.Aislamiento o purificación [3]

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CIP: C12N7/02, .Aislamiento o purificación [3]

Inventos patentados en esta categoría

1.-

Un método para preparar partículas de replicón alfavírico (ARP) portadoras de mutaciones que confieren la capacidad de unión a glicosaminoglicano en células de mamífero, comprendiendo dicho método las etapas de: (a) introducir un ácido nucleico de replicón alfavírico en una célula hospedadora permisiva de alfavirus, comprendiendo dicho ácido nucleico de replicón al menos una señal de empaquetamiento vírico y al menos una secuencia de codificación heteróloga expresable en dicho ácido nucleico de replicón alfavírico, en el que dicha célula hospedadora comprende al menos una función colaboradora, produciendo una célula...

2.-

Un método para purificar al menos uno de células y virus en una muestra, que comprende: añadir la muestra a un pocillo dispuesto en un medio; aplicar un potencial eléctrico a través del medio para hacer que penetren contaminantes en dicho medio a través de una o más paredes de dicho pocillo al tiempo que se retiene en dicho pocillo el al menos uno de células y virus; y extraer el al menos uno de células y virus de dicho pocillo.

3.-

Método para conservar partículas virales que comprende: (a) proporcionar una solución acuosa de (i) partículas virales de Adenoviridae, Orthomyxoviridae, Paramyxoviridae, Parvoviridae, Picornaviridae o Poxviridae, (ii) uno o más azúcares, y (iii) una N,Ndi( alquilo C1-6)-glicina o N,N, N-tri(alquilo C1-6)-glicina, o una sal o éster fisiológicamente aceptable de la misma; y (b) desecar la solución para formar una composición que incorpora dicho virus.

4.-

Sistema para la expresión estable de proteínas reguladoras y estructurales lentivíricas que consiste en: i. Un vector híbrido que comprende un esqueleto baculovírico que contiene un casete de integración flanqueado por las ITR de AAV que incluyen dos casetes de expresión, en donde el primer casete de expresión codifica los genes de gag y pol lentivíricas y el segundo la rev lentivírica y un marcador de selección, y ii. Un plásmido de expresión que contiene el marco abierto de lectura (ORF) de la rep de AAV bajo el control de un promotor.

5.-

Un proceso para interrumpir viriones de la gripe, que comprende las etapas de: (i) obtención de una composición que comprende viriones de la gripe en presencia de un tampón de fosfato; (ii) inactivar los viriones de la gripe en presencia de un tampón de fosfato; y (iii) la división de los viriones inactivados en presencia de un tampón de fosfato.

6.-

Un procedimiento in vitro para facilitar la infección de una célula de vertebrado por el VSRRP que comprende las etapas de (a) dirigir la expresión aumentada de un polipéptido de CD163 por dicha célula de vertebrado en la que dicho polipéptido de CD163 comprende un dominio transmembrana, y en la que dicha expresión aumentada se logra mediante la introducción de ácido nucleico exógeno.

7.-

Un método para preparar una composición de virus de gripe vivo estable en refrigerador, método que comprende: (a) clarificar una cosecha viral que comprende virus de gripe vivos por filtración, produciendo de ese modo una cosecha viral clarificada; (b) someter la cosecha viral clarificada a centrifugación zonal continua, produciendo de ese modo una cosecha viral clarificada adicional; (c) diluir y esterilizar por filtración estéril dicha cosecha viral clarificada adicional, produciendo de ese modo una cosecha viral esterilizada; y (d) combinar la cosecha viral esterilizada con un estabilizante para obtener una concentración final de sacarosa al 6-8 % en peso/volumen (p/v), arginina al 1-2 % en p/v, ácido glutámico...

8.-

Nuevos genotipos del nucleopoliedrovirus simple de Chrysodeixis chalcites (ChchSNPV), procedimiento para su producción y uso como agente de control biológico. Se describen tres nuevos genotipos del nucleopoliedrovirus de Chrysodeixis chalcites, ChchSNPV, purificados de un mismo aislado de las Islas Canarias. Cada uno de los genotipos tiene una actividad insecticida específica frente a larvas de ChchSNPV comparable a la de los insecticidas biológicos habituales. Además, la mezcla de los tres genotipos, particularmente en proporción 36:26:14, ya sea en forma de poliedros de un único genotipo o con viriones co-ocluidos de genotipos mezclados,...

