Triazolo-epotilonas.

Compuestos análogos a triazolo-tiazol de epotilona A y epotilona B con la fórmula 4a o 4b:

4a R ≥ H, Z ≥ H, alquilo, arilo, heteroarilo

4b R ≥ CH3, Z ≥ H, alquilo, arilo, heteroarilo

en las que significan:

R: H ó CH3



Z: H, alquilo, arilo o heteroarilo,

significando:

el alquilo: metilo, etilo, propilo, iso-propilo, butilo, iso-butilo, terc.-butilo, pentilo o hexilo, eventualmente sustituido conalcoxi de C1-C6, acilo de C1-C6, hidroxilo o halógeno, en particular Br, Cl, F ó I, y/o

el arilo: fenilo, o-, m-, p-tolilo, o-, m-, p-xililo, bencilo, fenetilo o naftilo, eventualmente sustituido con alquilo de C1-C6,alcoxi de C1-C6,, acilo de C1-C6, hidroxilo o halógeno, en particular Br, Cl, F ó I, y/o

el heteroarilo: furanilo, piranilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, piridinilo o indolilo, eventualmente sustituido conalquilo de C1-C6, alcoxi de C1-C6, acilo de C1-C6, hidroxilo o halógeno, en particular Br, Cl, F ó I.

Triazolo-epotilonas El invento se refiere a compuestos análogos a triazolo-tiazol de epotilona A y epotilona B.

Las epotilonas son unas lactonas macrocíclicas con un efecto fungicida y citotóxico. Subsiste una continua necesidad de compuestos análogos o de derivados con una actividad comparable o mejor, que se puedan utilizar como fungicidas o agentes citostáticos.

Una recopilación acerca de la química de las epotilonas es dada por ejemplo por Nicolaou y colaboradores en Angew. Chem. Int. Ed. [Química aplicada edición internacional) 1998, tomo 37, 2014-2045.

Es una misión del invento la puesta a disposición de tales compuestos análogos a epotilonas o respectivamente de 15 sus derivados.

El invento se refiere por consiguiente a unos compuestos análogos a triazolo-tiazol de epotilona A y epotilona B con la fórmula 4a o 4b:

4a R = H, Z = H, alquilo, arilo, heteroarilo 4b R = CH3, Z = H, alquilo, arilo, heteroarilo en las que significan:

R: H, CH3

Z: H, alquilo, arilo, heteroarilo,

significando:

el alquilo: metilo, etilo, propilo, iso-propilo, butilo, iso-butilo, terc. butilo, pentilo o hexilo, eventualmente sustituido con alcoxi de C1-C6, acilo de C1-C6, hidroxilo o halógeno, en particular Br, Cl, F ó I, y/o el arilo: fenilo, o-, m-, p-tolilo, o-, m-, p-xililo, bencilo, fenetilo o naftilo, eventualmente sustituido con alquilo de C1-C6, 35 alcoxi de C1-C6, , acilo de C1-C6, hidroxilo o halógeno, en particular Br, Cl, F ó I, y/o el heteroarilo: furanilo, piranilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, piridinilo o indolilo, eventualmente sustituido con alquilo de C1-C6, alcoxi de C1-C6, acilo de C1-C6, hidroxilo o halógeno, en particular Br, Cl, F ó I.

Las triazolo-tiazol-epotilonas conformes al invento son unos fungicidas muy eficaces y unos agentes citostáticos muy potentes con favorables propiedades farmacológicas.

El alquilo significa un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, que puede estar sustituido (una vez o múltiples veces) de un modo arbitrario, por ejemplo metilo, etilo, propilo, iso-propilo, butilo, iso-butilo, terc. butilo, pentilo o hexilo. 45 Ejemplos de sustituyentes son alcoxi de C1-C6, acilo de C1-C6, hidroxilo o halógeno, tal como bromo, cloro, flúor y yodo.

El arilo significa unos sistemas aromáticos mononucleares o plurinucleares, que pueden estar sustituidos (una vez o múltiples veces) de un modo arbitrario, por ejemplo, fenilo, o-, m-, p-tolilo, o-, m-, p-xililo, bencilo, fenetilo o naftilo. 50 Ejemplos de sustituyentes son alquilo de C1-C6, alcoxi de C1-C6, acilo de C1-C6, hidroxilo o halógeno tal como bromo, cloro, flúor y yodo.

