ANTÍGENOS DE CÁNCER Y SU UTILIZACIÓN.

La presente invención se refiere a un nuevo antígeno de cáncer humano que es útil para el diagnóstico de varios tipos de cánceres tales como cáncer pancreático o cáncer de colon y para inmunoterapia, y su uso. Antecedentes de la técnica En la actualidad, el cáncer es la causa número uno de muerte. Se han desarrollado mecanismos de aparición, procedimientos diagnósticos, y procedimientos terapéuticos para el cáncer. Sin embargo, una gran cantidad de cánceres avanzados aún no se han tratado en las presentes circunstancias. A fin de mejorar la situación actual, se considera necesario desarrollar un nuevo procedimiento de diagnóstico precoz y procedimiento terapéutico Hace tiempo que se ha considerado a la inmunoterapia como un procedimiento para tratar cánceres, y se han realizado diversos intentos respecto de tal terapia. Sin embargo, aun no se han mostrado efectos antitumorales suficientes. En forma convencional, la inmunoterapia para los cánceres se ha centrado específicamente en la inmunoterapia no específica. En años recientes, sin embargo, se ha esclarecido que las células T cumplen un papel importante en el rechazo del tumor en los organismos vivos. Como resultado, los esfuerzos se han centrado en el aislamiento de un antígeno de cáncer que reconoce células T que es capaz de inducir a los linfocitos T citotóxicos (CTL) y la determinación de un epitopo de unión al MHC clase I. Hasta la fecha, muchos antígenos de cáncer se han aislado por el procedimiento de clonación de ADNc convencional, por medio de los CTL. Este procedimiento requiere el establecimiento de una línea celular del tumor y el establecimiento de los CTL. En consecuencia, es difícil aislar un antígeno tumoral de los carcinomas diferentes de los melanomas. Además, a fin de aumentar los efectos de la inmunoterapia, se considera que un procedimiento de tratamiento que involucra la mezcla de muchos péptidos es efectivo. A fin de establecer tal procedimiento de tratamiento, es necesario aislar una gran cantidad de antígenos. En consecuencia, el procedimiento de clonación de la expresión del ADNc convencional es problemático ya que lleva mucha mano obra y tiempo para aislar incluso un solo antígeno. En 1995, Pfreundschuh et al. en Alemania y Old et al. en U.S.A. han informado el procedimiento SEREX, que detecta una proteína del antígeno de cáncer reconocida por un anticuerpo en el suero de un paciente de cáncer (Serological Identification of Recombinant cDNA Expression Cloning; Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92, 11810-11813, 1995). Se han aislado muchos antígenos de tumores por este procedimiento. Entre los antígenos aislados por este procedimiento, también se han incluido antígenos tales como MAGE-1 o tirosinasa que inducen los CTL. Por consiguiente, se señala que este procedimiento también es útil como un procedimiento para detectar un antígeno reconocido por la inmunidad mediada por células. Además, se ha informado que un antígeno de cáncer reconocido por este anticuerpo IgG de un paciente fue aislado con el procedimiento descripto anteriormente (Int. J. Cancer 72, 965-971, 1997; Cancer Res. 58, 1034-1041, 1998; Int. J. Cancer 29, 652-658, 1998; Int. J. Oncol. 14, 703-708, 1999; Cancer Res. 56, 4766-4772, 1996; y Hum. Mol. Genet 6, 33-39, 1997). El documento WO99/04265 desvela un gran cantidad de secuencias de péptidos/proteínas que se hallan expresados en las células tumorales. El abordaje usado para la prueba parece haber sido respaldado por anticuerpos autólogos que reconocen el antígeno respectivo. En el Ejemplo 7 se devela que HSP105 es expresado por las células tumorales y reconocido por los anticuerpos autólogos. Sin embargo, el documento completo no proporciona ninguna evidencia de que HSP105 tiene efectivamente algún efecto en la prevención y/o tratamiento de los tumores. El documento Nakatsura et