Un vector adenoviral que expresa Flt3L y un vector adenoviral que expresa TK para utilizar,

como una terapia de combinación, en el tratamiento de glioma en sujetos que también reciben una cantidad terapéuticamente efectiva de ganciclovir administrada sistemáticamente

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Campo de la invención

La invención se relaciona con el campo del cáncer, y, en modalidades particulares, con composiciones para utilizar en el tratamiento de gliomas macroscópicos.

Antecedentes de la invención

El cáncer cerebral es una enfermedad devastadora y su forma más común, glioblastoma multiforme (GBM), es responsable del 50% de todos los gliomas intracraneales y 25% de los tumores intracraneales en adultos. El diagnóstico de GBM conlleva una supervivencia media entre doce y dieciocho meses (con un 90-95% de supervivencia de los pacientes menor de dos años), sin la posibilidad de remisión espontánea o tratamiento efectivo. La supervivencia consistentemente corta y la ausencia de remisión espontánea que hace de GBM una enfermedad devastadora también hace la evaluación de nuevas terapias para esta enfermedad relativamente rápida y la supervivencia total inequívoca representa el estándar por el cual las terapias de GBM se evalúan. Las opciones de tratamiento disponibles incluyen cirugía, radioterapia y quimioterapia.

Los tumores cerebrales son un objetivo atractivo para la terapia génica clínica utilizando vectores virales puesto que, inter alia, la enfermedad es rápidamente fatal y no hay terapias efectivas disponibles [Rainov, N.G., A phase III clinical evaluation of herpes simplex virus type 1 thymidine kinase and ganciclovir gene therapy as an adjuvant to surgical resection and radiation in adults with previously untreated glioblastoma multiforme, Hum Gene Ther, 11:2389-401 (2000); Lang, F.F. et al., Phase I trial of adenovirus-mediated p53 gene therapy for recurrent glioma: biological and clinical results, J Clin Oncol 21:2508-18 (2003); Sandmair, A.M. et al., Thymidine kinase gene therapy for human malignant glioma, using replication-deficient retroviruses or adenoviruses, Hum Gene Ther, 11: 2197-205 (2000); Klatzmann, D. et al., A phase I/II study of herpes simplex virus type 1 thymidine kinase "suicide" gene therapy for recurrent glioblastoma, Study Group on Gene Therapy for Glioblastoma, Hum Gene Ther, 9:2595-604 (1998)]. De hecho, la terapia génica es una modalidad terapéutica novedosa atractiva. Los vectores virales pueden transferir los genes a zonas del cerebro relativamente grandes tales como aquellas que comprenden y rodean un tumor cerebral [Chiocca, E.A., et al., Viral therapy for glioblastoma, Cancer J, 9:167-79 (2003); Fulci, G. et al., Oncolytic viruses for the therapy of brain tumors and other solid malignancies: a review, Front Biosci, 8:346-60 (2003); Castro, M.G. et al., Current and future strategies for the treatment of malignant brain tumors, Pharmacol Ther, 98:71-108 (2003)]. A pesar de la eficacia experimental de terapia génica, las pruebas clínicas en humanos han fallado para proporcionar mayores avances terapéuticos [Rainov, N.G., A phase III clinical evaluation of herpes simplex virus type 1 thymidine kinase and ganciclovir gene therapy as an adjuvant to surgical resection and radiation in adults with previously untreated glioblastoma multiforme, Hum Gene Ther, 11:2389-401(2000); Lang, F.F. et al., Phase I trial of adenovirusmediated p53 gene therapy for recurrent glioma: biological and clinical results, J Clin Oncol, 21:2508-18 (2003); Sandmair, A.M. et al., Thymidine kinase gene therapy for human malignant glioma, using replication-deficient retroviruses or adenoviruses, Hum Gene Ther, 11: 2197-205 (2000); Klatzmann, D. et al., A phase I/II study of herpes simplex virus type 1 thymidine kinase "suicide" genie therapy for recurrent glioblastoma, Study Group on Gene Therapy for Glioblastoma, Hum Gene Ther, 9:2595-604 (1998)]. Uno de los defectos de las pruebas clínicas previas, es que necesariamente se concentran solo en enfoques terapéuticos (por ejemplo, la citotoxicidad condicional o inmunoterapia). Además, los modelos de tumores cerebrales microscópicos utilizados experimentalmente pueden no reflejar fielmente tumores humanos de gran tamaño.

Otra divulgación es Cancer Gene Therapy, 9, 2002, 917-924, que revela el uso de Ad-TK y ganciclovir, opcionalmente combinado con Ad-MCSF, para el tratamiento de glioma.

