MUTANTES DE DESOXICITIDINA QUINASA QUE TIENEN ACTIVIDAD ENZIMATICA EXTENDIDA.

Procedimiento para hacer evolucionar una proteína X seleccionada entre las quinasas que pertenecen a las clases EC 2.

7.1.-, los nucleotidil transferasas que pertenecen a las clases EC 2.7.7.-, y las fosforilasas que pertenecen a las clases EC 2.4.2.-, de tal manera que se obtenga una proteína modificada que presenta una actividad prolongada con respecto a la proteína X inicial, caracterizado porque comprende: a) obtención de células que comprenden un genotipo [proteína Y*:: proteína X+], por transformación de células [proteína Y*] con un ácido nucléico que comprende el gen codificador para la proteína X, significando Y* que el gen codificador para Y ha sido inactivado, siendo Y una proteína que pertenece a una clase próxima de X que posee una actividad parecida, las clases de X e Y se caracterizan porque poseen al menos las tres primeras cifras que pertenecen a las clases EC de la nomenclatura internacional de 4 cifras, presentando dichas células un fenotipo auxotrófico que necesita para sobrevivir la aportación del producto de la reacción de Y sobre su substrato en el medio de cultivo; b) exponer las células obtenidas en la etapa a) a un análogo de nucleósidos promutágenos c) poner en cultivo dichas células en un medio que comprende el substrato de Y, el producto de la reacción de Y sobre su substrato siendo necesario para la supervivencia de dicha célula, d) seleccionar la o las células que sobrevivieron en la etapa c) en las cuales la proteína X, modificada por la acción de dicho análogo de nucleósidos promutágenos, complementa la deficiencia en la proteína Y.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: INSTITIT PASTEUR
CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (CNRS).

Nacionalidad solicitante: Francia.

Dirección: 25/28, RUE DU DOCTEUR ROUX,75015 PARIS.

Inventor/es: MARLIERE, PHILIPPE, POCHET,SYLVIE, BOUZON,MADELEINE.

Fecha de Publicación: .

Clasificación PCT:

  • A61K48/00 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › Preparaciones medicinales que contienen material genético que se introduce en las células del cuerpo vivo para tratar enfermedades genéticas; Terapia génica.
  • A61P43/00 A61 […] › A61P ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS O DE PREPARACIONES MEDICINALES. › Medicamentos para usos específicos, no previstos en los grupos A61P 1/00 - A61P 41/00.
  • C12N1/15 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › modificados por la introducción de material genético extraño.
  • C12N1/19 C12N 1/00 […] › modificados por la introducción de material genético extraño.
  • C12N1/21 C12N 1/00 […] › modificados por la introducción de material genético extraño.
  • C12N15/01 C12N […] › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Preparación de mutantes sin introducción de material genético extraño; Procedimientos de cribado para ello.
  • C12N15/09 C12N 15/00 […] › Tecnología del ADN recombinante.
  • C12N15/10 C12N 15/00 […] › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
  • C12N15/54 C12N 15/00 […] › Transferasas (2).
  • C12N15/70 C12N 15/00 […] › Vectores o sistemas de expresión especialmente adaptados a E. coli.
  • C12N5/10 C12N […] › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células modificadas por introducción de material genético extraño, p. ej. células transformadas por virus.
  • C12N9/10 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Transferasas (2.) (ribonucleasas C12N 9/22).
  • C12N9/12 C12N 9/00 […] › transfieren grupos que contienen fósforo, p. ej. Quinasas (2.7).
MUTANTES DE DESOXICITIDINA QUINASA QUE TIENEN ACTIVIDAD ENZIMATICA EXTENDIDA.

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