al. (Biochem. Biophys. Res. Comm, vol. 281, 936-944 (2001)) se refiere a estudios de antígenos inmunogénicos sobreexpresados en un cáncer pancreático por medio del procedimiento SEREX. Los autores de este documento hallaron 18 proteínas diferentes sobreexpresadas en las respectivas células cancerosas, que incluyen HSP105. En la sección de discusión de las páginas 941 a 943 los autores afirman que las observaciones realizadas durante sus estudios pueden sugerir la posible utilidad de hsp105 para la inmunoterapia del cáncer. Divulgación de la invención Un objeto de la presente invención es proporcionar: un antígeno de cáncer pancreático humano y/o un antígeno de cáncer de colon humano que se pueden aplicar en el diagnóstico y/o tratamiento de varios tipos de cánceres o tumores que incluyen cáncer pancreático y cáncer de colon como ejemplos representativos; un gen que codifica los mismos; y una vacuna anti-cáncer que usa los mismos. La presente invención proporciona un antígeno de cáncer para usar en prevención y/o tratamiento terapéutico de cánceres, tal antígeno de cáncer es un péptido de cualquiera de los siguientes (A) o (B): 2   (A) un péptido que consiste en la secuencia de aminoácidos mostrada en cualquiera de las SEQ ID NOs: 3 a 29, (B) un péptido que consiste en la secuencia de aminoácidos mostrada en cualquiera de las SEQ ID NOs: 3 a 22 y una adición de uno a 5 aminoácidos, y tiene actividad inmunoestimuladora y activa los linfocitos T citotóxicos que reconocen una proteína del antígeno de cáncer; en el que el antígeno de cáncer tiene actividad estimuladora de las células T que estimula los linfocitos T citotóxicos. La presente invención proporciona un péptido como antígeno de cáncer que tiene actividad inmunoestimuladora. El péptido de la presente invención preferentemente puede activar los linfocitos T citotóxicos que reconocen una proteína del antígeno de cáncer. El péptido de la presente invención consiste en la secuencia de aminoácidos mostrada en cualquiera de las SEQ ID NOS: 3 a 29. En otro aspecto, la presente invención proporciona un péptido, que consiste en una secuencia de aminoácidos con una adición de uno a 5 aminoácidos con respecto a la secuencia de aminoácidos mostrada en cualquiera de las SEQ ID NOS: 3 a 22, y también tiene actividad inmunoestimuladora. El péptido descripto anteriormente preferentemente puede activar los linfocitos T citotóxicos que reconocen una proteína del antígeno de cáncer. En otro aspecto, la presente invención proporciona un agente inmunoestimulante usado para los cánceres, que comprende cualquiera de los péptidos descriptos anteriormente. En otro aspecto, la presente invención proporciona ADN que codifica el antígeno de cáncer mencionado anteriormente de la presente invención. En otro aspecto, la presente invención proporciona células T auxiliares, linfocitos T citotóxicos, o una población de inmunocitos que comprende estas células, que son inducidas por la estimulación in vitro por medio del antígeno o péptido del cáncer mencionado anteriormente de la presente invención, o una mezcla de ellos. En otro aspecto, la presente invención proporciona células T auxiliares, linfocitos T citotóxicos, o una población de inmunocitos que comprende estas células, que son inducidas por la estimulación in vitro por medio del antígeno o péptido del cáncer mencionado anteriormente de la presente invención, o una mezcla de ellos, y un activador inmunológico. El activador inmunológico es preferentemente un factor de crecimiento celular o citoquina. En otro aspecto, la presente invención proporciona antígenos de cáncer para usar en un procedimiento para suprimir un tumor, que comprende introducir las células T auxiliares, linfocitos T citotóxicos descriptos anteriormente, o una población de inmunocitos que comprende estas células en un organismo. El procedimiento descripto anteriormente preferentemente se usa para prevenir y/o tratar