El heteroarilo significa unos sistemas heteroaromáticos mononucleares o plurinucleares, que pueden estar sustituidos (una vez o múltiples veces) de un modo arbitrario, pudiendo tener el núcleo aromático uno o varios 55 heteroátomos escogidos entre N, O y S. Ejemplos del heteroarilo son furanilo, piranilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, piridinilo o indolilo. Ejemplos de sustituyentes son alquilo de C1-C6, alcoxi de C1-C6, acilo de C1-C6, hidroxilo o halógeno tal como bromo, cloro, flúor y yodo.

El invento se refiere además a un procedimiento para la preparación de los compuestos análogos a triazolo-tiazol de epotilona A y epotilona B conformes al invento, así como a unas composiciones fungicidas y farmacéuticas, que contienen uno o varios de tales compuestos análogos, y a la utilización de los compuestos análogos y de las composiciones fungicidas o farmacéuticas que contienen a éstos para la represión de hongos o para el tratamiento de unas enfermedades, que se pueden tratar con agentes citostáticos, por ejemplo, enfermedades tumorales tales como un cáncer o trastornos del crecimiento celular.

Las composiciones fungicidas y farmacéuticas pueden contener, junto a la sustancia activa propiamente dicha, unos usuales vehículos, agentes diluyentes o sustancias coadyuvantes, por ejemplo agentes estabilizadores tales como agentes absorbedores de los rayos UV, agentes antioxidantes y agentes conservantes.

La Figura 1 muestra una ruta de síntesis para la preparación de los compuestos análogos a triazolo-tiazol de epotilona A y epotilona B conformes al invento.

En lo sucesivo, sin ninguna restricción, mediando toma de referencia a la Figura 1, se describe la preparación de los compuestos análogos a triazolo-tiazol de epotilona A y epotilona B conformes al invento. La abreviatura Met significa "un metal".

La preparación de epotilonas modificadas en el C21, es decir de los aldehídos, las cetonas y las hidrazonas de las fórmulas 1, 2 o respectivamente 3, se describe en la solicitud de patente alemana divulgada DE 199 07 588 y en la solicitud de patente internacional divulgada WO 2000/050423 de la solicitante. En el caso del procedimiento conforme al invento, en los derivados de hidrazonas de las fórmulas 3a y 3b se lleva a cabo el cierre del anillo por oxidación con ayuda de ciertos óxidos de metales, de manera preferida con NiO2, K3[Fe (CN) 6], tetraacetato de plomo o hipocloruro de sodio (compárese Houben-Weyl, tomo E 14b, 4a edición, 1999) .

Síntesis de un compuesto análogo a triazolo-tiazol de epotilona A (fórmula 4a, Z = H) :

24, 6 mg (47, 2 μmol) de la hidrazona del epotilona-A-21-aldehído (fórmula 3a) se disuelven en 1, 5 ml de diclorometano absoluto. A intervalos de 15 min se añaden a esto tres veces 42, 8 mg (472, 2 μmol) cada vez de peróxido de níquel, agitándose a la temperatura ambiente. A continuación, se filtra a través de Celite y se lava posteriormente con diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se concentran por evaporación y se secan en un alto vacío. La purificación del producto en bruto se efectúa mediante una HPLC (cromatografía de fase líquido de alto rendimiento) preparativa (agente eluyente: una mezcla de acetonitrilo y agua 38:62; columna: Nucleosil 100 C18 7 μm, 21x250 mm) . Se obtuvieron 12, 0 mg (49 %) del producto.

