Sistema de producción de un vector lentiviral a gran escala comercial y vectores así producidos.
Procedimiento para producir lentivirus recombinante (rLV) de alto rendimiento que comprende un transgén terapéuticamente beneficioso,
que comprende las etapas siguientes:
a) transfectar unas células hospedadoras con plásmidos que codifican los componentes necesarios para la producción de rLV con una mezcla de transfección de fosfato de calcio, en el que para la transfección dicho fosfato de calcio y dichos plásmidos se mezclan a una velocidad constante uniforme formando así un complejo, seguida por la adición de dicho complejo a dichas células en un medio;
b) incubar dichas células hospedadoras transfectadas en la etapa a) en los medios durante un período de tiempo en el que se producen los medios de partícula de rLV y a continuación los medios que comprenden la partícula de rLV se recogen por lo menos dos veces durante un período de hasta 60 horas después de la transfección, y disponer dichos medios de rLV recogidos en una unidad de almacenamiento en frío, dando como resultado una inactivación reducida del virus;
c) concentrar las partículas de rLV en dichos medios recogidos de la etapa b) mediante una filtración de flujo tangencial;
d) tratar las partículas de rLV concentradas de la etapa c) con una enzima que reduce la contaminación de ácido nucleico;
e) centrifugar las partículas de rLV tratadas de la etapa d) para concentrar además dicho rLV y resuspender el rLV centrifugado en una disolución que contiene un tensioactivo; y
f) disponer en capas el rLV en la disolución de tensioactivo de la etapa e) a lo largo de un gradiente de sacarosa seguido por una centrifugación adicional, produciendo así rLV de alto rendimiento.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2012/069212.
Solicitante: THE CHILDREN'S HOSPITAL OF PHILADELPHIA.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 3401 Civic Center Boulevard Philadelphia, PA 19104 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.
Inventor/es: HIGH,Katherine,A. , QU,Guang, WRIGHT,John Fraser, HAUCK,BERND.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- A61K48/00 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › Preparaciones medicinales que contienen material genético que se introduce en las células del cuerpo vivo para tratar enfermedades genéticas; Terapia génica.
- C12N15/86 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Vectores virales.
- C12N7/00 C12N […] › Virus, p. ej. bacteriófagos; Composiciones que los contienen; Su preparación o purificación (preparaciones de uso médico que contienen virus A61K 35/76; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos virales, p. ej. vacunas virales, A61K 39/00).
PDF original: ES-2717876_T3.pdf
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