9.- Método para producir virus influenza B infeccioso en cultivo celular

. Solicitante/s: MEDIMMUNE, LLC. Inventor/es:

Método para producir virus influenza B infecciosos en cultivo celular, comprendiendo el método: i) someter a electroporación una población de células Vero con una pluralidad de vectores de plásmido que comprenden secuencias de ácido nucleico de un genoma de virus influenza B; ii) cultivar la población de células Vero en condiciones permisivas para la replicación viral; y, iii) recuperar una pluralidad de virus influenza B infecciosos.

10.-

Un ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una hemaglutinina de la influenza (HA) que tiene al menos 80% de identidad de secuencia con (HA) del tipo A/California/04/09, en donde la secuencia de nucleótidos comprende un elemento regulador que es operativo en una planta, comprendiendo el elemento regulador un virus del mosaico de caupí (CPMV)-HT.

11.-

Un procedimiento de producción de una vacuna a base de virus de la gripe, que comprende: a) infectar un amniocito humano permanente con un virus de la gripe; b) cultivar el amniocito humano permanente; c) expresar el virus de la gripe; y d) aislar el virus de la gripe del medio, en el que el amniocito humano permanente expresa los productos génicos adenovirales E1A y E1B.

13.-

Un método para producir reovirus a partir de un cultivo de células, que comprende las etapas de: (a) proporcionar un cultivo de células que ha sido infectado por el reovirus; (b) extraer el reovirus de las células mediante la adición de un detergente al cultivo de células e incubando durante un período de tiempo en el que se selecciona el detergente del grupo que consiste en Triton X-100, Tween 20, NP- 40 y desoxicolato de sodio; (c) recoger el reovirus; y (d) formar el reovirus en una composición que sea adecuada para la administración clínica, que comprende un excipiente y/o portador farmacéuticamente aceptable; en donde un cultivo de células significa una población de células cultivadas como se encuentra...

14.-

Método de preparación de un virus influenza B glicosilado en HA que tiene replicación aumentada en huevos que comprende: (a) introducir una mutación que da como resultado una sustitución de aminoácido en la posición 141 de HA de glicina a arginina en un genoma de virus influenza B que codifica para un polipéptido HA con un residuo de glicina en la posición 141; y (b) replicar el genoma de virus influenza mutado en condiciones mediante las cuales se produce el virus influenza B.

15.-

Método para la producción de un virus, comprendiendo el método: proporcionar una célula huésped infectada por el virus, cultivar la célula huésped infectada a una primera temperatura entre 31ºC y 37ºC durante 1 a 48 horas, cultivar a continuación la célula huésped infectada a una segunda temperatura que es de 1ºC a 6ºC inferior a la primera temperatura, y recoger copias del virus producido mediante los pasos de cultivo, consistiendo dicho virus en un ortomixovirus, alfavirus o flavivirus, llevándose a cabo el método a escala industrial en más de 50 litros de cultivo celular y teniendo el método un efecto positivo en la pureza del antígeno en comparación con el mismo método llevado a cabo a temperatura constante.

16.-

Una partícula de parvovirus duplicado que comprende: una cápsida del parvovirus un genoma del vector que comprende en la dirección 5' a 3' : (i) una secuencia de repetición terminal de parvovirus en 5'; (ii) una primera secuencia de nucleótidos heteróloga; (iii) una secuencia de repetición terminal no resolvible que no puede ser resuelta por proteínas Rep en parvovirus; (iv) una secuencia de nucleótidos heteróloga separada que es esencialmente completamente complementaria a dicha primera secuencia de nucleótidos heteróloga; y (v) una secuencia de repetición terminal de parvovirus en 3'; en donde dicho genoma del vector es capaz bajo condiciones adecuadas del apareamiento de bases intracadena entre las secuencias de nucleótidos heterólogas tras la liberación de la cápsida del...

