Derivados 39-desmetoxi de rapamicina.

Un compuesto según la Formula (I) siguiente:**Fórmula**

en la que:

X representa un enlace o CH2;

R1 representa un grupo ceto o (H,H);

R2 representa OH u OMe;

R3 representa H, OH u OMe;

R4 y R5 representa cada uno independientemente H u OH;

R6 representa -R7, -C(O)R7, -(CH2)2-O-[CR21R22-O]a-C(O)-R23; -CR21R22-O-C(O)-R23; -POR19R20,

-PO(OR19)(OR20) o Y-R15;

R7 representa -(CR8R9)m(CR10R11)pCR12R13R14;

R8 y R9 representa cada uno independientemente alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4o alquinilo C2-C4, pudiendo estar cualquiera de estos grupos opcionalmente substituido con -PO(OH)2, -CF2PO(OH)2, -OH, -COOH o -NH2; o R8 y R9 representan cada uno independientemente H, trifluorometilo o F;

R10, R11, R12, R13 y R14 representa cada uno independientemente alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4 o alquinilo C2- C4, pudiendo estar cualquiera de estos grupos opcionalmente substituido con -PO(OH)2, -CF2PO(OH)2, -OH, - COOH o -NH2; o R10, R11, R12, R13 y R14 pueden ser independientemente seleccionados entre H, -(CR8R9)qNH2, - (CR8R9)qOH, CF3, F, COOH; o R10 y R11 o R12 y R13 o R13 y R14 pueden ser tomados junto con el carbono al que están unidos para formar un C3-C6 cicloalquilo o un anillo de heteroalquilo de 3 a 6 miembros que contiene uno o más heteroátomos seleccionados entre N, O y S y que está opcionalmente substituido con hasta 5 grupos - (CR8R9)qOH, -(CR8R9)qNH2 o COOH;

Y ≥ enlace, -C(O)-O-, -(CH2)2-O-C(O)-O-;

R15 representa**Fórmula**

los R16 son cada uno independientemente H u OH;

R17 es independientemente seleccionado entre H, OH y NH2;

R18 es independientemente seleccionado entre H, -CH3, -CH2OH y -COOH;

con la condición, sin embargo, de que no más de 2 grupos seleccionados entre R16, R17 y R18 representen H o CH3;

R19 y R20 representa cada uno independientemente H o C1-C4 alquilo, o R19 y R20 representan juntos ≥CH2;

R21 es independientemente seleccionado entre H, CH3;

R22 es independientemente seleccionado entre H, -CH3, -CH≥CH2, -CH2Cl, -CHCl2, -CCl3, -CH(OH)Me,-CH2OH, -CH2CH3, -CH(CI)Me.

Derivados 39-desmetoxi de rapamicina Campo de la invención La presente invención se refiere a nuevos derivados 39-desmetoxirrapamicina y a procedimientos para su producción.

También se describe en el presente documento el uso de estos derivados 39-desmetoxirrapamicina en el tratamiento del cáncer y/o de malignidades de las células B, en la inducción o el mantenimiento de la inmunosupresión, en el tratamiento del rechazo de trasplantes, de la enfermedad del injerto contra el huésped, de los trastornos autoinmunes, de las enfermedades inflamatorias, de la enfermedad vascular y de las enfermedades fibrióticas, en la estimulación de la regeneración neuronal o en el tratamiento de infecciones fúngicas.

Antecedentes de la invención La rapamicina (sirolimus) (Figura 1) es un macrólido lipofílico producido por Streptomyces hygroscopicus NRRL 5491 (Sehgal y col., 1975; Vézina y col., 1975; U.S. 3.929.992; U.S. 3.993.749) con un resto 1, 2, 3-tricarbonilo unido a una lactona de ácido pipecólico (Paiva y col., 1991) . Para los fines de esta invención, se describe la rapamicina mediante la convención de numeración de McAlpine y col. (1991) con preferencia con respecto a las convenciones de numeración de Findlay y col. (1980) o Chemical Abstracts (11th Cumulative Index, 1982-1986 p60719CS) .

