ENZIMA TERMOESTABLE PURIFICADA Y PROCESO PARA AMPLIFICAR, DETECTAR Y/O CLONAR SECUENCIAS DE ACIDO NUCLEICO UTILIZANDO DICHA ENZIMA.

SE OBTIENE UNA ENZIMA TERMOESTABLE PURIFICADA QUE TIENE UNAS CARACTERISTICAS UNICAS. PREFERENTEMENTE LA ENZIMA SE SEPARA DE LA ESPECIE THERMUS AQUATICUS Y TIENE UN PESO MOLECULAR DE 86.000 A 90.000 DALTONS APROXIMADAMENTE. LA ENZIMA TERMOESTABLE PUEDE SER NATIVA O RECOMBINANTE Y SE PUEDE UTILIZAR EN UNA REACCION EN CADENA DE CICLADO DE TEMPERATURA EN DONDE SE AMPLIFICA LA CANTIDAD DE POR LO MENOS UNA SECUENCIA DE ACIDO NUCLEICO A PARTIR DE UNA SECUENCIA YA EXISTENTE CON LA AYUDA DE CEBADORES SELECCIONADOS Y DE TRIFOSFATOS NUCLEOTIDOS. EL PROCESO DE AMPLIFICACION CONSISTE EN TRATAR CEPAS COMPLEMENTARIAS INDEPENDIENTES DEL ACIDO NUCLEICO CON UN EXCESO MOLAR DE DOS CEBADORES OLIGONUCLEOTIDOS

, EXTENDER LOS CEBADORES CON UNA ENZIMA TERMOESTABLE PARA FORMAR PRODUCTOS DE EXTENSION CEBADORES COMPLEMENTARIOS QUE ACTUAN COMO MODELOS PARA SINTETIZAR LA SECUENCIA DE ACIDO NUCLEICO DESEADA Y DETECTAR LA SECUENCIA ASI AMPLIFICADA. LOS PASOS DE LA REACCION SE PUEDEN REPETIR CUANTAS VECES SE DESEE Y EN ELLOS INTERVIENE EL CICLADO DE TEMPERATURA PARA EFECTUAR LA HIBRIDACION, PROMOCION DE LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA Y DESNATURALIZACION DE LOS HIBRIDOS FORMADOS. LA ENCIMA SE ALMACENA PREFERENTEMENTE EN UN TAMPON DE DETERGENTES NO IONICOS QUE LE CONFIEREN ESTABILIDAD A LA ENZIMA.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG.

Nacionalidad solicitante: Suiza.

Dirección: POSTFACH 3255,4002 BASEL.

Inventor/es: .

Fecha de Publicación: .

Fecha Concesión Europea: 4 de Junio de 1997.

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS... > Procesos de medida, investigación o análisis en... > C12Q1/68 (en los que intervienen ácidos nucleicos)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/10 (Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34))
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Enzimas, p. ej. ligasas (6.; Proenzimas; Composiciones... > C12N9/12 (transfieren grupos que contienen fósforo, p. ej. Quinasas (2.7))
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Enzimas, p. ej. ligasas (6.; Proenzimas; Composiciones... > C12N9/96 (Estabilización de una enzima por formación de un aducto o de una composición; Formación de conjugaciones de enzimas)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN... > Preparación de compuestos que contienen radicales... > C12P19/34 (Polinucleótidos, p. ej. ácidos nucleicos, oligorribonucleótidos)
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