cánceres. En otro aspecto, la presente invención proporciona una solución del cultivo celular usada para producir las células T auxiliares o linfocitos T citotóxicos de la presente invención o una población de inmunocitos que comprende estas células, que comprende el antígeno o péptido del cáncer mencionado anteriormente de la presente invención, o una mezcla de ellos. En otro aspecto, la presente invención proporciona un kit del cultivo celular para producir las células T auxiliares o linfocitos T citotóxicos de la presente invención o una población de inmunocitos que comprende estas células, que comprende la solución del cultivo celular descrito anteriormente y un recipiente del cultivo celular. En otro aspecto, la presente invención proporciona una vacuna para el cáncer que comprende el antígeno de cáncer mencionado anteriormente y/o al menos un tipo de péptido de la presente invención. La vacuna para el cáncer descrita anteriormente preferentemente también comprende un adyuvante. En otro aspecto, la... [Seguir leyendo]

1. Antígeno de cáncer para usar en la prevención y/o tratamiento terapéutico de cánceres, tal antígeno de cáncer es un péptido de cualquiera de los siguientes (A) o (B): (A) un péptido que consiste en la secuencia de aminoácidos mostrada en cualquiera de las SEQ ID NO: 3 a 29, (B) un péptido que consiste en la secuencia de aminoácidos mostrada en cualquiera de las SEQ ID NO: 3 a 22 y a una adición de uno a 5 aminoácidos, y tiene actividad inmunoestimuladora y activa los linfocitos T citotóxicos que reconocen una proteína del antígeno de cáncer; en el que el antígeno de cáncer tiene actividad estimuladora de células T de estimulación de los linfocitos T citotóxicos. 2. Un ADN que codifica el antígeno de cáncer de la reivindicación 1 para usar en la prevención y/o tratamiento terapéutico del cáncer, en el que el antígeno de cáncer tiene actividad estimuladora de células T de estimulación de los linfocitos T citotóxicos. 3. Las células T auxiliares, linfocitos T citotóxicos, o una población de inmunocitos que comprende estas células, que son inducidas por la estimulación in vitro mediante el antígeno de cáncer de la reivindicación 1. 4. Las células T auxiliares, linfocitos T citotóxicos, o la población de inmunocitos que comprende estas células de acuerdo con la reivindicación 3, que adicionalmente comprende un activador inmunológico. 5. Células dendríticas o una población de inmunocitos que comprende estas células, que se pulsan in vitro con el antígeno de cáncer de la reivindicación 1. 6. Las células dendríticas o una población de inmunocitos que comprende estás células de acuerdo con la reivindicación 5, que comprende adicionalmente un activador inmunológico. 7. Un kit de cultivo celular para producir las células T auxiliares de los linfocitos T citotóxicos o una población de inmunocitos que comprende estas células de la reivindicación 3 a 6, que comprende una solución de cultivo celular y un recipiente del cultivo celular, en el que la solución del cultivo celular usada para producir las células T auxiliares o linfocitos T citotóxicos, o una población de inmunocitos que comprende estas células de cualquiera de las reivindicaciones 3 a 6, que comprende el antígeno de cáncer de la reivindicación 1. 8. Un medicamento para usar en la prevención y/o tratamiento de los cánceres, que comprende el péptido de la reivindicación 1, y las células T auxiliares, los linfocitos T citotóxicos, las células dendríticas o la población de inmunocitos que comprende estas células de las reivindicación 3 a 6. 9. Un medicamento para usar en la prevención y/o tratamiento de los cánceres, que comprende las células T auxiliares, los linfocitos T citotóxicos, las células dendríticas o la población de inmunocitos que comprende estas células de la reivindicación 3 a 6.   Fig. 1   Fig. 2 39   Fig. 3   Fig. 4   Fig. 5   Fig. 6   Fig. 7 44   Fig. 8 Fig. 9