Proceso de preparación y purificación de la proteína oncostatina M humana recombinante.
Un proceso de preparación y purificación de la proteína oncostatina M (OSMnat) humana recombinante,
que comprende:
i) cultivar Escherichia coli recombinante que contiene un gen OSMnat,
ii) cultivar dicha Escherichia coli recombinante en un medio de cultivo complejo para producir proteína OSMnat, y
iii) aislar y purificar proteína OSMnat recombinante a partir de cuerpos de inclusión o de fracción de proteínas soluble, en el que dicha Escherichia coli recombinante que contiene un gen OSMnat se cultiva amplificando dicho gen y clonando dicho gen OSMnat modificado amplificado en un vector intermedio o de expresión, amplificando y aislando dicho gen OSMnat a partir de dicho vector clonado y transformando dicho vector de expresión en dicha Escherichia coli,
en el que dicho gen OSMnat comprende la SEQ ID NO: 1, dicha Escherichia coli es Escherichia coli Rosetta gami-2, y dicho vector es pET21a+, y
en el que el aislamiento y la purificación de la proteína OSMnat recombinante obtenida comprende las etapas siguientes:
a) lisar el microorganismo y separar el material insoluble que comprende OSM del material celular proteínico soluble;
b) solubilizar la OSM presente en el material insoluble;
c) oxidar la OSM en presencia de un par de agente oxidante/reductor, en el que el par de agente oxidante/reductor es un par de glutatión oxidado/reducido, en el que la relación molar de glutatión oxidado y reducido es 1:20;
d) someter la solución a cromatografía y
e) recuperar OSM purificada.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/LT2013/000012.
Solicitante: UAB Biotechnologines Farmacijos Centras "Biotechpharma".
Nacionalidad solicitante: Lituania.
Dirección: Mokslininku g. 4 08412 Vilnius LITUANIA.
Inventor/es: BUMELIS,VLADAS ALGIRDAS, SUDZIUVIENE,SAULE, MAKAUSKAS,NERIJUS, PUKAITE,LINA.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N15/03 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Bacterias.
- C12N15/70 C12N 15/00 […] › Vectores o sistemas de expresión especialmente adaptados a E. coli.
PDF original: ES-2769500_T3.pdf
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