La rapamicina tiene un valor farmacológico significativo debido al amplio espectro de actividades exhibidas por el compuesto. La rapamicina muestra una moderada actividad antifúngica, principalmente frente a especies de Candida, pero también frente a hongos filamentosos (Baker y col., 1978; Sehgal y col., 1975; Vézina y col., 1975;

U.S. 3.929.992; U.S. 3.993.749) . La rapamicina inhibe la proliferación celular dirigiéndose a las rutas de transducción de señal en una variedad de tipos celulares, por ejemplo inhibiendo las rutas de señalización que permiten la progresión de la fase G1 a la S del ciclo celular (Kuo y col., 1992) . En los linfocitos T, la rapamicina inhibe la señalización desde el receptor IL-2 y la posterior autoproliferación de los linfocitos T, para dar lugar a inmunosupresión. Los efectos inhibitorios de la rapamicina no se limitan a los linfocitos T, ya que la rapamicina inhibe la proliferación de muchos tipos de células de mamíferos (Brunn y col., 1996) . La rapamicina es, por lo tanto, un potente inmunosupresor con aplicaciones terapéuticas establecidas o predichas en la prevención del rechazo de aloinjerto de órganos y en el tratamiento de enfermedades autoinmunes (Kahan y col., 1991) . La 40-O- (2hidroxi) etilrrapamicina (SDZ RAD, RAD 001, Certican, everolimus) es un análogo semisintético de la rapamicina que muestra efectos farmacológicos inmunosupresores y está también bajo investigación como agente anticanceroso (Sedrani, R. y col., 1998; Kirchner y col., 2000; U.S. 5.665.772, Boulay y col., 2004) . Se obtuvo aprobación para este fármaco como inmunosupresor para Europa en 2003. El derivado éster de rapamicina CCI-779 (Wyeth-Ayerst) inhibe el crecimiento celular in vitro e inhibe el crecimiento tumoral in vivo (Yu y col., 2001) . CCI-779 está actualmente en pruebas clínicas de Fase III como potencial agente anticanceroso. El valor de la rapamicina en el tratamiento de la psoriasis crónica en placas (Kirby y Griffiths, 2001) , el uso potencial de efectos tales como la estimulación del crecimiento de las neuritas en células PC12 (Lyons y col., 1994) , el bloqueo de las respuestas proliferativas a las citoquinas por las células vasculares y musculares lisas después de una lesión mecánica (Gregor y y col., 1993) y su papel en la prevención de la fibrosis de aloinjertos (Waller y Nicholson, 2001) son áreas de intensa investigación (Kahan y Camardo, 2001) . Recientes informes revelan que la rapamicina se asocia a una menor incidencia de cáncer en pacientes con aloinjertos de órganos que están bajo terapia inmunosupresora a largo plazo que en aquéllos que siguen otros regímenes inmunosupresores, y que esta reducida incidencia del cáncer se debe a inhibición de la angiogénesis (Guba y col., 2002) . Se ha reportado que las actividades neurotróficas de los ligandos de inmunofilina son independientes de su actividad inmunosupresora (Steiner y col., 1997) y que se promueve la estimulación del crecimiento de los nervios por alteración del complejo de los receptores de esteroides maduros, como se señala en la solicitud de patente WO 01/03692. Se han descrito efectos colaterales, tales como hiperlipemia y trombocitopenia, así como potenciales efectos teratogénicos (Hentges y col., 2001; Kahan y Camardo, 2001) .

El esqueleto de policétido de la rapamicina es sintetizado por condensación de cabeza a cola de un total de siete unidades de propionato y siete de acetato a una unidad iniciadora de ácido ciclohexanocarboxílico derivada de shikimato por las muy grandes proteínas multifuncionales que constituyen la policétido sintasa de Tipo I (rap PKS, Paiva y col., 1991) . El aminoácido derivado de L-lisina, ácido pipecólico, se condensa mediante una unión amida sobre el último acetato del esqueleto de policétido (Paiva y col., 1993) , seguido de lactonización para formar el macrociclo.

Las secuencias nucleotídicas para cada uno de los tres genes PKS de rapamicina, el gen codificante de NRPS y las secuencias de los genes tardíos flanqueantes, y los correspondientes polipéptidos, fueron identificados por Aparicio y col., 1996, y Schwecke y col., 1995, y se depositaron en el NCBI bajo el número de acceso X86780, y se han publicado recientemente correcciones para esta secuencia en WO 04/007709.

El primer producto libre de enzima del grupo biosintético de la rapamicina ha sido designado como prerrapamicina (WO 04/007709, Gregor y y col., 2004) . La producción de la rapamicina totalmente procesada requiere un

procesamiento adicional del núcleo del policétido/NRPS por las enzimas codificadas por los genes tardíos de la rapamicina, RapJ, RapN, RapO, RapM, RapQ y Rapl.

Se piensa que las acciones farmacológicas de la rapamicina caracterizadas hasta la fecha están mediadas por la interacción con receptores citosólicos denominados FKBP. El principal receptor intracelular de rapamicina en linfocitos T eucarióticos es FKBP12 (DiLella y Craig, 1991) y el complejo resultante interacciona específicamente con proteínas diana para inhibir la cascada de transducción de señal de la célula.

