Método para la producción y purificación a gran escala de parvovirus.

Un método para producir partículas de parvovirus vacías inactivas o completas activas,

comprendiendo dicho método:

(a) proporcionar la estirpe celular productora NB-324K;

(b) cultivar la estirpe celular en condiciones adecuadas e infectar las células a una densidad celular de 2,0 a 5,0 x 104 células/cm2 con el parvovirus a una MDI de 0,5 a 2 x 10-2 UFP/células;

(c) recoger las células 2 a 6 días después de la infección y obtener un sedimento celular mediante centrifugación; r(d) someter el sedimento celular resuspendido a un método de lisis celular mecánico, físico o químico para obtener un lisado celular que contiene parvovirus;

(e) tratar con ultrasonidos el lisado celular y someterlo a tratamiento con ADNasa;

(f) aclarar la recogida de parvovirus tratado con ADNasa mediante filtración; y

(g1) purificar el parvovirus mediante dos ultracentrifugaciones por gradiente de densidad sucesivas, en donde el primer gradiente es un gradiente escalonado de Iodixanol/PBS y el segundo gradiente es un gradiente escalonado de Iodixanol/Ringer o un gradiente continuo de Iodixanol/Ringer para obtener partículas de parvovirus activas completas en una fracción y partículas de parvovirus vacías en otra fracción.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2016/001066.

Solicitante: DEUTSCHES KREBSFORSCHUNGSZENTRUM.

Nacionalidad solicitante: Alemania.

Dirección: IM NEUENHEIMER FELD 280 69120 HEIDELBERG ALEMANIA.

Inventor/es: MULLER,MARCUS, ROMMELAERE,JEAN, LEUCHS,BARBARA, ROSCHER,MANDY.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C07K16/08 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02;   proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 16/00 Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales. › contra materiales víricos.
  • C12N7/00 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › Virus, p. ej. bacteriófagos; Composiciones que los contienen; Su preparación o purificación (preparaciones de uso médico que contienen virus A61K 35/76; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos virales, p. ej. vacunas virales, A61K 39/00).
  • C12N7/02 C12N […] › C12N 7/00 Virus, p. ej. bacteriófagos; Composiciones que los contienen; Su preparación o purificación (preparaciones de uso médico que contienen virus A61K 35/76; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos virales, p. ej. vacunas virales, A61K 39/00). › Aislamiento o purificación.
  • G01N33/569 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › para microorganismos, p. ej. protozoarios, bacterias, virus.

PDF original: ES-2765999_T3.pdf

 

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