AMPLIFICACION DE MRNA.

Un método para la amplificación del mRNA de una muestra, que comprende los siguientes pasos:

i. generación de cDNA a partir de RNA poliadenilado utilizando por lo menos un cebador que hibride con este RNA poliadenilado y que contenga un extremo 5’ poli(C) o 5’ poli(G), estando la concentración de este cebador en un intervalo de 10 a 60 µM; ii.(aa) eliminación del exceso de cebador o cebadores no hibridados o del exceso de dNTP, si existe cualquiera de ellos; ii.(ab) adición en el extremo 3’ del cDNA generado de una cola de poli(G) cuando en el paso i. se empleó un cebador o cebadores con un extremo 5’ poli(C), o de una cola de poli(C) cuando en el paso i. se empleó un cebador o cebadores con un extremo 5’ poli(G); o bien ii.(b) adición en el extremo 3’ del cDNA generado de una cola de poli(G) cuando en el paso i. se empleó un cebador o cebadores con un extremo 5’ poli(C), o una cola de poli(C) cuando en el paso i. se empleó un cebador o cebadores con un extremo 5’ poli(G) utilizando una RNA ligasa, independientemente de la presencia o ausencia de cebador, cebadores o dNTP en exceso; y (iii) amplificación del cDNA con cola mediante un cebador que hibride con la cola o colas generadas en el paso ii (ab) o ii(b).

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: MICROMET AG.

Nacionalidad solicitante: Alemania.

Dirección: STAFFELSEESTRASSE 2,81477 MUNCHEN.

Inventor/es: ZOHLNHIFER, DIETLIND, KLEIN, CHRISTOPH.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 23 de Marzo de 2001.

Fecha Concesión Europea: 7 de Junio de 2006.

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

Clasificación PCT:

  • C12N15/10 C12 […] › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
  • C12Q1/68 C12Q 1/00 […] › en los que intervienen ácidos nucleicos.
  • G01N33/50 FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre o de orina; Ensayos mediante métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Ensayos inmunológicos (procedimientos de medida o ensayos diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto, procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Oficina Europea de Patentes, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania.

AMPLIFICACION DE MRNA.

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