SELECCION DE ALTO RENDIMIENTO DE BIBLIOTECAS DE ADN EXPRESADAS EN HONGOS FILAMENTOSOS.

Método para expresar una pluralidad de proteínas codificadas por una biblioteca de vectores de ADN,

donde la biblioteca de vectores comprende una pluralidad de vectores diferentes, cada vector diferente comprendiendo una secuencia de ácidos nucleicos que codifica proteínas diferentes, dicha secuencia de ácidos nucleicos siendo operativamente enlazada a una región reguladora de la expresión y opcionalmente una secuencia que codifica una señal de secreción, el método incluyendo las etapas de:

(a) suministar una pluralidad de hongos filamentosos individuales, dichos hongos teniendo un fenotipo caracterizado por el crecimiento en suspensión y caracterizado por la producción de elementos transferibles reproductivos que son monoclonales y fácilmente separados los unos de los otros en suspensión;

(b) transfomar de forma estable dichos hongos filamentosos con dicha biblioteca de vectores de ADN para introducir en cada uno de una pluralidad de los hongos individuales al menos una secuencia de ácidos nucleicos que codifica proteínas heterólogas u homólogas;

(c) cultivar los hongos filamentosos transformados en suspensión bajo condiciones propicias para la formación de elementos reproductivos transferibles;

(d) separar entre sí una pluralidad de elementos reproductivos transferibles; y

(e) cultivar en cultivos monoclonales o colonias monoclonales los elementos reproductivos transferibles individuales, bajo las condiciones propicias para la expresión de las proteínas codificadas por las secuencias de ácidos nucleicos que codifican las proteínas heterólogas u homólogas

Tipo: Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: W0112335US.

Solicitante: EMALFARB, MARK AARON.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 193 SPYGLASS COURT,JUPITER, FL 33477.

Inventor/es: PUNT, PETER, JAN, VAN ZEIJL,CORNELIA, VAN DEN HONDEL,CORNELIUS.

Fecha de Publicación: 6 de Noviembre de 2009.

Fecha Concesión Europea: 10 de Junio de 2009.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12N15/10C13
C12N15/10C14

Clasificación PCT:

C12N1/15 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › modificados por la introducción de material genético extraño.
C12N15/10 C12N […] › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
C12N15/63 C12N 15/00 […] › Introducción de material genético extraño utilizando vectores; Vectores; Utilización de huéspedes para ello; Regulación de la expresión.
C12N15/67 C12N 15/00 […] › Métodos generales para favorecer la expresión.
C12N15/80 C12N 15/00 […] › para hongos.
C12Q1/02 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen microorganismos vivos.
C12Q1/25 C12Q 1/00 […] › en los que intervienen enzimas que no pueden ser clasificarsse en los grupos C12Q 1/26 - C12Q 1/70.
C12Q1/68 C12Q 1/00 […] › en los que intervienen ácidos nucleicos.

Clasificación antigua:

C07H21/02 C […] › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07H AZUCARES; SUS DERIVADOS; NUCLEOSIDOS; NUCLEOTIDOS; ACIDOS NUCLEICOS (derivados de ácidos aldónicos o sacáricos C07C, C07D; ácidos aldónicos, ácidos sacáricos C07C 59/105, C07C 59/285; cianohidrinas C07C 255/16; glicales C07D; compuestos de constitución indeterminada C07G; polisacáridos, sus derivados C08B; ADN o ARN concerniente a la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos o su aislamiento, preparación o purificación C12N 15/00; industria del azúcar C13). › C07H 21/00 Compuestos que contienen al menos dos unidades mononucleótido que tienen cada una grupos fosfato o polifosfato distintos unidos a los radicales sacárido de los grupos nucleósido, p. ej. ácidos nucleicos. › con ribosilo como radical sacárido.
C12N1/14 C12N 1/00 […] › Microorganismos fúngicos (cultivo de setas A01G 18/00; como novedades vegetales A01H 15/00 ); Sus medios de cultivo.
C12N15/00 C12N […] › Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K).
C12Q1/68 C12Q 1/00 […] › en los que intervienen ácidos nucleicos.

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