria comprende una

respuesta inmunitaria de la mucosa contra el antígeno.

36. El antagonista de BTL-II para el uso de la reivindicación 34, en el que el antagonista es el anticuerpo de culaquiera de las reivindicaciones 17 a 20.

37. El antagonista de BTL-II para el uso de cualquiera de las reivindicaciones 34 a 36, en el que el antígeno se administra por superficie de mucosa.

38. Una proteína BTL-II de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 para su uso para disminuir una respuesta inmunitaria a un antígeno en un mamífero.

39. Una proteína BTL-II de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 para su uso para inhibir la proliferación de linfocitos T.

40. Una proteína BTL-II de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 para su uso para inhibir la producción de citocinas por una célula T.

41. La proteína BTL-II para el uso de las reivindicaciones 39 ó 40, en la que la célula T se pone en contacto con la proteína BTL-II in vivo.

42. La proteína BTL-II para el uso de las reivindicaciones 39 ó 40, en la que la célula T se pone en contacto con la proteína BTL-II in vitro.

43. La proteína BTL-II para el uso de cualquiera de las reivindicaciones 39 a 42, en la que la célula T es una célula T humana.

44. La proteína BTL-II para el uso de cualquiera de las reivindicaciones 40 a 43, en la que se inhibe la producción de interferón gamma.

45. La proteína BTL-II para el uso de cualquiera de las reivindicaciones 40 a 44, en la que la producción de IL2 es inhibida por la célula T.

46. La proteína BTL-II para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 40 a 45, en la que la producción de IL5 inhibida por la célula T.

REFERENCIAS CITADAS EN LA DESCRIPCIÓN

Esta lista de referencias citadas por el solicitante es únicamente para la comodidad del lector. No forma parte del documento de la patente europea. A pesar del cuidado tenido en la recopilación de las referencias, no se pueden excluir errores u omisiones y la EPO niega toda responsabilidad en este sentido.

Documentos de patentes citados en la descripción

Literatura diferente de patentes citada en la descripción