17.-

Un procedimiento de purificación del virus de la rabia que comprende una sola etapa de cromatografía por intercambio de iones, siendo dicha etapa una cromatografía por intercambio de cationes según la cual: a) se pone en contacto el sobrenadante de un cultivo de células infectadas por este virus con un soporte de cromatografía intercambiadora de cationes que comprende una matriz de polimetacrilato en la que se han injertado por enlace covalente unos grupos sulfoisobutilo de tal manera que el virus de la rabia se fija sobre este soporte, y b) se eluye el virus de su soporte.

18.-

Método para la producción de virus o antígenos virales que comprende los pasos de (a) proporcionar un cultivo de células adherentes unidas a un microportador, (b) desarrollar el cultivo celular hasta confluencia, (c) infectar las células con un virus y (d) incubar dicho cultivo de células infectadas por dicho virus para la propagación del virus, caracterizado porque el volumen de cultivo celular desarrollado hasta confluencia del paso b) se reduce i) antes del paso c) o ii) después del paso c), de forma que la densidad celular de la biomasa y la concentración del microportador se incrementan al menos 1,3 a 10 veces a la vez que el volumen del medio no aumenta durante el paso d), y porque dicho virus se selecciona de entre el grupo...

19.-

Un proceso para la producción de poliovirus, que comprende las etapas de: a) proporcionar un cultivo de células en suspensión sin suero, las cuales son células PER.C6 5 depositadas con el número 96022940 de la ECACC, b) infectar dichas células con poliovirus, a una densidad celular de entre 2×106 células/ml y 150×106 células/ml, y c) recoger los poliovirus en un momento entre las 12 y las 48 horas después de la infección.

20.-

Un método para la purificación de partículas de adenovirus a partir de una suspensión de células productoras, comprendiendo dicho método las etapas de: a) lisado de las células en dicha suspensión celular; b) precipitación selectiva del ADN de la célula huésped separándolo de las partículas de adenovirus por adición de bromuro de domifeno en una concentración de 1,3 a 2,2 mM; c) clarificación de dicha suspensión que contiene dichas partículas de adenovirus para obtener una suspensión que contiene adenovirus purificada, en la que al menos el 80 % del ADN de la célula huésped se ha separado por precipitación de la suspensión que contiene adenovirus; estando el método caracterizado porque la densidad celular...

21.-

Un método para obtener una línea celular de empaquetamiento lentiviral estable que comprende: i. preparar un vector híbrido (A) que comprende un esqueleto baculoviral que contiene un casete de integración flanqueado por ITR de AAV que incluye dos casetes de expresión, en el que el primer casete de expresión codifica los genes gag y pol lentivirales y el segundo rev lentiviral, y un marcador de selección con antibiótico y ii. preparar un plásmido de expresión (B) que contiene un marco de lectura abierto de rep de AAV bajo el control de un promotor iii. transfectar las células con el plásmido de expresión B y posteriormente...

22.-

Un procedimiento para la elaboración de una preparación que comprende antígenos víricos que comprende a) inoculación de células con virus con cubierta infecciosos en un fluido, en la que dichas células son células primarias o una línea celular cultivada, b) propagación de dichos virus en dichas células, en la que dichas células están en forma de un cultivo celular, c) recoger dicho virus propagado, d) inactivar completamente dicho virus recogido directamente después de la recolección del virus antes de cualquier etapa de purificación, y en la que el fluido que contiene el virus o sus constituyentes no víricos no es (son) adicionalmente concentrados antes de dicha etapa de inactivación, y e) tratar dicho virus inactivado con detergente para producir...

23.-

Un virus adenoasociado (AAV) que comprende una cápside de AAV que comprende AAVcy.5 vp1 que comprende aminoácidos 1 a 728 de SEQ ID Núm. 103 o una secuencia que es al menos un 95% idéntica con la misma; y un minigén que tiene repeticiones terminales invertidas (ITRs) de AAV y un gen heterólogo enlazado operativamente a secuencias reguladoras que dirigen su expresión en una célula anfitrión.

24.-

Método de preparación de un virus que comprende las etapas de (i) transfección de un cultivo de células hospedadoras con al menos un constructo de expresión que codifica una molécula de ARN viral, (ii) adición de células a las células hospedadoras transfectadas de (i) para proporcionar una mezcla de células, en el que las células hospedadoras y las células añadidas después de la transfección son de la misma línea celular, y (iii) cultivo de la mezcla de células con el fin de producir un virus.

