VECTOR DIRIGIDO A TUMORES.

Vector que comprende por lo menos una secuencia nucleotídica ("NS") que codifica una proteína que se une al tumor que reconoce un antígeno 5T4 y opcionalmente que comprende una secuencia nucleotídica de interés ("NOI") que codifica un producto de interés ("POI"),

siendo capaz el vector de expresar la proteína que se une al tumor en una célula de mamífero y es capaz de administrar una secuencia nucleotídica de interés ("NOI") que codifica un producto de interés ("POI") y/o un POI a un tumor

Vector dirigido a tumores.

La presente invención se refiere a un vector, preferentemente para su utilización en medicina.

Como es bien conocido en la técnica, un vector es una herramienta que permite o facilita la transferencia de una entidad desde un medio a otro. A modo de ejemplo, algunos vectores utilizados en las técnicas del ADN recombinante permiten entidades - tal como un segmento de ADN (tal como un segmento de ADN heterólogo, tal como un segmento de ADNc heterólogo) - que debe transferirse al interior de una célula diana. Opcionalmente, una vez dentro de la célula diana, el vector puede servir a continuación para mantener el ADN heterólogo dentro de la célula o puede actuar como una unidad de replicación de ADN. Ejemplos de vectores utilizados en las técnicas del ADN recombinante incluyen plásmidos, cromosomas, cromosomas artificiales o virus.

De este modo, pueden utilizarse vectores para liberar secuencias de proteínas y/o de nucleótidos para las células diana, tales como las células tumorales.

Sin embargo, como es bien sabido, las secuencias nucleotídicas y las proteínas son moléculas complejas que pueden producirse a partir de fuentes biológicas, más frecuentemente a partir de organismos modificados genéticamente o de cultivos de células. Además, los procedimientos para la producción de secuencias nucleotídicas y proteínas pueden ser complicados, muy laboriosos y costosos. Además, las propiedades farmacológicas y otros aspectos de la función de algunas proteínas - tales como las inmunoglobulinas procedentes de fuentes biológicas no humanas - y las secuencias nucleotídicas pueden diferenciarse frecuentemente en maneras importantes de la actividad de las correspondientes inmunoglobulinas humanas naturales producidas en las células humanas. A modo de información de antecedentes, una inmunoglobulina es un miembro de una familia de proteínas poliméricas relacionadas que son segregadas normalmente en las células de la estirpe de linfocitos B de un vertebrado, cuya función típica es unirse específicamente a la zona de una macromolécula identificada como sin control. Las inmunoglobulinas representan un componente principal del repertorio de respuestas inmunitarias del organismo y son sinónimos de "anticuerpos".

La causa principal de dichas diferencias en la actividad puede ser debida a las variaciones en el modelo de glucosilación de las proteínas procedentes de diferentes especies (estudiadas en Bebbington 1995; en Monoclonal Antibodies: the second generation ed. H. Zola págs. 165-181). Además, la administración generalizada de proteínas (especialmente las que contienen dominios de toxinas) y las secuencias nucleótidas pueden provocar problemas farmacocinéticos y toxicológicos adicionales (estudiado en Scheinberg and Chapman 1995. En Monoclonal antibodies (ed. Birch and Lennox) Capítulo 2.1).

Por lo tanto, la presente invención trata de proporcionar un sistema vectorial mejorado para administrar una secuencia nucleotídicas de interés y/o un producto expresado por la misma.

Según un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un vector que comprende por lo menos una secuencia nucleotídica ("NS") que codifica una proteína que se une al tumor que reconoce un antígeno 5T4 y opcionalmente que comprende una secuencia nucleotídica de interés ("NOI") que codifica un producto de interés ("POI"), en la que el vector es capaz de expresar la proteína que se une al tumor en una célula de mamífero y es capaz de administrar una secuencia nucleotídica de interés ("NOI") que codifica un producto de interés ("POI") y/o un POI a un tumor.

Según un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona un vector de la presente invención para su utilización en medicina.

Según un tercer aspecto de la presente invención, se proporciona un vector de la presente invención para su utilización en el tratamiento del cáncer.

