Endoproteasa específica para prolina y su uso.

Un polipéptido que tiene actividad de endoproteasa específica para prolina,

en donde el polipéptido se selecciona del grupo que consiste en:

i. un polipéptido, que tiene al menos 91 % de identidad con respecto a la secuencia de aminoácidos según la SEQ ID NO: 1, y que, cuando se alinea con una secuencia de aminoácidos según la SEQ ID NO: 1 comprende un aminoácido seleccionado del grupo que consiste en Ala (A), Cys (C), Asp (D), Phe (F), Gly (G), His (H), Ile (I), Lys (K), Leu (L), Met (M), Asn (N), Gln (Q), Arg (R), Ser (S), Thr (T), Val (V), Trp (W) y Tyr (Y) en una posición correspondiente a la posición 469, y opcionalmente un aminoácido de Phe (F) en la posición 204, Ser (S) en la posición 304, Ala (A) en la posición 377, Thr (T) en la posición 466 y/o Ala (A) en la posición 477, en donde la posición se define con respecto a la SEQ ID NO:1;

ii. un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos según la SEQ ID NO: 1, en donde la SEQ ID NO: 1 comprende al menos una sustitución de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en P469A, P469C, P469D, P469F, P469G, P469H, P469I, P469K, P469L, P469M, P469N, P469Q, P469R, P469S, P469T, P469V, P469W y P469Y, y opcionalmente una sustitución de aminoácido I204F, P304S, P377A, P466T y/o P477A, en donde las sustituciones de aminoácidos se definen con respecto a la SEQ ID NO: 1;

iii. un polipéptido según i) a ii), pero que carece de una secuencia señal y/o una secuencia proproteína;

iv. un polipéptido según ii) a iii), en donde el polipéptido tiene al menos 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o 99 % de identidad con respecto a la secuencia de aminoácidos según la SEQ ID NO: 1; y,

v. un polipéptido codificado por un ácido nucleico que tiene 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o 99 % de identidad con respecto a la SEQ ID NO: 2, o con respecto a una secuencia codificante madura de la SEQ ID NO: 2, en donde la SEQ ID NO: 2 comprende al menos una mutación que codifica al menos una sustitución de aminoácido seleccionada del grupo que consiste en P469A, P469C, P469D, P469F, P469G, P469H, P469I, P469K, P469L, P469M, P469N, P469Q, P469R, P469S, P469T, P469V, P469W y P469Y, y opcionalmente en donde la SEQ ID NO: 2 comprende al menos una mutación adicional que codifica una sustitución de aminoácido I204F, P304S, P377A P466T y/o P477A, en donde las sustituciones de aminoácidos se definen con respecto a la SEQ ID NO: 1, en donde el polipéptido tiene menos de 70 % de actividad residual sobre acetil-AlaAlaPro-paranitroanilina (Ac-AAP-pNA) como sustrato después de que el polipéptido se ha mantenido a una temperatura de 65 °C durante 15 min

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2015/062328.

Solicitante: DSM IP ASSETS B.V..

Nacionalidad solicitante: Países Bajos.

Dirección: HET OVERLOON 1 6411 TE HEERLEN PAISES BAJOS.

Inventor/es: LAAN,VAN DER JAN METSKE, BRUINE-PAULUS,DE ANGELA, CHRISTIS,CHANTAL, SPAANS,MARTINE, VONDERVOORT,VAN DE PETER JOZEF IDA.

Fecha de Publicación: 27 de Febrero de 2019.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12C11/00 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12C CERVEZA; PREPARACIÓN DE CERVEZA POR FERMENTACIÓN (envejecimiento o maduración mediante almacenamiento C12H 1/22; métodos para reducir el contenido de alcohol después de la fermentación C12H 3/00; métodos para aumentar el contenido de alcohol después de la fermentación C12H 6/00; dispositivos de ventilación para barricas, barriles o similares C12L 9/00 ); PREPARACIÓN DE MALTA PARA LA PRODUCCIÓN DE CERVEZA; PREPARACIÓN DE LÚPULO PARA LA PRODUCCIÓN DE CERVEZA. › Procesos de fermentación de la cerveza.
C12N9/62 C12 […] › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › de Aspergillus.

PDF original: ES-2718071_T3.pdf

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