25.-

LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE EN GENERAL A UNA METODOLOGIA PARA LA GENERACION DE VIRUS DE RNA DE CADENA NEGATIVA NO SEGMENTADOS (PRINGLE, 1991) A PARTIR DE ACIDO DESOXIRRIBONUCLEICO CLONADO (CDNA). TALES VIRUS RESCATADOS SON UTILES PARA SU USO COMO VACUNAS, O ALTERNATIVAMENTE COMO PLASMIDOS EN APLICACIONES DE TERAPIA GENICA SOMATICA. LA INVENCION SE REFIERE ASIMISMO A MOLECULAS DE CDNA ADECUADAS COMO HERRAMIENTAS EN ESTA METODOLOGIA Y A LINEAS DE CELULAS HELPER QUE PERMITEN EL RESCATE DIRECTO DE DICHOS VIRUS. SE UTILIZA EL VIRUS DEL SARAMPION (MEASLES VIRUS, MV) COMO MODELO PARA OTROS REPRESENTANTES DE LOS MONONEGAVIRALES, EN PARTICULAR LA FAMILIA PARAMYXOVIRIDAE.

26.-

Un método para la purificación de partículas de adenovirus a partir de una suspensión celular con una densidad celular que varía de 5x106 a 150x106 células por ml, comprendiendo dicho método los pasos consecutivos de: a) lisar las células que contiene dicha suspensión celular; b) precipitar selectivamente el ADN de la célula huésped que contiene dicha suspensión celular añadiendo un agente de precipitación selectiva, en el que el agente de precipitación selectiva se selecciona entre el grupo compuesto por compuestos de amonio cuaternario, copolímeros de amina y mezclas de los mismos; o fragmentar el ADN de la célula huésped dentro de dicha suspensión celular añadiendo una nucleasa; c) someter la suspensión celular obtenida en el paso b) a aclaramiento mediante filtración de flujo tangencial, para obtener una suspensión de...

28.-

Un método para producir partículas similares al virus de la influenza (VLP) en una planta, que comprende: a) introducir un ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótido que codifica una hemaglutinina deinfluenza (HA) operativamente enlazada a una región reguladora activa en la planta dentro de la planta, o en unaporción de la misma, b) incubar la planta bajo condiciones que permitan la expresión del ácido nucleico, produciendo así las VLP, c) cosechar la planta, y d) purificar las VLP, en donde las VLP están en un intervalo de tamaño de 80 - 300 nm.

29.-

Molécula de ADN recombinante para expresar proteínas estructurales de alfavirus que comprende un promotor para dirigir la transcripción de ARN a partir de una secuencia de ADN ligada operativamente a una secuencia de ADN que comprende una secuencia codificadora de poliproteína estructural de alfavirus completa, con la condición de que la secuencia de ADN no codifique las secuencias de reconocimiento de replicación 5'' o 3'' alfavirales o un promotor subgenómico de alfavirus.

30.-

Un virus adeno-asociado (AAV) que comprende una cápside de AAV que comprende una vp1 de AAVrh10, quecomprende aminoácidos 1 a 738 de SEQ ID Núm. 81 o una secuencia que es al menos un 95% idéntica a la misma,un minigén que tiene repeticiones terminales invertidas (ITRs) de AAV, y un gen heterólogo enlazadooperativamente a secuencias reguladoras que dirigen su expresión en una célula anfitrión.

31.-

Un procedimiento para hacer una vacuna para administración a humanos o animales que comprende: a) la replicación de virus de la gripe en cultivo celular, en el que las células que pueden ser infectadas por virus de la gripe se cultivan en cultivo celular en suspensión en medio libre de suero, las células se infectan con virus de influencia y después de la infección se cultivan a una temperatura en el intervalo de 32º C a 34º C para la replicación del virus, en donde una proteasa es añadida a las células cultivadas antes, durante o después de la infección con virus de la gripe; b) la recogida y el aislamiento de los virus de gripe replicados de 2 a 10 días después de la infección, en la que las células o residuos celulares son separados...