Se ha identificado la diana del complejo rapamicina-FKBP12 en levaduras como TOR (“target of rapamycin”, diana de la rapamicina) (Alarcón y col., 1999) y la proteína de mamíferos se conoce como FRAP ("FKBP-rapamycin associated protein”, proteína asociada a FKBP-rapamicina) o mTOR ("mammalian target of rapamycin”, diana en mamíferos de la rapamicina) (Brown y col., 1994) .

Se ha descrito una conexión entre la señalización mTOR y la síntesis proteica localizada en neuronas; su efecto sobre el estado de fosforilación de las proteínas implicadas en el control de la traducción; la abundancia de componentes de la maquinaria de traducción a los niveles de transcripción y traducción; el control de la actividad permeasa de aminoácidos y la coordinación de la transcripción de muchas enzimas implicadas en rutas metabólicas (Raught y col., 2001) . Las rutas de señalización sensibles a la rapamicina también parecen tener un importante papel en el desarrollo del cerebro embrionario, el aprendizaje y la formación de la memoria (Tang y col., 2002) . La investigación sobre proteínas TOR en levaduras también reveló sus papeles en la modulación de rutas de señalización sensibles a nutrientes (Hardwick y col., 1999) . De forma similar, se ha identificado a mTOR como una diana directa para la acción de la proteína kinasa B (akt) y como poseedora de un papel clave en la señalización de la insulina (Shepherd y col., 1998; Navé y col., 1999) . También se ha implicado a la TOR de mamíferos en la polarización del citoesqueleto de actina y la regulación de la iniciación de la traducción (Alarcón y col., 1999) . Las fosfatidilinositol 3-kinasas, tales como la mTOR, son funcionales en varios aspectos de la patogenia de tumores, tales como la progresión del ciclo celular, la adhesión, la supervivencia celular y la angiogénesis (Roymans y Slegers, 2001) .

Estudios farmacocinéticos de la rapamicina y de análogos de la rapamicina han demostrado la necesidad de desarrollar nuevos compuestos de rapamicina que puedan ser más estables en solución y más resistentes al ataque metabólico, y/o que tengan una mejor permeabilidad a través de la membrana celular y un menor eflujo, y que, por lo tanto, puedan exhibir una mejor biodisponibilidad oral.

Se ha indicado un rango de análogos de rapamicina sintetizados usando los sitios... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto según la Formula (I) siguiente:

en la que:

X representa un enlace o CH2; R1 representa un grupo ceto o (H, H) ; R2 representa OH u OMe; R3 representa H, OH u OMe; R4 y R5 representa cada uno independientemente H u OH; R6 representa -R7, -C (O) R7, - (CH2) 2-O-[CR21R22-O]a-C (O) -R23; -CR21R22-O-C (O) -R23; -POR19R20, -PO (OR19) (OR20) o Y-R15; R7 representa - (CR8R9) m (CR10R11) pCR12R13R14; R8 y R9 representa cada uno independientemente alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4º alquinilo C2-C4, pudiendo estar cualquiera de estos grupos opcionalmente substituido con -PO (OH) 2, -CF2PO (OH) 2, -OH, -COOH o -NH2; o R8 y R9 representan cada uno independientemente H, trifluorometilo o F; R10, R11, R12, R13 y R14 representa cada uno independientemente alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4 o alquinilo C2- C4, pudiendo estar cualquiera de estos grupos opcionalmente substituido con -PO (OH) 2, -CF2PO (OH) 2, -OH, - COOH o -NH2; o R10, R11, R12, R13 y R14 pueden ser independientemente seleccionados entre H, - (CR8R9) qNH2, (CR8R9) qOH, CF3, F, COOH; o R10 y R11 o R12 y R13 o R13 y R14 pueden ser tomados junto con el carbono al que están unidos para formar un C3-C6 cicloalquilo o un anillo de heteroalquilo de 3 a 6 miembros que contiene uno

o más heteroátomos seleccionados entre N, O y S y que está opcionalmente substituido con hasta 5 grupos (CR8R9) qOH, - (CR8R9) qNH2 o COOH; Y = enlace, -C (O) -O-, - (CH2) 2-O-C (O) -O-;

los R16 son cada uno independientemente H u OH; R17 es independientemente seleccionado entre H, OH y NH2; R18 es independientemente seleccionado entre H, -CH3, -CH2OH y -COOH; con la condición, sin embargo, de que no más de 2 grupos seleccionados entre R16, R17 y R18 representen H o CH3; R19 y R20 representa cada uno independientemente H o C1-C4 alquilo, o R19 y R20 representan juntos =CH2; R21 es independientemente seleccionado entre H, CH3; R22 es independientemente seleccionado entre H, -CH3, -CH=CH2, -CH2Cl, -CHCl2, -CCl3, -CH (OH) Me, -CH2OH, -CH2CH3, -CH (CI) Me;

