- Una composición que comprende (a) una preparación de membrana externa del serogrupo B de N.

meningitidis, y (b) la proteína ORF40 de Neisseria meningitidis; en la que el componente (b) se selecciona entre uno o más de los siguientes: - una proteína que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre las SEC DE ID 15-17, o una proteína que comprende un fragmento inmunógeno de una o más de las SEC DE ID 15-17, o una proteína que comprende una secuencia que tiene un 80 % o más de identidad de la secuencia con una o más de las SEC DE ID 15-17; - una proteína que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre las SEC DE ID 18-38; - una proteína que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo constituido por la SEC DE ID 39 o una proteína que comprende un fragmento inmunógeno de la SEC DE ID 39, o una proteína que comprende una secuencia que tiene un 80 % o más de identidad de la secuencia con la SEC DE ID 39; y/o - una proteína que comprende que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo constituido por la SEC DE ID 40 o la SEC DE ID 41 o una proteína que comprende un fragmento inmunógeno de la SEC DE ID 40 o la SEC DE ID 41, o una proteína que comprende una secuencia que tiene un 80 % o más de identidad de la secuencia con la SEC DE ID 40 o la SEC DE ID 41, en la que las SEC DE ID: 15-41 son como se define en las figuras

CAMPO TÉCNICO

La presente invención se refiere a vacunas contra el serogrupo B de Neisseria meningitidis (NmB).

ANTECEDENTES DE LA TÉCNICA

Neisseria meningitidis es un diplococo patógeno humano Gram-negativo no motil. Coloniza la faringe produciendo meningitis y, ocasionalmente, septicemia en ausencia de meningitis. En los Estados Unidos, el índice de ataque es de 0,6-1 por 100.000 personas por año, y puede ser mucho mayor durante los brotes (véanse Lieberman y col., (1996) JAMA 275 (19):1499-1503; Schuchat y col (1997) N Engl J Med 337 (14): 970-976). En países en desarrollo, las tasas endémicas de la enfermedad son mucho mayores y durante las epidemias, las tasas de incidencia pueden alcanzar 500 casos por 100.000 personas por año. La mortalidad es extremadamente elevada, de un 10-20 % en los Estados Unidos, y mucho mayor en países en desarrollo. Tras la introducción de la vacuna conjugada contra Haemophilus influenzae, N. meningitidis es la causa principal de meningitis bacteriana a todas las edades en los Estados Unidos (Schuchat y col (1997) más arriba).

Basándose en el polisacárido capsular del organismo, se han identificado 12 serogrupos de N. meningitidis. La vacuna meningocóccica actualmente en uso es una vacuna de polisacárido tetravalente compuesta por los serogrupos A, C, Y y W135. Tras el éxito de la vacunación contra

H. influenzae, se han desarrollado, sin embargo, las vacunas conjugadas contra los serogrupos A y C.

Sin embargo, el serogrupo B sigue siendo un problema, y es actualmente responsable de aproximadamente el 50 % de toda la meningitis en los Estados Unidos, Europa y Sudamérica. No se puede usar la solución del polisacárido debido a que el polisacárido capsular menB es un polímero de ácido N-acetil neuramínico α(2-8) unido que está también presente en tejido de mamíferos. Esto da como resultado tolerancia al antígeno; de forma similar, si se estimuló una respuesta, podría ser contra sí mismo, y por tanto, indeseable. Con el fin de evitar la inducción de la autoinmunidad e inducir una respuesta inmune protectora, el polisacárido capsular tiene, por ejemplo, que modificarse químicamente sustituyendo los grupos N-acetilo con grupos Npropionilo, que mantienen la antigenicidad específica sin alterar (Romero y Outschoorn (1994) Clin Microbiol Rev 7 (4): 559-575).

El Instituto nacional Noruego de Salud Pública ha producido una vacuna de vesícula de membrana externa (OMV) eficaz contra el serogrupo B [por ejemplo, Bjune y col. (1991) Lancet 338 (8775): 1093-96]. Aunque esta vacuna es segura y evita la enfermedad por NmB, su eficacia está limitada a la cepa usada para preparar la vacuna. Se ha informado de otras vacunas basadas en preparaciones de membrana externa. Es un objeto de la presente invención ampliar la eficacia de estas vacunas a otras cepas.

DIVULGACIÓN DE LA INVENCIÓN

Sorprendentemente, se ha encontrado que la adición de componentes definidos adicionales a vacunas de OMV, amplía significativamente su eficacia.

