PROCEDIMIENTO PARA EL CONTROL DEL COLESTEROL CON UNA MEZCLA DE CITOCINA LIBRE DE SUERO Y LIBRE DE MITÓGENOS.

Procedimiento para el control del colesterol con una mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos. Introducción La presente invención se refiere a una mezcla libre de suero y libre de mitógenos, compuesta de proporciones específicas de citocinas IL-1ß, TNF-, IFN- y GM-CSF con respecto a la interleucina 2 (IL-2), tal como la inyección de interleucina leucocitaria (LI) o Multikine®, así como a los métodos para tratar o evitar enfermedades o trastornos, como por ejemplo enfermedades cardiovasculares, dislipidemia, dislipoproteinemia, hiperlipidemia, trastorno del metabolismo de la glucosa, síndrome X, trastorno asociado al receptor activado por proliferadores de peroxisomas, obesidad, hipertensión y enfermedades renales. Antecedentes de la invención Las pruebas que vinculan un nivel elevado de colesterol en suero con una enfermedad coronaria (CHD) son abrumadoras; las CHD son la principal causa de fallecimiento entre mujeres y hombres estadounidenses. Se ha demostrado que la obesidad, la hiperlipidemia, la dislipidemia, la dislipoproteinemia y la diabetes desempeñan un papel causal en las enfermedades cardiovasculares ateroscleróticas. Además, una enfermedad del ser humano, denominada «síndrome X» o «síndrome metabólico» se manifiesta a través de un metabolismo anormal de la glucosa (resistencia de la insulina), una elevada presión sanguínea (hipertensión) y un desequilibrio lipídico en sangre (dislipidemia). Ver Reaven, 1993, Annu. Rev. Med. 44:121-131. El colesterol circulante transportado mediante lipoproteínas plasmáticas, que son partículas de una compleja composición lipídica y proteica que transportan lípidos en la sangre, contribuye a la aparición de enfermedades. La lipoproteína de baja densidad (LDL) y la lipoproteína de alta densidad (HDL) son las principales proteínas transportadoras de colesterol. Se cree que la LDL es la responsable del suministro del colesterol desde el hígado, donde se sintetiza o se obtiene a partir de fuentes alimenticias, a tejidos extrahepáticos del organismo. La expresión «transporte inverso de colesterol» describe el transporte de colesterol desde tejidos extrahepáticos hasta el hígado, donde se cataboliza y se elimina. Se cree que las partículas de HDL del plasma desempeñan un papel fundamental en el proceso de transporte inverso, actuando como depuradoras del colesterol tisular. La HDL también es responsable de la eliminación de lípidos que no son colesterol, del colesterol oxidado y de otros productos oxidados procedentes del torrente sanguíneo. La aterosclerosis, por ejemplo, es una enfermedad progresiva de evolución lenta que se caracteriza por la acumulación de colesterol dentro de la pared arterial. Existen pruebas contundentes que respaldan la creencia de que los lípidos depositados en lesiones ateroscleróticas proceden principalmente de las lipoproteínas plasmáticas que contienen apolipoproteína B (apo B), entre las que se incluyen quilomicrones, VLDL, IDL y LDL. La lipoproteína que contiene apo B, y en concreto la LDL, ha pasado a ser popularmente conocida como el colesterol «malo». Por el contrario, los niveles de HDL en suero presentan una correlación inversa con las enfermedades coronarias; de hecho, los niveles elevados de HDL en suero se consideran un factor de riesgo negativo. Existe la hipótesis de que los altos niveles de HDL en plasma no sólo protegen frente a enfermedades arteriales coronarias, sino que incluso pueden provocar el retroceso de la placa aterosclerótica (por ejemplo, ver Badimon et al., 1992, Circulation 86:(supl. 111) 86-94; Dansky y Fisher, 1999, Circulation 100: 1762-3.). Así pues, la HDL ha pasado a conocerse popularmente como el colesterol «bueno». Transporte de colesterol ES 2 367 441 T3 El sistema de transporte de grasas puede dividirse en dos vías: una exógena, para el colesterol y los triglicéridos absorbidos del intestino, y otra endógena, para el colesterol y los triglicéridos que acceden al torrente sanguíneo desde el hígado y otros tejidos no hepáticos. En la vía exógena, las grasas alimenticias son empaquetadas en partículas lipoproteicas denominadas quilomicrones, que acceden al torrente sanguíneo y suministran sus triglicéridos al tejido adiposo para su almacenamiento y a los músculos para su oxidación para el suministro de energía. El resto del quilomicrón, que contiene ésteres de colesterilo, es eliminado de la circulación mediante un receptor específico que sólo se encuentra en las células hepáticas. Posteriormente, este colesterol pasa a estar disponible de nuevo para el metabolismo celular o para proceder a su reciclaje hacia tejidos extrahepáticos, como las lipoproteínas plasmáticas. En la vía endógena, el hígado segrega una partícula lipoproteica de grandes dimensiones y de densidad muy baja (VLDL) que pasa al torrente sanguíneo. El núcleo de la VLDL consta principalmente de triglicéridos sintetizados en