MEJORAS INTRODUCIDAS EN LA PATENTE PRINCIPAL N-9000542 POR PROCEDIMIENTO DE OBTENCION Y PURIFICACION DEL FRAGMENTO CARBOXILO-TERMINAL DE LA DNA POLIMERASA I DE STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE.

Mejoras introducidas en la patente principal nº 9000542 por Procedimiento de obtención y purificación del fragmento carboxilo-terminal de la DNA polimerasa I de Streptococcus pneumoniae.

El procedimiento de obtención y purificación de la DNA polimerasa I D102 de Streptococcus pneumoniae es un méetodo para incrementar la actividad polimerizante del fragmento carboxilo-terminal de la DNA polimerasa I. Este método incluye mutagénesis dirigida del gen po1A, y subclonaje del gen mutado en un vector de expresión de Escherichia coli. Mediante este procedimiento se ha obtenido el plásmido recombinante pMA71. Dicho plásmido codifica un polipéptido de 99 kDa, que posee una actividad polimerizante elevada y que solo retiene menos del 1% de la actividad 5'-3' exonucleásica de la proteína silvestre. El polipéptido ha sido hiperexpresado y purificado a homogeneidad a partir de E.coli. El polipéptido purificado es soluble y activo, habiéndose obtenido a partir de 2 litros de cultivo 6570 unidades de actividad polimerasa con una actividad específica de 30000 unidades por mg de proteína.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS.

Nacionalidad solicitante: España.

Provincia: MADRID.

Inventor/es: AMBLAR, MONICA, DIAZ, ASUNCION, LOPEZ, PALOMA.

Fecha de Solicitud: 31 de Mayo de 1996.

Fecha de Publicación: 1 de Febrero de 1997.

Fecha de Concesión: 28 de Noviembre de 1996.

Clasificación Internacional de Patentes:

C07K1/36 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 1/00 Procedimientos generales de preparación de péptidos. › por una combinación de varios procesos de diferentes tipos.
C07K14/315 C07K […] › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de Streptococcus (G), p. ej. Enterococci.
C12N15/52 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Genes que codifican enzimas o proenzimas.

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