Según un cuarto aspecto de la presente invención, se proporciona una composición que comprende un vector opcionalmente mezclado con un diluyente, excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

Según un quinto aspecto de la presente invención, se proporciona la utilización de un vector en la preparación de un medicamento para el tratamiento de un cáncer.

Según un sexto aspecto de la presente invención, se proporciona la utilización de un vector en la preparación de un medicamento para suministrar la NS que codifica la proteína que se une al tumor y/o la proteína que se une al tumor y opcionalmente el NOI y/o el POI a una célula de mamífero.

Según un séptimo aspecto de la presente invención, se proporciona un sistema de suministro para dirigir por lo menos una NS que codifica una proteína que se une al tumor y opcionalmente un NOI que codifica un POI a una célula tumoral; en el que el sistema de suministro comprende un vector.

Según un octavo aspecto de la presente invención, se proporciona un sistema de suministro de genes según la presente invención para introducir uno o más genes que codifican una proteína que se une al tumor (TBP) en las células de la estirpe de células hematopoyéticas (preferentemente hematopoyéticas mieloides) ya sea in vivo o ex vivo.

Según un noveno aspecto de la presente invención ,se proporciona un sistema de suministro para su utilización en medicina.

Según una forma de realización de la presente invención, se proporciona un vector genético de la presente invención que comprende un gen terapéutico o genes que codifican una TBP, funcionalmente unido a un elemento regulador de la expresión selectivamente funcional en un tipo de células presente en una masa tumoral.

Según una forma de realización de la presente invención, se proporciona un vector genético de la presente invención que comprende un gen terapéutico o genes en los que el gen terapéutico codifica una TBP, que además contiene uno o más dominios efectores.

Según un décimo aspecto de la presente invención, se proporciona un sistema de suministro para su utilización en el tratamiento del cáncer.

Según un undécimo aspecto de la presente invención, se proporciona la utilización de un sistema de suministro en la preparación de un medicamento para tratar una célula tumoral en la que el sistema de suministro se puede administrar ya sea in vivo o ex vivo.

Según una forma de realización de la presente invención, la utilización implica una combinación de una citocina o de un gen que codifica una citocina y uno o más genes de TBP según cualquiera de los aspectos anteriores de la invención.

Según un duodécimo aspecto de la presente invención, se proporciona la utilización de un vector en un procedimiento para preparar una proteína que se une al tumor que comprende expresar una NS que codifica una proteína que se une al tumor en dicho vector.

Según un decimotercer aspecto de la presente invención, se proporciona la utilización de un vector en la preparación de un medicamento para el tratamiento de cáncer en la que el vector comprende por lo menos una secuencia nucleotídica ("NS") que codifica una proteína que se une al tumor capaz de reconocer una célula tumoral; en la que el vector es capaz de expresar la proteína que se une al tumor en una célula de mamífero y es capaz de suministrar un secuencia nucleotídica de interés ("NOI") que codifica un producto de interés ("POI") para una célula de mamífero, preferentemente una célula tumoral, en la que el vector suministra el polinucelótido de interés ex vivo al tumor, y en el que la proteína que se une al tumor reconoce un antígeno 5T4.

Según un decimocuarto aspecto de la presente invención, se proporciona la utilización de un sistema de suministro de genes en la preparación de un medicamento para el tratamiento de células cancerosas de la estirpe celular hematopoyética en la que el vector comprende por lo menos una secuencia nucleotídica ("NS") que codifica una proteína que se une al tumor capaz de reconocer una célula tumoral; en la que el vector es capaz de expresar la proteína que se une al tumor en una célula de mamífero y es capaz de suministrar un secuencia nucleotídica de interés ("NOI") a un tumor, en la que el vector suministra el NOI a las células cancerosas, y en la que la proteína que se une al tumor reconoce un antígeno 5T4.

Según un decimoquinto aspecto de la presente invención, se proporciona un procedimiento de suministro de un nucleótido...