el hígado, con una cantidad más pequeña de ésteres de colesterilo sintetizados en el hígado o reciclados a partir de quilomicrones. En la superficie de la VLDL aparecen dos proteínas predominantes: la apolipoproteína B-100 (apo B­ 100) y la apolipoproteína E (apo E), aunque se encuentran otras apolipoproteínas, como la apolipoproteína CM (apo CIII) y la apolipoproteína CII (apo CII). Cuando una VLDL llega a los capilares de un tejido adiposo o de un músculo, se extrae su triglicérido, lo cual desemboca en la formación de un nuevo tipo de partículas, que se denominan 2 ES 2 367 441 T3 lipoproteínas de densidad intermedia (IDL), o bien en que el resto de la VLDL reduce su tamaño y aumenta su contenido en ésteres de colesterilo en relación con una VLDL, aunque conservando sus dos apoproteínas. En los seres humanos, aproximadamente la mitad de las partículas IDL son retiradas rápidamente de la circulación, generalmente en el plazo de entre dos y seis horas desde su formación. Esto se debe a que las partículas IDL se unen fuertemente a las células hepáticas, que extraen el colesterol de la IDL para crear nuevas VLDL y ácidos biliares. La IDL no captada por el hígado se cataboliza mediante la lipasa hepática, una enzima unida al proteoglicano en las células hepáticas. La apo E se separa de la IDL cuando ésta es transformada en LDL. La apo B-100 es la única proteína de la LDL. Principalmente, el hígado absorbe y degrada el colesterol circulante hasta formar ácidos biliares, que son los productos finales del metabolismo del colesterol; la absorción de las partículas que contienen colesterol se efectúa con la mediación de los receptores de LDL, que están presentes en altas concentraciones en hepatocitos. El receptor de LDL se une tanto a la apo E como a la apo B-100, y es el responsable de captar y retirar de la circulación la IDL y la LDL. Además, los receptores de remanentes son responsables de limpiar los quilomicrones y las partes restantes de la VLDL (es decir, LDL). No obstante, la afinidad de la apo E para el receptor de LDL es mayor que la de la apo B-100; en consecuencia, las partículas LDL presentan una vida útil en circulación mucho mayor que las partículas LDL. La LDL circula durante una media de dos días y medio antes de unirse a los receptores de LDL en el hígado y en otros tejidos. Los altos niveles en suero de LDL, el colesterol «malo», se asocian positivamente a las enfermedades coronarias; por ejemplo, en la aterosclerosis, el colesterol procedente de la LDL circulante se acumula en las paredes de las arterias. Esta acumulación forma placas voluminosas que obstruyen el flujo sanguíneo hasta que, finalmente, se forma un coágulo que obstruye una arteria y provoca un ataque cardíaco o una apoplejía. En última instancia, la cantidad de colesterol intracelular liberado de la LDL controla el metabolismo del colesterol celular. La acumulación del colesterol celular derivado de VLDL y LDL controla tres procesos: en primer lugar, reduce la capacidad de la célula de elaborar su propio colesterol desactivando la síntesis de la HMG-CoA reductasa, una enzima fundamental en la vía biosintética del colesterol. En segundo lugar, el colesterol derivado de la LDL entrante fomenta el almacenamiento del colesterol mediante la acción de la ACAT, la enzima celular que convierte el colesterol en ésteres de colesterilo que se depositan en gotas de almacenamiento. En tercer lugar, la acumulación de colesterol en las células activa un mecanismo de reacción que inhibe la síntesis celular de nuevos receptores de LDL. Por tanto, las células ajustan su complemento de receptores LDL de tal forma que captan suficiente colesterol para satisfacer las necesidades metabólicas, sin sobrecarga. Ver Brown y Goldstein, In, The Pharmacological Basis Of Therapeutics, 8ª ed., Goodman & Gilman, Pergamon Press, Nueva York, 1990, Ch. 36, pp. 874-896. Pueden resultar atrapados altos niveles... [Seguir leyendo]

1. Mezcla de citocina libre de suero y de mitógenos compuesta de proporciones específicas de citocinas seleccionadas de entre el grupo de IL-1ß, TNF-, IFN- y GM-CSF con respecto a la interleucina-2 (IL-2): IL-1ß con respecto a IL-2 en un intervalo de proporciones de 0,4 - 1,5; TNF- con respecto a IL-2 en un intervalo de proporciones de 3,2 - 11,3; IFN- con respecto a IL-2 en un intervalo de proporciones de 1,5 - 10,9; y GM-CSF con respecto a IL-2 en un intervalo de proporciones de 2,2 - 4,8 para su utilización en el tratamiento o la prevención de una enfermedad o trastorno que pueda tratarse o prevenirse a través de la reducción de los niveles de colesterol. 2. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que las proporciones específicas de citocinas son: IL-1ß con respecto a IL-2 en un intervalo de proporciones de 0,6 a 0,8; TNF- con respecto a IL-2 en un intervalo de proporciones de 7,7 a 10,9; IFN- con respecto a IL-2 en un intervalo de proporciones de 4,9 a 7,1; y GM-CSF con respecto a IL-2 en un intervalo de proporciones de 3,5 a 4,5; 3. