APLICACIÓN TERAPÉUTICA DEL G-CSF.

La presente invención se refiere a una nueva aplicación terapéutica del G-CSF y del SCF, y más particularmente a su utilización para la preparación de un medicamento útil en medicina humana o veterinaria. El G-CSF (abreviatura de "Granulocyte Colony-Stimulating Factor", es decir "Factor de estimulación de las colónias de granulocitos"), el GM-CSF (abreviatura de "Granulocyte- Macrophage Colony-Stimulating Factor", es decir "Factor de estimulación de las colonias de granulocitos y de macrófagos") y el SCF (abreviatura de "Stem Cell Factor", es decir "Factor de células madre") son factores de crecimiento. Corresponden a tres de las clases de citoquinas denominadas factores de crecimiento hematopoyético o CSF (Colony Stimulating Factors). Los CSF forman una familia de glicoproteínas que presentan unas funciones esenciales en la formación de las células sanguíneas. El G-CSF estimula la producción de células hematopoyéticas y de forma predominante la producción de polinucleares. El G-CSF es una glicoproteína y el producto de la expresión de un gen situado en el cromosoma 17. Está producido por diferentes células, tales como los fibroblastos, macrófagos, células endoteliales, y células epiteliales. El G-CSF es detectable en la sangre, y se puede purificar a partir de los sobrenadantes de cultivos de células tumorales humanas. La ingeniería biológica permite también producir un alotipo humano del G-CSF, el G-CSF recombinante humano (rHuG-CSF). En Francia, están disponibles dos medicamentos que pertenecen a la clase del G-CSF: el Neupogen ® (r-metHugG- CSF, Filgrastime, comercializado por Amgen/Produits Roche) y el Granocyte ® (rHugG-CSF, Lénograstime, comercializado por los laboratorios Aventis/Chugai). Estos dos medicamentos se utilizan por vía de inyección subcutánea o por perfusión intravenosa, para una administración sistémica, a unas dosis generalmente comprendidas entre 5 y 10 ug por kilogramo de peso corporal y por día. Las indicaciones actuales del G-CSF en terapéutica humana son el tratamiento de las neutropenias crónicas severas, la reducción de las neutropenias inducidas por los tratamientos quimioterapéuticos anticancerosos mielotóxicos, la reducción de las neutropenias inducidas por las terapias mielosupresivas (quimioterapia o radioterapia) seguidas del trasplante de médula en el tratamiento de los cánceres o de las leucemias, la movilización de las células madre hematopoyéticas para la constitución de un trasplante con vistas a un trasplante de médula (autotrasplante o alotrasplante). Se debe destacar que, en esta última utilización, el objetivo del tratamiento es sacar de la médula ósea las células madre hematopoyéticas y de hacerlas pasar a la sangre circulante. Estas células madre son entonces recogidas por citaféresis sucesivas y constituirán el injerto. Se trata por lo tanto de movilizar al máximo hacia la sangre circulante este contingente de células madre hematopoyéticas que, en el estado normal, se encuentran en cantidad muy reducida en la sangre circulante, lo cual no permite constituir un transplante con una calidad suficiente (esto se resume en el término "movilización " de la médula ósea). Esta técnica de recogida del trasplante por citaféresis después de la movilización de las células madre sustituye ventajosamente la recogida directa de la médula ósea por citopunción que requiere anestesia del paciente y múltiples punciones de la médula. El trasplante así constituido se trasfunde a continuación al paciente, cuya propia médula ósea ha sido destruida por la quimioterapia o la radioterapia; constituye por lo tanto la nueva fuente de producción de las células sanguíneas. EL G-CSF se utiliza de forma habitual para estas diferentes indicaciones. Su inocuidad muy reconocida permite utilizarlo también en personas que gozan de buena salud para constituir unos trasplantes de la médula en el marco de los alotrasplantes. EL SCF (abreviatura de "Stem Cell Factor", es decir "Factor de células madre") es a su vez un factor de crecimiento. Actúa en particular como factor de crecimiento sobre los progenitores hematopoyéticos, y puede movilizar las células madre de la médula hacia la sangre. Actúa también sobre la diferenciación y el funcionamiento de los mastocitos. Actúa por medio de un receptor específico de la familia de las tirosinas quinasas de tipo III (c-KIT). El gen que codifica la producción del SCF se encuentra en el cromosoma 12. En Francia, el SCF no es de uso clínico habitual, está disponible en ensayos terapéuticos en forma de recombinante humano (Ancestim, Recombinant-methionyl Human Stem Cell Factor (R-metHuSCF) (denominación inglesa), bajo el nombre de Stemgen ® (denominación inglesa) producto de la compañía Amgen). Se debe destacar que los recombinantes humanos del G-CSF son eficaces en otras especies animales (Gratwohl et al: Transplantation of G-CSF mobilized allogeneic peripheral blood stem cells in rabbits. Bone Marrow Transplant 1995; 16(1): 63-68); Nohynek GJ et al; Comparison of potency of glycosylated and non glycosylated recombinant human granulocyte colony-stimulating factors in neutropenic and non neutropenic CD rats (Cancer Chemother 2 E03712209 24-10-2011   Pharmacol, 1997; 39: 259-266). Se debe destacar que las nuevas clases de moléculas pueden aumentar el poder movilizador de los factores de crecimiento sobre la médula ósea (Kronenwett R et al: The role of cytokines and adhesion molecules for mobilisation of peripheral blood stem cells, Stem Cells 2000; 18: 320-330; Pless M et al.: Synergy of growth factors during movilization of peripheral blood precursors cells with recombinant Flt3-ligand and granulocyte colony-stimulating factor in rabbits. Exp Hematol 1999; 27: 155-161; Kikuta T et al: Mobilization of hematopoietic primitive and commited progenitor cells into blood in mice by anti-vascular adhesion molecule-1 antibody alone or in combination with granulocyte colony-stimulating factor. Exp Hematol. 