Sistema de expresión bacteriano cistrónico doble.
Un procedimiento para la producción de un anticuerpo o un fragmento del mismo que comprende las etapas de:
(i) transformar una célula hospedadora bacteriana con un único vector que consiste en un sistema de expresión cistrónico doble;
(ii) cultivar las células bacterianas transformadas en medio adecuado para expresar el anticuerpo o un fragmento del mismo como cuerpos de inclusión;
(iii) realizar la solubilización de dichos cuerpos de inclusión;
(iv) realizar el replegamiento del anticuerpo o el fragmento del mismo;
en donde el sistema de expresión cistrónico doble comprende:
a) un primer cistrón que comprende un promotor de T7 unido operativamente con una secuencia polinucleotídica que codifica una cadena pesada del anticuerpo o el fragmento de la misma;
b) un segundo cistrón que comprende un promotor de arabinosa unido operativamente con una secuencia polinucleotídica que codifica una cadena ligera del anticuerpo o el fragmento de la misma;
en donde el primer y segundo cistrones se sitúan en el vector único y expresan el anticuerpo o fragmento del mismo como cuerpos de inclusión; y
en donde la expresión de la cadena pesada se induce mediante IPTG, al tiempo que la expresión de la cadena ligera se induce mediante arabinosa, de tal manera que la cadena pesada y la cadena ligera se expresan a niveles de expresión equimolares.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/IB2015/055189.
Solicitante: LUPIN LIMITED.
Inventor/es: SALUNKHE,SHARDUL, VARSHNEY,BRAJESH, SOORAPANENI,SUDHEERBABU.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N15/67 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Métodos generales para favorecer la expresión.
- C12N15/70 C12N 15/00 […] › Vectores o sistemas de expresión especialmente adaptados a E. coli.
- C12N15/74 C12N 15/00 […] › Vectores o sistemas de expresión especialmente adaptados a huéspedes procariotas distintos a E. coli, p. ej. Lactobacillus, Micromonospora.
PDF original: ES-2808906_T3.pdf
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