1. Vector que comprende por lo menos una secuencia nucleotídica ("NS") que codifica una proteína que se une al tumor que reconoce un antígeno 5T4 y opcionalmente que comprende una secuencia nucleotídica de interés ("NOI") que codifica un producto de interés ("POI"), siendo capaz el vector de expresar la proteína que se une al tumor en una célula de mamífero y es capaz de administrar una secuencia nucleotídica de interés ("NOI") que codifica un producto de interés ("POI") y/o un POI a un tumor.

2. Vector según la reivindicación 1, en el que la proteína que se une al tumor es o comprende por lo menos parte de un anticuerpo.

3. Vector según la reivindicación 2, en el que el anticuerpo presenta la secuencia de aminoácidos del anticuerpo 5T4 ScFv que comprende la SEC. ID. nº: 1 o presenta la secuencia de aminoácidos del anticuerpo 5T4 Sab que comprende la SEC. ID. nº: 2.

4. Vector según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 3, en el que el anticuerpo es un fragmento 5T4 Fab, 5T4 Fv ó 5T4 ScFv.

5. Vector según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, en el que el anticuerpo es el fragmento 5T4 ScFv con la secuencia de aminoácidos de SEC. ID. nº: 1.

6. Vector según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5, en el que el anticuerpo comprende un fragmento ScFv acoplado a una zona Fc.

7. Vector según la reivindicación 6, en el que el anticuerpo comprende la secuencia de aminoácidos del anticuerpo 5T4 Sab de la SEC ID nº: 2.

8. Vector según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 7, en el que el anticuerpo es un anticuerpo humanizado.

9. Vector según la reivindicación 8, en el que el anticuerpo es un anticuerpo humanizado intacto.

10. Vector según la reivindicación 6 ó 7, en el que el anticuerpo es un anticuerpo humanizado monocatenario.

11. Vector según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 10, en el que el anticuerpo es un anticuerpo injertado en la CDR.

12. Vector según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el vector comprende el NOI.

13. Vector según la reivindicación 12, en el que el NOI es un NOI terapéutico y/o el POI es un POI terapéutico.

14. Vector según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que, en la utilización, el vector es capaz de suministrar el NOI y/o el POI al interior de una masa tumoral.

15. Vector según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que están unidos a la NS que codifica la proteína que se une al tumor y el NOI y/o la proteína que se une al tumor y el POI.

16. Vector según la reivindicación 15, en el que la proteína que se une al tumor y el POI están unidos directamente.

17. Vector según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que se fusionan la NS que codifica la proteína que se une al tumor y el NOI y/o la proteína que se une al tumor y el POI.

18. Vector según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la proteína que se une al tumor y/o el POI es capaz de segregarse.

19. Vector según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que cualquiera o más de la NS que codifica la proteína que se une al tumor, NOI, la proteína que se une al tumor y el POI comprenden además por lo menos un componente funcional adicional, en el que el componente funcional adicional se selecciona de entre el grupo constituido por cualquiera o más de entre una entidad de señalización, un potenciador inmunitario, una toxina, y una enzima biológicamente activa o una secuencia que codifica cualquiera de los mismos.

20. Vector según la reivindicación 19, en el que la entidad de señalización es un péptido señal.

21. Vector según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el vector es un vector vírico.

22. Vector según la reivindicación 21, en el que el vector es un vector retrovírico.

23. Vector según la reivindicación 22, en el que el vector retrovírico comprende un potenciador activador específico del tumor.

24. Vector según la reivindicación 21, en el que el vector es un vector lentivírico.

25. Vector según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la NS que codifica la proteína que se une al tumor y/o el NOI que codifica el POI está unido funcionalmente a un elemento regulador de la expresión selectivamente operativo en una célula de mamífero.

26. Vector según la reivindicación 25, en el que la célula de mamífero es una célula tumoral.

27. Vector según la reivindicación 26, en el que dicho elemento regulador de la expresión es un potenciador activador específico del tumor.