Por lo tanto sigue existiendo una necesidad en el oficio de tratamientos efectivos para el cáncer cerebral que obvien las limitaciones mencionadas anteriormente, y tenga la ventaja de técnicas terapéuticas génicas.

Los ejemplos anteriores del oficio relacionado y las limitaciones relacionadas con el mismo tienen la intención de ser ilustrativas y no exclusivas. Otras limitaciones del oficio relacionado serán evidentes para aquellos de habilidad en el oficio después de una lectura de la especificación y un estudio de los dibujos.

Resumen de la invención

Las siguientes modalidades y aspectos de estas se describen e ilustran en conjunto con las composiciones que están destinadas a ser ejemplares e ilustrativas, sin limitar el alcance. En varias modalidades, uno o más de los problemas descritos anteriormente han sido reducidos o eliminados, mientras que otras modalidades se dirigen a otras mejoras.

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De acuerdo con un primer aspecto de la presente invención se proporciona un vector adenoviral que expresa Flt3L y un vector adenoviral que expresa TK para utilizar, como una terapia de combinación, en el tratamiento de glioma en sujetos que también reciben una cantidad terapéuticamente efectiva de ganciclovir administrada sistemáticamente.

Se prefiere que el vector adenoviral que expresa TK exprese HSV-TK.

De acuerdo con un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona un modelo animal para el tratamiento del glioma, que comprende una rata en donde la rata lleva en al menos una porción de las células de su cerebro por lo menos un ADN de TK exógeno y al menos un ADN de Flt3L exógeno.

Otras características y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada, tomada en conjunto con los dibujos acompañantes, que ilustran, a modo de ejemplo, varias características de las modalidades de la invención.

Breve descripción de las figuras

Modalidades ejemplares se ilustran en las figuras de referencia de los dibujos. Se pretende que las modalidades y figuras reveladas en este documento se deben considerar ilustrativas y no restrictivas.

Figura 1 ilustra tamaños de tumor (a1-3) a los 3, 6 y 10 días después de la implantación de células CNS1, de acuerdo con una modalidad de la presente invención. Los cerebros se tiñeron con anticuerpo ED1, que perfila la zona de tumor. Con el tiempo los tumores aumentaron de tamaño, y permanecieron localizados en el hemisferio de inyección como se indica por las flechas. (b1-3) La eficiencia de 8x107pfu de cualquiera RAdTK+ganciclovir (GCV) o RAdFlt3L para inhibir el crecimiento de tumores de diferentes tamaños.

Figura 2 ilustra la supervivencia de animales con tumores macroscópicos tratados en el día 10 con RAdTK + GCV (1x107pfu) y RAdFlt3L/RAdCD40L/RAdIL-12 (1x107pfu) y todos los grupos control necesarios como se indica, de acuerdo con una modalidad de la presente invención. Cada uno de los virus terapéuticos combinados con RAdO (1x107pfu), fueron utilizados como otros controles. Después de la inyección intra-tumoral de virus, los animales fueron inyectados dos veces diariamente con 25mg/kg de GCV, durante siete días.

Figura 3 ilustra la supervivencia de animales inmunosuprimidos con tumores macroscópicos tratados en el día 10 con RAdTK+GCV (1x107pfu) y RAdFlt3L (1x107pfu) y todos los grupos control necesarios como se indica, de acuerdo con una modalidad de la presente invención. Después de la inyección intra-tumoral del virus, los animales fueron inyectados dos veces diariamente con 25mg/kg de GCV durante siete días. La inmunosupresión se inició el día siete y continuó durante todo el experimento. Los animales recibieron 10mg/kg de ciclosporina A, administrada por vía oral con sonda gástrica dos veces cada día.

Descripción detallada

A menos que se defina de otra manera, los términos técnicos y científicos utilizados en este documento tienen el mismo significado que el comúnmente entendido por alguien de habilidad en el oficio al cual esta invención pertenece. Singleton et al., Dictionary of Microbiology and Molecular Biology 2nd ed, J. Wiley & Sons (New York, NY 1994); March, Advanced Organic Chemistry Reactions, Mechanisms and Structure 4th ed., J. Wiley... [Seguir leyendo]

1. Un vector adenoviral que expresa Flt3L y un vector adenoviral que expresa TK para utilizar, como una terapia de combinación, en el tratamiento de glioma en sujetos que también reciben una cantidad terapéuticamente efectiva de ganciclovir administrada sistemáticamente.

2. Los vectores virales de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el vector adenoviral que expresa TK expresa HSVTK.

3. Un modelo animal para el tratamiento de glioma, que comprende una rata en donde la rata lleva en al menos una porción de las células de su cerebro por lo menos un ADN de TK exógeno y por lo menos un ADN de Flt3L exógeno