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas en un intervalo de aproximadamente 20 UI a 1600 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 4. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 3, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas en un intervalo de aproximadamente 40 UI a 800 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 5. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 4, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas en un intervalo de aproximadamente 35 UI a 75 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 6. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas a 55 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 7. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas a 200 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 8. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas a 400 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 9. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas a 800 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 10. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas a 1200 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 11. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos 23 ES 2 367 441 T3 semanas a 1600 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 12. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas a 2400 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 13. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas a 3200 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 14. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas a 4800 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 15. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas a 8.000 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 16. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas a 9.600 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 17. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de dos semanas a 12.000 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 18. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra cinco veces por semana durante un período de tres semanas a 200 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 19. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra cinco veces por semana durante un período de tres semanas a 400 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 20. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra cinco veces por semana durante un período de tres semanas a 800 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 21. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra cinco veces por semana durante un período de tres semanas a 1.200 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 22. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra cinco veces por semana durante un período de tres semanas a 1.600 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 23. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra cinco veces por semana durante un período de tres semanas a 2.400 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 24. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra cinco veces por semana durante un período de tres 24 ES 2 367 441 T3 semanas a 3.200 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 25. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra cinco veces por semana durante un período de tres semanas a 4.800 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 26. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra cinco veces por semana durante un período de tres semanas a 8.000 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 27. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra cinco veces por semana durante un período de tres semanas a 9.600 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 28. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra cinco veces por semana durante un período de tres semanas a 12.000 UI en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 29. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra tres veces por semana durante un período de ocho a veintiséis semanas en un intervalo de aproximadamente 20 UI a 1.600 UI, en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 30. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 3, en la que dicha mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos se administra cinco veces por semana durante un período de ocho a veintiséis semanas en un intervalo de aproximadamente 20 UI a 1.600 UI, en la que UI representan las unidades internacionales para la interleucina-2 establecidas en la 1ª norma internacional para la IL-2 humana, 86/504, de la Organización Mundial de la Salud. 31. Mezcla de citocina libre de suero y libre de mitógenos según la reivindicación 1, en la que la enfermedad o el trastorno se selecciona de entre el grupo constituido por enfermedad cardiovascular, dislipidemia, dislipoproteinemia, hipertensión e hiperlipidemia.