28. Vector según cualquiera de las reivindicaciones 25 a 27, en el que dicha NS que codifica la proteína que se une al tumor comprende además uno o más dominios efectores seleccionado(s) de entre el grupo constituido por una enzima, una enzima que activa un profármaco, una toxina, toda o parte de una citocina, un dominio efector de una cadena pesada de inmunoglobulina, un dominio que activa el macrófago FcgR I, II o a receptores de II y un dominio que proporciona estabilidad a la proteína.

29. Vector según la reivindicación 28, en el que dicho polinucleótido codifica una proteína de fusión.

30. Vector según la reivindicación 29, en el que se segrega dicha proteína de fusión.

31. Vector según cualquiera de las reivindicaciones anteriores para su utilización en medicina.

32. Vector según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30 para su utilización en el tratamiento del cáncer.

33. Composición que comprende un vector según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30 opcionalmente mezclado con un diluyente, excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

34. Utilización de un vector según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30 en la preparación de un medicamento destinado al tratamiento del cáncer.

35. Utilización de un vector según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30 en la preparación de un medicamento para suministrar la NS que codifica la proteína que se une al tumor y/o la proteína que se une al tumor y opcionalmente el NOI y/o el POI a una célula de mamífero.

36. Utilización según la reivindicación 35 en la que la célula de mamífero es una célula tumoral.

37. Utilización según una de las reivindicaciones 35 ó 36, en la que el vector comprende por lo menos una secuencia nucleotídica de interés ("NOI") que codifica un producto de interés ("POI").

38. Utilización de un vector según cualquiera de las reivindicaciones 34 a 37 para suministrar cualquiera o más de una NS que codifica la proteína que se une al tumor, la proteína que se une al tumor, el NOI y/o el POI ex vivo y/o in vivo al tumor.

39. Utilización de un vector según cualquiera de las reivindicaciones 34 a 37 para suministrar un NOI que codifica una proteína segregable que se une al tumor al interior de una masa tumoral.

40. Utilización de un vector según cualquiera de las reivindicaciones 34 a 37 como una fábrica de producción in situ de cualquiera o más de la NS que codifica la proteína que se une al tumor, NOI, POI y la proteína que se une al tumor.

41. Utilización de un vector según cualquiera de las reivindicaciones 34 a 38 cuando está presente en una célula para suministrar cualquiera o más de la NS que codifica la proteína que se une al tumor, NOI, POI y la proteína que se une al tumor a una célula adyacente.

42. Sistema de suministro para dirigir por lo menos una NS que codifica una proteína que se une al tumor y opcionalmente un NOI que codifica un POI a una célula tumoral; en el que el sistema de suministro comprende un vector según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30.

43. Sistema de suministro para introducir por lo menos una NS que codifica una proteína que se une al tumor en una célula hematopoyética; en el que el sistema de suministro comprende por lo menos una NS que codifica una proteína que se une al tumor capaz de reconocer una célula tumoral; y opcionalmente comprende por lo menos una secuencia nucleotídica de interés ("NOI") que codifica un producto de interés ("POI"), y en el que la proteína que se une al tumor reconoce un antígeno 5T4.

44. Sistema de suministro según la reivindicación 43, en el que la célula hematopoyética es una célula hematopoyética mieloide.

45. Sistema de suministro según cualquiera de las reivindicaciones 42 a 44, en el que el NOI codifica una citocina.

46. Sistema de suministro según cualquiera de las reivindicaciones 42 a 45 para su utilización en medicina.

47. Sistema de suministro según cualquiera de las reivindicaciones 42 a 45 para su utilización en el tratamiento del cáncer.

48. Utilización de un sistema de suministro según cualquiera de las reivindicaciones 42 a 45 en la preparación de un medicamento destinado al tratamiento de una célula tumoral en la que el sistema de suministro se puede administrar in vivo o ex vivo.

49. Utilización según la reivindicación 48, en la que el sistema de suministro se puede administrar de forma generalizada o directamente a la célula tumoral.

50. Utilización según la reivindicación 48 ó 49, en la que el medicamento comprende además una o más citocinas.

51. Utilización de un vector según las reivindicaciones 1 a 30, en un procedimiento para preparar una proteína que se une a un tumor que comprende expresar una NS que codifica a una proteína que se une a un tumor en dicho vector.