2000; 28:311-317; Sweeney EA et al: Increase in circulating SDF-1 after treatment with sulfated glycans. The role of SDF-1 in mobilization. Ann N Y Acad Sci 2001; 938:48-52; Papayannopoulou R et al: Synergistic mobilization of hematopoietic progenitor cells using concurent beta 1 and beta 2 integrin blockade or beta2-deficient mice. Blood 2001; 97:1282-1288; Christ O et al: Combining G-CSF with a blockade of adhesion strongly improves the reconstitutive capacity of mobilized hematopoietic progenitor cells. (Exp Hematol 2001; 29: 380-390). Sin embargo, el G-SCF presenta a su vez un poder de movilización indirecto de la médula ósea además de su efecto proliferativo sobre la línea hematopoyética (Levesque JP et al; Vascular cell adhesion molecule-1 (CD-106) is cleaved by neutrophil proteases in the bone marrow following hematopoietic progenitor cell mobilization by granulocyte colony-stimulating factor. Blood 2001; 98:1289-1297). Es conveniente recordar que la médula ósea, repartida en los diferentes huesos del organismo, es el lugar de producción de las células sanguíneas maduras (eritrocitos, plaquetas, polinucleares, monocitos, linfocitos). La producción de las células sanguíneas tiene lugar a partir de la multiplicación y de la diferenciación de una población de células madre (célula madre hematopoyética, abreviada "CSH"). Estas últimas representan cuantitativamente una fracción muy reducida de la población celular de la médula ósea. Se caracterizan clásicamente por la expresión de un marcador celular denominado CD34 (Grupo de diferenciación 34). Sin embargo, se ha descrito otro tipo de células madre de la médula ósea. Esta población de células madre constituye, también, en el estado normal un contingente muy reducido de los elementos celulares de la médula ósea, pero presenta la capacidad de diferenciarse en múltiples direcciones de naturaleza conjuntiva (hueso, cartílago, fibro-tendón, músculo, grasa) (Pittenger et al: Multilineage potential of human mesenchymal stem cells, Science 1999; 284: 143-147; Dennis et al; A quadripotential mesenchymal progenitor cell isolated from the marrow of an adult mouse. J Bone Miner Res 1999; 14 (5): 700-709; Seshi et al: Human bone marrow stromal cell: coexpresion of markers specific for multiple mesenchymal stem lineage. Blood Cell Mol Dis 2000 (3): 234-246), pero también de naturaleza nerviosa (Woodbury D et al: Adult rat and human bone marrow stromal cells differentitate into neurons. J Neurosci Res 2000; 61: 364-370; Sanchez-Ramos J et al: Adult bone marrow stromal cells differentiate into neural cells in vitro. Exp Neurol. 2000; 164:247-256; Mezey E et al: Turning blood into brain: cells bearing neuronal antigens generated in vivo from bone marrow. Science 2000; 290: 1672-1674; Azizi SA et al: Engraftment and migration of human bone marrow stromal cells implanted in brains of albino rats- similarities... [Seguir leyendo]

1. Utilización del G-CSF (Factor de estimulación de las colonias de granulocitos) para la preparación de un medicamento útil como tratamiento adyuvante en un proceso de reconstrucción de los tejidos nerviosos en un ser vivo, estando el medicamento destinado a la administración por vía general. 2. Utilización según la reivindicación 1, caracterizada porque el G-CSF se utiliza como medicamento en el tratamiento de los accidentes vasculares cerebrales isquémicos o hemorrágicos, de los traumatismos cerebrales, de los accidentes vasculares hemorrágicos o isquémicos de la médula espinal, de los traumatismos de la médula espinal y está destinado a la administración por vía general. 3. Utilización según una de las reivindicaciones 1 y 2, caracterizada porque el G-CSF se utiliza como medicamento destinado a la administración por vía general y se combina con por lo menos otro factor destinado a la administración local o por vía general. 4. Utilización según la reivindicación 3, caracterizada porque este otro factor se selecciona de entre por lo menos uno de los factores siguientes: BMP (Bone Morphogenetic Protein), FGF (fibroblast growth factor), EGF (epidermal growth factor), IGF (insulina-like growth factor), insulina, KGF (keratinocyte growth factor), TGF (transforming growth factor), interferón , interleucina, VEGF (vascular endotelial growth factor), TNF (tumor necrosing factor), GDNF (glial cell ligne-derived neurotrophic factor), NGF (neurotrophin nerve growth factor), HGF (hepatocyte growth factor), eritropoeytina, PDGF (platelet-derived growth factor), heparano sulfato, prostaglandinas, osteoglicina (osteoinductive factor), BCDF (B cell differentiation factor), GDF-5 (growth and differentiation factor-5), hormona de crecimiento; M- CSF (macrophage colony stimulating factor); cualquier factor de crecimiento conocido de origen humano o animal, de extracción o recombinante; cualquier factor biológico que refuerza el poder de movilización de las células madre de la médula ósea hacia la sangre circulante. 5. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque el G-CSF es un recombinante humano. 6. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque el G-CSF es el Filgrastime. 7. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque el G-CSF es el Lenograstime. 8. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizada porque el medicamento se utiliza a una dosis de G-CSF de 0,1 a 1.000 µg, preferentemente de 5 a 10 µg por kilogramo de peso corporal y por día. 9. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizada porque el medicamento se utiliza en medicina humana. 10. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizada porque el medicamento se utiliza en medicina veterinaria. 8 E03712209 24-10-2011