De esta manera, la presente invención proporciona una composición que comprende (a) una preparación de membrana externa de NmB, y (b) un componente inmunógeno seleccionado entre uno más de los siguientes:

º una proteína dada a conocer en el documento WO99/57280, o uno de sus fragmentos inmunógenos;

• una proteína dada a conocer en el documento WO99/36544, o uno de sus fragmentos inmunógenos;

• una proteína dada a conocer en el documento WO99/24578, o uno de sus fragmentos inmunógenos;

• una proteína dada a conocer en el documento WO00/66791, o uno de sus fragmentos inmunógenos;

• una proteína dada a conocer en Tettelin y col. [Science (2000) 287: 1809-1815], o uno de sus fragmentos inmunógenos;

• una proteína a dada a conocer en Parkhill y col. [Nature (2000) 404. 502-506], o uno de sus fragmentos inmunógenos;

• una proteína dada a conocer en el documento WO97/28273, o uno de sus fragmentos inmunógenos;

• una proteína dada a conocer en el documento WO96/29412, o uno de sus fragmentos inmunógenos;

• una proteína dada a conocer en el documento WO95/03413, o uno de sus fragmentos inmunógenos;

• una proteína dada a conocer en el documento WO99/31132 o uno de sus fragmentos inmunógenos;

• una proteína dada a conocer en el documento WO99/58683, o uno de sus fragmentos inmunógenos;

• una proteína dada a conocer en el documento WO99/55873, o uno de sus fragmentos

inmunógenos; y/o

La proteína PorA, TbpA, TbpB, PilC, OpA, u Omp85 de Neisseria meningitidis.

Si la composición comprende una proteína dada a conocer en el documento WO99/24578, dicha proteína comprende preferiblemente una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo constituido por las SEC DE ID 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 114, 116, 118, 120, 122, 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 1550, 152, 154, 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184, 186, 188, 190, 192, 194, 196, 198, 200, 202, 204, 206, 208, 210, 212, 214, 216, 218, 220, 222, 224, 226, 228, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 242, 244, 246, 248, 250, 252, 254, 256, 258, 260, 262, 264, 266, 268, 270, 272, 274, 276, 278, 290, 282, 284, 286, 288, 290, 292, 294, 296, 298, 300, 302, 304, 306, 308, 310, 312, 314, 316, 318, 320, 322, 324, 326, 328, 330, 332, 334, 336, 338, 340, 342, 344, 346, 348, 350, 352, 354, 356, 358, 360, 362, 364, 366, 368, 370, 372, 374, 376, 378, 380, 382, 384, 386, 388, 390, 392, 394, 396, 398, 400, 402, 404, 406, 408, 410, 412, 414, 416, 418, 420, 422, 424, 426, 428, 430, 432, 434, 436, 438, 440, 442, 446, 448, 450, 452, 454, 456, 458, 460, 462, 464, 468, 470, 472, 474, 476, 478, 480, 482, 484, 486, 488, 490, 492, 494, 496, 498, 500, 502, 504, 506, 508, 510, 512, 514, 516, 518, 520, 522, 524, 526, 528, 530, 532, 534, 536, 538, 540, 542, 544, 546, 548, 550, 552, 554, 556, 558, 560, 562, 564, 568, 570, 572, 574, 576, 578, 580, 582, 584, 586, 588, 590, 592, 594, 596, 598, 600, 602, 604, 606, 608, 610, 612, 614, 616, 618, 620, 622, 624, 626, 628, 630, 632, 634, 636, 638, 640, 642, 644, 646, 648, 650, 652, 654, 656, 658, 660, 662, 664, 666, 668, 670, 672, 674, 676, 678, 680, 682, 684, 686, 688, 690, 692, 694, 696, 698, 700, 702, 704, 706, 708, 710, 712, 714, 716, 718, 720, 722, 724, 726, 728, 730, 732, 734, 736, 738, 740, 742, 744, 746, 748, 750, 752, 754, 756, 758, 760, 762, 764, 766, 768, 770, 772, 774, 776, 778, 780, 782, 784, 786, 788, 790, 792, 794, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 810, 812, 814, 816, 818, 820, 822, 824, 826, 828, 830, 832, 834, 836, 838, 840, 842, 844, 846, 848, 850, 852, 854, 856, 858, 860, 862, 864, 866, 868, 870, 872, 874, 876, 878, 880, 882, 884, 886, 888, 890, y 892, tal como se da a conocer en el documento WO99/24578 (o una proteína que comprende un fragmento inmunógeno de una o más de estas SEC DE ID, o una proteína que comprende una secuencia que tiene una identidad de la secuencia (preferiblemente mayor del 50 %, por ejemplo, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 95 %, 99% o más) con una de estas SEC DE ID).

Si la composición comprende una proteína dada a conocer en el documento WO99/36544, dicha proteína comprende preferiblemente una secuencia de aminoácidos seleccionadas entre el grupo constituido por las SEC DE ID 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, y 90, tal como se da a conocer en el documento WO99/36544 (o una proteína que comprende un fragmento inmunógeno de una o más de estas SEC DE ID, o una proteína que comprende una secuencia que tiene una identidad de la secuencia (preferiblemente mayor del 50 %, por ejemplo, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 95 %, 99 % o más) con una de estas SEC DE ID), las SEC DE ID 2, 4, 4 tal como se da a conocer en el documento WO99/36544 corresponden a las SEC DE ID 15-17 de la presente solicitud. Si la composición comprende una proteína dada a conocer en Tettelin y col. (es decir, una proteína codificada por uno de los genes dados a conocer en el anterior), dicha proteína comprende preferiblemente una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo constituido por NMB0001 y NMB2160 (o una proteína que comprende un fragmento inmunógeno de uno o más de estos 2160 genes, o una proteína que comprende una secuencia que tiene una identidad de la secuencia...