R23 es independientemente R7, Y-R15 o un anillo de arilo o heteroarilo de 5 o 6 miembros opcionalmente substituido con entre uno y tres grupos seleccionados entre OH, F, Cl, Br, NO2 y NH2; a representa 0 o 1; m, p y q representa cada uno independientemente un número entero de 0-4;

con la condición, sin embargo, de que el resto R7 no contenga más de 12 átomos de carbono y sí contiene al menos un grupo funcional seleccionado entre -PO (OH) 2, -CF2PO (OH) 2, -COOH, OH o NH2;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Un compuesto según la reivindicación 1 en el que R6 representa -R7.

3. Un compuesto según la reivindicación 1 en el que R6 representa -C (O) R7.

4. Un compuesto según la reivindicación 1 en el que R6 representa - (CH2) 2-O-[CR21R22-O]a-C (O) -R23.

5. Un compuesto según la reivindicación 4 en el que R23 representa R7.

6. Un compuesto según la reivindicación 4 en el que R23 representa Y-R15.

7. Un compuesto según la reivindicación 1-5 en el que R7 contiene 7 o menos átomos de carbono.

8. Un compuesto según la reivindicación 7, en el que R7 contiene 5 o menos átomos de carbono.

9. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, 7 u 8 en el que R7 contiene dos grupos seleccionados entre -PO (OH) 2, -CF2PO (OH) 2, -OH, -COOH y -NH2.

10. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 9 en el que R7 contiene al menos un grupo funcional seleccionado entre -COOH, OH y NH2.

11. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 10 en el que p representa 0 o 1.

12. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 11 en el que m representa 0 o 1.

13. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 12 en el que q representa 0, 1 o 2.

14. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 13 en el que R11 representa H.

15. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 14, en el que R12 representa H.

16. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 15, en el que R13 representa H o OH.

17. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 16 en el que p representa 1, y R10 representa Me, OH o CH2OH.

18. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 16 en el que p representa 1 y R11 representa Me, H o CH2OH.

19. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 10 en el que m y p representan ambos 0, R12 y R13 representan ambos H y R14 representa - (CR8R9) q-OH en el que q = 0º 1y R8y R9representan ambos H.

20. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 10 en el que p representa 1 y m representa 0, R10 y R11 representan ambos H, R12 representa H, R13 representa H, OH o NH2 y R14 representa (CR8R9) q-OHen el que q = 0º 1yR8y R9representan ambos H.

21. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 10 en el que R6 representa el residuo derivado de la formación de un éster con ácido hidroxiacético, ácido 3-hidroxi-2, 2-dimetilpropiónico, ácido 2, 3dihidroxipropiónico, ácido 3-hidroxi-2-hidroximetilpropiónico o ácido 2, 2-bis (hidroximetil) propiónico.

22. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 10 en el que R6 representa el residuo derivado de la formación de un éter con ácido hidroxiacético, ácido 3-hidroxi-2, 2-dimetilpropiónico, ácido 2, 3dihidroxipropiónico, ácido 3-hidroxi-2-hidroximetilpropiónico o ácido 2, 2-bis (hidroximetil) propiónico.

23. Un compuesto según la reivindicación 1 que e.

3. desmetoxi-40-O-[2, 2-bis (hidroximetil) propionil]rapamicina o una sal farmacéuticamente aceptable del misma.

24. Un compuesto según la reivindicación 1 que e.

3. desmetoxi-40-O- (2-hidroxi) etilrrapamicina o una sal farmacéuticamente aceptable del misma.

25. Un compuesto según la reivindicación 1 que e.

3. desmetoxi-40-O-[2-hidroxietil-3-hidroxi-2- (hidroximetil) -2metilpropanoato]rapamicina o una sal farmacéuticamente aceptable del misma.

26. Un compuesto según la reivindicación 1 que e.

2. O-desmetil-39-desmetoxi-40-O-[2, 2bis (hidroximetil) propionil]rapamicina o una sal farmacéuticamente aceptable del misma.

