Método y ensayo de preparación de muestras de gran volumen específico de secuencia.

Un método para aislar una molécula de ácido nucleico diana a partir de una muestra de gran volumen,

comprendiendo el método:

(a) suspender una muestra biológica en 1 ml o más de un medio de recogida;

(b) desnaturalizar y lisar la muestra biológica añadiendo un agente de desnaturalización y tampón de lisis a la muestra biológica suspendida;

(c) hibridar una molécula de ácido nucleico diana con al menos una sonda polinucleotídica;

(d) capturar la molécula de ácido nucleico diana hibridada sobre un soporte;

(e) lavar el soporte híbrido capturado con tampón de lavado para separar la molécula de ácido nucleico diana hibridizada capturada en el soporte de la muestra, aislando de este modo la molécula de ácido nucleico diana; y

(f) resuspender el soporte híbrido capturado lavado en un tampón de resuspensión,

en el que dicho método no incluye una etapa de centrifugación, la muestra de gran volumen es de 0,5 ml o más, la etapa de desnaturalización y lisis (b) se completa en menos de 10 minutos y la combinación de la etapa de hibridación (c) y la etapa de captura (d) se completa en menos de 25 minutos y se aíslan 10 copias o más de la molécula de ácido nucleico diana si están presentes en la muestra en menos de 1 hora.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2010/022264.

Solicitante: QIAGEN GAITHERSBURG, INC.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1201 CLOPPER ROAD GAITHERSBURG, MD 20878 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: O'NEIL,DOMINIC, NAZARENKO,IRINA, UPTON,KAROLINA, DOSEEVA,VICTORIA, LOEFFERT,DIRK, FORBES,THOMAS, WOLFF,JOHN, KOBAYASHI,LORI, RANGWALLA,SAMEERA.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N1/06 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Lisis de microorganismos.
  • C12N15/10 C12N […] › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
  • C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2644516_T3.pdf

 

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