Gangliósidos para estandarizar y aumentar la sensibilidad de las células a las neurotoxinas botulínicas en los sistemas de prueba in vitro.
Un método para determinar la actividad biológica de un polipéptido de neurotoxina,
que comprende las etapas de:
a) cultivar neuronas de diferentes lotes de neuronas iCell® (Cellular Dynamics International) en un medio de cultivo celular que comprende de 1 a 300 μM de GT1b durante al menos 3 horas;
b) poner en contacto las neuronas de diferentes lotes de neuronas iCell® (Cellular Dynamics International) de la etapa a) con un polipéptido de neurotoxina seleccionado de BoNT/A, BoNT/B, BoNT/C1, BoNT/D, BoNT/E, BoNT/F, BoNT/G, BoNT/H o TeNT, o un subtipo de los mismos;
c) cultivar las neuronas de diferentes lotes de neuronas iCell® (Cellular Dynamics International) de la etapa b) durante al menos 24 horas en presencia de 1 a 300 μ M de GT1b en condiciones que permitan que el polipéptido de neurotoxina ejerza su actividad biológica; y
d) determinar la actividad biológica del polipéptido de neurotoxina en dichas células, en donde la sensibilidad de las neuronas de diferentes lotes de neuronas iCell® (Cellular Dynamics International) al polipéptido de neurotoxina aumenta al menos 2 veces, en comparación con la sensibilidad de neuronas iCell® (Cellular Dynamics International) no tratadas con GT1b.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2015/053403.
Solicitante: MERZ PHARMA GMBH & CO. KGAA.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: ECKENHEIMER LANDSTRASSE 100 60318 FRANKFURT ALEMANIA.
Inventor/es: EISELE,KARL-HEINZ, MANDER,GERD.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N5/0793 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Neuronas.
- G01N33/50 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre o de orina; Ensayos mediante métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Ensayos inmunológicos (procedimientos de medida o ensayos diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto, procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).
PDF original: ES-2812769_T3.pdf
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