Procedimiento de aislamiento específico de ácidos nucleicos de interés.

Procedimiento de aislamiento selectivo de microorganismos de interés dentro de una muestra biológica líquida que comprende o que es susceptible de comprender,

especialmente:

* unos microorganismos de interés cuya membrana celular o la cápside no contiene colesterol, y

* unos elementos no diana, es decir:

- unas células no diana cuya membrana celular contiene colesterol, y

- eventualmente, unos virus de envoltura que contienen colesterol, y

- eventualmente unos micoplasmas que contienen colesterol, y

- eventualmente unos restos de microorganismos de interés y/o de células no diana,

comprendiendo el procedimiento las etapas siguientes:

a) poner en contacto la muestra biológica líquida con una formulación de saponina, a fin de desestabilizar las membranas celulares que contienen colesterol o las envolturas virales que contienen colesterol o las membranas de microplasma que contienen colesterol,

b) realizar un choque osmótico de las células no diana a fin de lisarlas específicamente,

c) añadir una solución de al menos una enzima apta para lisar los ácidos nucleicos libres, ADN y/o ARN, procedente de los elementos no diana lisados en solución en la muestra, que permiten obtener selectivamente los microorganismos de interés,

d) añadir un agente de precipitación de los microorganismos de interés no lisados en solución en la muestra, permitiendo dicho agente la adhesión del residuo que contiene estos microorganismos de interés y seleccionándose entre el polietilenglicol (PEG), el glicógeno, los ácidos nucleicos o una mezcla de estos agentes de precipitación.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/FR2014/050145.

Solicitante: BIOMERIEUX.

Nacionalidad solicitante: Francia.

Dirección: 69280 Marcy l'Etoile FRANCIA.

Inventor/es: TARENDEAU,FRANCK.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N15/10 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).

PDF original: ES-2752014_T3.pdf

 

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