52. Utilización de un vector en la preparación de un medicamento destinado al tratamiento del cáncer, en la que el vector comprende por lo menos una secuencia nucleotídica ("NS") que codifica una proteína que se une al tumor capaz de reconocer una célula tumoral; en la que el vector es capaz de expresar una proteína que se une al tumor en una célula de mamífero y es capaz de suministrar una secuencia nucleotídica de interés ("NOI") que codifica un producto de interés ("POI") a una célula de mamífero, preferentemente a una célula tumoral, en la que el vector suministra el polinucleótido de interés ex vivo al tumor y en la que la proteína que se une al tumor reconoce un antígeno 5T4.

53. Utilización de un sistema de suministro de genes que comprende un vector en la preparación de un medicamento destinado al tratamiento de células cancerosas de la estirpe celular hematopoyética en la que el vector comprende por lo menos una secuencia nucleotídica ("NS") que codifica una proteína que se une al tumor capaz de reconocer una célula tumoral; en la que el vector es capaz de expresar la proteína que se une al tumor en una célula de mamífero y es capaz de suministrar un secuencia nucleotídica de interés ("NOI") a un tumor, en la que el vector suministra el NOI a las células cancerosas, y en la que la proteína que se une al tumor reconoce un antígeno 5T4.

54. Procedimiento de suministro de un nucleótido de interés (NOI) o de un producto de interés (POI) codificado por dicho nucleótido de interés a un tumor, que comprende suministrar el NOI o el POI a dicho tumor mediante la utilización de un vector en el que dicho vector comprende por lo menos una secuencia nucleotídica ("NS") que codifica una proteína que se une al tumor capaz de reconocer una célula tumoral; en el que el vector es capaz de expresar la proteína que se une al tumor en una célula de mamífero y es capaz de suministrar una secuencia nucleotídica de interés ("NOI") que codifica el producto de interés ("POI") a un tumor en el que el vector suministra el polinucleótido de interés ex vivo al tumor, y en el que la proteína que se une al tumor reconoce un antígeno 5T4.

55. Procedimiento ex vivo para suministrar un NOI a una segunda célula adyacente a una primera célula que comprende la utilización de un vector para suministrar el polinucleótido a dicha primera célula, en el que dicho vector comprende por lo menos una secuencia nucleotídica ("NS") que codifica una proteína que se une al tumor capaz de reconocer una célula tumoral; en el que el vector es capaz de expresar la proteína que se une al tumor en una célula de mamífero y es capaz de suministrar la secuencia nucleotídica de interés ("NOI") a un tumor, y en el que el tumor que se une a la proteína reconoce un antígeno 5T4.

56. Procedimiento ex vivo para expresar una NS que codifica una proteína que se une al tumor en una célula de mamífero en el cultivo, que comprende suministrar a dicha célula de mamífero un vector que comprende la NS que codifica la proteína que se une al tumor en la unión operable con un elemento funcional regulador de la expresión en una célula de mamífero, expresándose dicha NS en dicha célula de mamífero, y reconociendo la proteína que se une al tumor un antígeno 5T4.

57. Procedimiento según la reivindicación 56, en el que dicha NS que codifica una proteína que se une al tumor se expresa en dicha célula de mamífero y se recupera a partir de la misma.

58. Procedimiento según la reivindicación 56, en el que dicha NS que codifica una proteína que se une al tumor además comprende uno o más dominios efectores seleccionado(s) de entre el grupo constituido por una enzima, una enzima que activa un profármaco, una toxina, toda o parte de una citocina, un dominio efector de una cadena pesada de inmunoglobulina, un dominio que activa al macrófago FcgR I, II o a receptores de II y un dominio que proporciona estabilidad a la proteína.

59. Procedimiento según la reivindicación 56, en el que dicha NS que codifica una proteína que se une al tumor codifica una proteína de fusión.

60. Procedimiento según la reivindicación 56, en el que se segrega dicha proteína de fusión.