27. Un compuesto según la reivindicación 1 en el que R6 representa -POR19R20.

28. Un compuesto según la reivindicación 1 en el que R6 representa -PO (OR19) (OR20) .

29. Un compuesto según la reivindicación 27 o 28 en el que R19 y R20 representan ambos CH3 o representan ambos CH2CH3.

30. Un compuesto según la reivindicación 1 en el que R6 representa Y-R15.

31. Un compuesto según la reivindicación 30 en el que el grupo R15 representa

32. Un compuesto según la reivindicación 31 en el que R15 es un resto formado por formación de un acetal con glucosa, glucosamina, ácido glucurónico o arabinosa.

33. Un compuesto según la reivindicación 31, en el que R15 es un resto formado por formación de un acetal con Dglucosa.

34. Un compuesto según la reivindicación 31, en el que R15 es un resto formado por formación de un acetal con D15 glucosamina.

35. Un compuesto según la reivindicación 31, en el que R15 es un resto formado por formación de un acetal con ácido D-glucurónico.

36. Un compuesto según la reivindicación 30 en el que R15 representa:

37. Un compuesto según la reivindicación 36, en el que R15 es un resto formado por formación de un acetal con fructosa.

38. Un compuesto según la reivindicación 30 en el que R15 representa:

39. Un compuesto según la reivindicación 38, en el que R15 es un resto formado por formación de un éster con ácido 25 glucurónico.

40. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 30 a 39 en el que Y representa un enlace.

41. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 30 a 39 en el que Y representa - (CH2) 2-O-C (O) -O-.

42. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 30 a 39 en el que Y representa -C (O) -O-.

43. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 42 para su uso como producto farmacéutico.

44. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 42 para su uso en el tratamiento del cáncer y/o de las malignidades de las células B, en la inducción o el mantenimiento de la inmunosupresión, en el tratamiento del rechazo de trasplantes, de la enfermedad del injerto contra el huésped, de trastornos autoinmunes, de enfermedades inflamatorias, de la enfermedad vascular y de enfermedades fibrióticas, en la estimulación de la regeneración neuronal o en el tratamiento de infecciones fúngicas.

45. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 42 para su uso como un producto farmacéutico en el tratamiento del cáncer o de las malignidades de las células B.

46. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 42 junto con uno o más diluyentes o vehículos farmacéuticamente aceptables.

47. Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 42 para la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer o de las malignidades de las células B.

48. Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 42 en la preparación de un medicamento para el tratamiento del cáncer y/o de las malignidades de las células B, en la inducción o el mantenimiento de la inmunosupresión, en el tratamiento del rechazo de trasplantes, de la enfermedad del injerto contra el huésped, de trastornos autoinmunes, de enfermedades inflamatorias, de la enfermedad vascular y de enfermedades fibrióticas, en la estimulación de la regeneración neuronal o en el tratamiento de infecciones fúngicas.

49. El uso según la reivindicación 48 en el que el medicamento es para el tratamiento del cáncer o de las malignidades de las células B.

50. Un procedimiento de preparación de un compuesto de fórmula (I) según una cualquiera de las reivindicaciones a 42 que comprende:

(a) hacer reaccionar un compuesto de fórmula (II) :

en la que RA representa H o (CH2) 2-OH

o un derivado protegido del mismo, con un compuesto de fórmula (III) :

HO-R6 (III)

o un derivado activado del mismo en la que el grupo R6 es como se ha definido anteriormente para los compuestos de fórmula (II) o un derivado protegido del mismo, o

(b) convertir un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo en otro compuesto de fórmula (I) u otra sal farmacéuticamente aceptable del mismo; o

(c) desproteger un compuesto protegido de fórmula (I) .

51. Una composición o kit de partes que comprende (i) un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 42 y (ii) uno o más de otros agentes terapéuticamente efectivos.

52. La composición o kit de partes de la reivindicación 51 en el que el uno o más de otros agentes terapéuticamente efectivos son seleccionados entre el grupo de metotrexato, leukovorina, adriamicina, prednisona, bleomicina, 5 ciclofosfamida, 5-fluorouracilo, paclitaxel, docetaxel, vincristina, vinblastina, vinorelbina, doxorrubicina, tamoxifeno, toremifeno, acetato de megestrol, anastrozol, goserelina, anticuerpo monoclonal anti-HER2 (por ejemplo, Herceptin™) , capecitabina, clorhidrato de raloxifeno, inhibidores de EGFR, inhibidores de VEGF, inhibidores de proteasomas, inhibidores de hsp90, azatioprina, corticosteroides, ciclofosfamida, ciclosporina A, FK506, micofenolato mofetilo, OKT-3, ATG, anfotericina B, flucitosina, equinocandinas, griseofulvina, un imidazol y un agente antifúngico triazólico.