METODO PARA LA CUANTIFICACION DE ACIDOS NUCLEICOS A TIEMPO REAL, DE EFICIENCIA CORREGIDA.
Método para la cuantificación de un ácido nucleico diana en una muestra,
el cual comprende los siguientes pasos: a) determinación de la eficiencia de amplificación del ácido nucleico diana en condiciones definidas de amplificación, la cual comprende los siguientes pasos: a1) preparación de una serie de diluciones del ácido nucleico diana, a2) amplificación del ácido nucleico diana en condiciones definidas de reacción, midiéndose la amplificación del ácido nucleico a tiempo real, a3) determinación de un valor definido del umbral, a4) determinación del número de ciclos al cabo de los cuales se excede el valor del umbral de la señal, para cada dilución, a5) determinación de una función lineal logarítmica del número de copias del ácido nucleico diana empleadas para la amplificación como función del número de ciclos al cabo de los cuales se excede el valor del umbral de la señal y cálculo de la eficiencia de la amplificación E, de acuerdo con E = G -a ó determinación de una función lineal del número de ciclos determinados en el paso a4) como una función de un logaritmo del número de copias del ácido nucleico diana empleado para la amplificación y cálculo de la eficiencia de la amplificación E, de acuerdo con E = G -1/a , en donde a se determina como la primera derivada de la función determinada, y G es el número base del logaritmo. b) amplificación del ácido nucleico diana contenido en la muestra, en las mismas condiciones definidas de reacción. c) medición de la amplificación a tiempo real, d) cuantificación de la cantidad original de ácido nucleico diana en la muestra mediante la corrección de la cantidad original derivada del paso c) con ayuda de la eficiencia de la amplificación determinada.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: ROCHE DIAGNOSTICS GMBH
F.HOFFMANN-LA ROCHE AG.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: SANDHOFER STRASSE 116,68305 MANNHEIM.
Inventor/es: SAGNER, GREGOR, DR., TABITI, KARIM, DR., SOONG, RICHIE, DR., GUTEKUNST, MARTIN, DR..
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 2 de Abril de 2001.
Fecha Concesión Europea: 15 de Agosto de 2007.
Clasificación PCT:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
- G06F19/00
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania.
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