1. Una composición que comprende (a) una preparación de membrana externa del serogrupo B de N. meningitidis, y (b) la proteína ORF40 de Neisseria meningitidis; en la que el componente (b) se selecciona entre uno o más de los siguientes:

• una proteína que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre las SEC DE ID 15-17, o una proteína que comprende un fragmento inmunógeno de una o más de las SEC DE ID 15-17, o una proteína que comprende una secuencia que tiene un 80 % o más de identidad de la secuencia con una o más de las SEC DE ID 15-17;

• una proteína que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre las SEC DE ID 18-38;

• una proteína que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo constituido por la SEC DE ID 39 o una proteína que comprende un fragmento inmunógeno de la SEC DE ID 39, o una proteína que comprende una secuencia que tiene un 80 % o más de identidad de la secuencia con la SEC DE ID 39; y/o

• una proteína que comprende que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo constituido por la SEC DE ID 40 o la SEC DE ID 41 o una proteína que comprende un fragmento inmunógeno de la SEC DE ID 40 o la SEC DE ID 41, o una proteína que comprende una secuencia que tiene un 80 % o más de identidad de la secuencia con la SEC DE ID 40 o la SEC DE ID 41, en la que las SEC DE ID: 15-41 son como se define en las figuras.

2. La composición de la reivindicación 1, en la que el componente (b) es una proteína que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre las SEC DE ID 15-17, o una proteína que comprende un fragmento inmunógeno de una o más de las SEC DE ID 15-17, o una proteína que comprende una secuencia que tiene más de un 80 % de identidad de la secuencia con una o más de las SEC DE ID 15-17 en el que las SEC DE ID: 15-41 son como se ha definido en las figuras.

3. La composición de cualquier reivindicación anterior, en la que el componente (b) incluye una proteína procedente de la cepa del serogrupo B de N. meningitidis (‘NmB').

4. La composición de cualquier reivindicación anterior, en la que el componente (b)

incluye una proteína de una cepa de NmB diferente de la cual se deriva el componente (a).

5. La composición de cualquier reivindicación anterior, en la que uno o más de sus componentes se adsorbe en adyuvante de hidróxido de aluminio.

6. La composición de cualquier reivindicación anterior, en la que el componente (a) comprende vesículas de membrana externa (OMV).

7. La composición de la reivindicación 6, en la que las OMV son un extracto de desoxicolato procedente de Neisseria meningitidis, serogrupo B.

8. La composición de la reivindicación 6 o la reivindicación 7 en la que las OMV son de la cepa 44/76 de Neisseria meningitidis.

9. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en la que el componente de OMV se adsorbe en adyuvante de hidróxido de aluminio.

10. La composición de cualquier reivindicación anterior, que comprende además un componente inmunógeno seleccionado entre las proteínas NspA, PorA, TbpA, TbpB, PilC, OpA, u Omp85 de Neisseria meningitidis.

11. la composición de cualquier reivindicación anterior que comprende uno o más de los siguientes componentes:

º un antígeno protector contra el serogrupo A de Neisseria meningitidis;

º un antígeno protector contra el serogrupo C de Neisseria meningitidis;

º un antígeno protector contra el serogrupo Y de Neisseria meningitidis;

º un antígeno protector contra el serogrupo W de Neisseria meningitidis;

º un antígeno protector contra Haemophilus influenzae;

º una antígeno protector contra pneumococcus;

º un antígeno protector contra la difteria;

º un antígeno protector contra el tétanos;

º un antígeno protector contra la tos ferina;

º un antígeno protector contra Helicobacter pylori;

º un antígeno protector contra la polio; y/o

º un antígeno protector contra el virus de la hepatitis B.

12. La composición de cualquier reivindicación anterior, en la que la composición es una vacuna.

13. La composición de cualquier reivindicación anterior para su uso como un 5 medicamento.

14. El uso de (a) una preparación de membrana externa del serogrupo B de Neisseria meningitidis, y (b) la proteína ORF40 de Neisseria meningitidis tal como se ha definido en la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en la fabricación de. (i) un medicamento para tratar o evitar

10 la infección debida a las bacterias Neisseriales, (ii) un reactivo diagnóstico para detectar la presencia de bacterias Neisseriales o de anticuerpos aumentados contra bacterias Neisseriales, y/o (iii) un reactivo que puede aumentar los anticuerpos contra bacteria Neisseria.

15. Una composición que comprende una preparación de membrana externa de

15 Neisseria meningitidis y la proteína ORF40, preparada a partir de una bacteria que se ha manipulado para hiperproducir ORF40 en su membrana externa, en la que ORF40 es tal como se ha definido en la reivindicación 1 o en la reivindicación 2.

16. Un procedimiento para preparar una bacteria Neisseria meningitidis recombinante 20 para preparar la composición de la reivindicación 15, que comprende manipular una bacteria N. meningitidis de tal manera que hiperproduzca la proteína ORF40 en su membrana externa.