Los datos espectroscópicos son idénticos a los de la epotilona A (compárese el documento DE 4138042 C2) con la excepción de: 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : d = 2, 25 (dt, 2a-H) , 2, 57 (dd, 2b-H) , 4, 63 (m, 3-H) , 5, 02 (dd, 3-OH) , 1, 68 (m, 14a-H) , 2, 31 (dt, 14b-H) , 5, 53 (d, 15-H) , 6, 92 (bs, 17-H) , 7, 06 (s, 19-H) , 7, 84 ( s, 21-H) , 1, 08 (s , 22 - H) , 1, 55 (s, 23-H) ; 13C-RMN (100 MHz, CDCl3) : d = 73, 0 (3-C) , 54, 7 (4-C) , 41, 4 (6-C) , 71, 4 (7-C) , 32, 0 (14-C) , 74, 9 (15-C) , 145, 1 (16-C) , 109, 2 (17-C) , 129, 2 (18-C) , 115, 5 (19-C) , 136, 4 (20-C) , 124, 8 (21-C) , 15, 9 (C-22) , 23, 3 (23-C) , 12, 7 (24-C) , 18, 1 (27-C) ; HRMS (DCI) : C26H37N3O6S: [M+NH4+) calc. 537, 2747, enc. 537, 2721. [RMN = resonancia magnética nuclear; HRMS (DCI) = espectrometría de masas de alta resolución (con ionización por desorción química) ]

Síntesis de un compuesto análogo a triazolo-tiazol de epotilona B (fórmula 4b, Z = H) :

8, 1 mg (15, 1 μmol) de la hidrazona del epotilona-B-21-aldehído (fórmula 3b) se disuelven en 1 ml de diclorometano absoluto. A la solución se le añaden 13, 7 mg (151, 4 μmol) de peróxido de níquel, después de lo cual se agita durante 15 min a la temperatura ambiente. El peróxido de níquel se separa por filtración a través de Celite y se lava con diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se concentran por evaporación y se secan en un alto vacío. La purificación del producto en bruto se efectúa mediante una HPLC preparativa (agente eluyente: acetonitrilo / agua 40:60; columna: Nucleosil 100 C18 7 μm, 21x250 mm) y proporcionó 4, 7 mg (58 %) del producto.

Los datos espectroscópicos son idénticos a los de la epotilona B (compárese el documento DE 4138042 C2) con la excepción de: 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : d = 2, 25 (dt, 2a-H) , 2, 59 (dd, 2b-H) , 4, 69 (m, 3-H) , 5, 02 (dd, 3-OH) , 1, 76 (m, 14a-H) , 2, 31 (dt, 14b-H) , 5, 53 (d, 15-H) , 6, 91 (bs, 17-H) , 7, 06 (s, 19-H) , 7, 85 (s, 21-H) , 1, 08 (s, 22-H) , 1, 56 (s, 23-H) ; 13C-RMN (100 MHz, CDCl3) : d = 71, 3 (3-C) , 54, 9 (4-C) , 41, 0 (6-C) , 72, 4 (7-C) , 33, 1 (14-C) , 75, 2 (15-C) , 145, 3 (16-C) , 108, 9 (17-C) , 129, 2 (18-C) , 115, 5 (19-C) , 136, 5 (20-C) , 124, 9 (21-C) , 15, 7 (22-C) , 23, 2 (23-C) , 12, 0 (24-C) , 18, 1 (27-C) ; MS (ESI) : [M+H+] = 534. [MS (ESI) = espectrometría de masas (con ionización por nebulización eléctrica) ] La actividad farmacológica se representa en la siguiente Tabla:

Ensayos de crecimiento con cultivos de células de mamíferos

Linaje de células Procedencia Derivado de triazolo de epotilona A epotilona B CI-50 [ng/ml]

L929 ratón (tejido graso subcutáneo) 10 1, 0

K-562 ser humano (leucemia) 6 0, 7

U-937 ser... [Seguir leyendo]

1. Compuestos análogos a triazolo-tiazol de epotilona A y epotilona B con la fórmula 4a o 4b:

4a R = H, Z = H, alquilo, arilo, heteroarilo 4b R = CH3, Z = H, alquilo, arilo, heteroarilo en las que significan: 10 R: H ó CH3

Z: H, alquilo, arilo o heteroarilo,

significando:

el alquilo: metilo, etilo, propilo, iso-propilo, butilo, iso-butilo, terc. butilo, pentilo o hexilo, eventualmente sustituido con alcoxi de C1-C6, acilo de C1-C6, hidroxilo o halógeno, en particular Br, Cl, F ó I, y/o el arilo: fenilo, o-, m-, p-tolilo, o-, m-, p-xililo, bencilo, fenetilo o naftilo, eventualmente sustituido con alquilo de C1-C6, 20 alcoxi de C1-C6, , acilo de C1-C6, hidroxilo o halógeno, en particular Br, Cl, F ó I, y/o el heteroarilo: furanilo, piranilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, piridinilo o indolilo, eventualmente sustituido con alquilo de C1-C6, alcoxi de C1-C6, acilo de C1-C6, hidroxilo o halógeno, en particular Br, Cl, F ó I.

2. Procedimiento para la preparación de los compuestos análogos a triazolo-tiazol de epotilona A y epotilona B de acuerdo con la reivindicación 1, en el que en un derivado de hidrazona de epotilona A o de epotilona B con la fórmula 3a o 3b:

3a R = H, Z = H, alquilo, arilo, heteroarilo 3b R = CH3, Z = H, alquilo, arilo, heteroarilo teniendo R y Z los significados arriba definidos, con ayuda de óxidos de metales, K3[Fe (CN) 6], tetraacetato de plomo o hipocloruro de sodio, se lleva a cabo un cierre del anillo por oxidación. 35

3. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 2, siendo el óxido de metal NiO2.

4. Composición farmacéutica, que contiene o se compone de uno o varios compuestos análogos a triazolo-tiazol de

epotilona A o epotilona B de acuerdo con la reivindicación 1 junto a un vehículo, un agente diluyente o una sustancia 40 coadyuvante farmacéuticamente aceptable.

5. Compuesto análogo a triazolo-tiazol de epotilona A o epotilona B de acuerdo con la reivindicación 1 o una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 4 para su utilización en el tratamiento de enfermedades tumorales y trastornos del crecimiento celular.

6. Compuesto análogo a triazolo-tiazol de epotilona A o epotilona B de acuerdo con la reivindicación 1 o una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 4 para su utilización tal como en la reivindicación 5, tratándose en el caso de la enfermedad tumoral de un cáncer.

7. Composición fungicida, que contiene o se compone de uno o varios compuestos análogos a triazolo-tiazol de epotilona A o epotilona B de acuerdo con la reivindicación 1 junto a un vehículo, un agente diluyente o una sustancia coadyuvante aceptable para fungicidas.

8. Procedimiento para la preparación de ésteres C-21 de epotilona A con la fórmula 5a y/o de epotilona B con la fórmula 5b, en el que la triazolo-epotilona A de acuerdo con la fórmula 4a de la reivindicación 1 con R y Z = H y/o la triazolo-epotilona B de acuerdo con la fórmula 4b de la reivindicación 1 con R = CH3 y Z = H se hace reaccionar con un ácido carboxílico de la fórmula R'COOH mediando separación de nitrógeno para dar un éster en C-21 de

en la que R' significa: H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo o heteroarilo, poseyendo alquilo, arilo o heteroarilo un significado de acuerdo con la reivindicación 1.

9. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 8, significando en la fórmula R'COOH el radical R' alquenilo de 15 C2-8 o alquinilo de C2-8 con una posición en cada caso arbitraria del enlace múltiple.

10. Procedimiento fotolítico, en el que la triazolo-epotilona A de acuerdo con la fórmula 4a de la reivindicación 1 con R y Z = H o la triazolo-epotilona B de acuerdo con la fórmula 4b de la reivindicación 1 con R = CH3 y Z = H se somete a una fotolisis en presencia de un agente nucleófilo NuH, y como producto se obtiene un compuesto análogo

11. Cicloadición 1, 3-dipolar del éster dimetílico del ácido acetilenodicarboxílico y de la triazolo-epotilona A de acuerdo con la fórmula 4a de la reivindicación 1 con R y Z = H o de la triazolo-epotilona B de acuerdo con la fórmula 4b de la reivindicación 1 con R = CH3 y Z = H para dar el derivado de pirazol de epotilona A con la fórmula 6a o respectivamente de epotilona B con la fórmula 6b