Método y dispositivo para la producción y/o purificación de polinucleótidos y productos obtenibles de los mismos.

Un método para la obtención de un plásmido de ADN de interés, y que comprende las etapas de:



b) introducir células que contengan un plásmido de ADN de interés en un conducto y disgregarlas ininterrumpidamente, mezclando dichas células con una solución de lisis alcalina para formar células lisadas y realizar una etapa de neutralización de las células lisadas con una solución de neutralización que es una composición de ácido acético/acetato para formar una primera mezcla en la que el pH de dicha solución de neutralización está dentro del intervalo comprendido entre aproximadamente 5,0 y 6,0;

c) realizar ininterrumpidamente en el conducto, una precipitación de contaminantes de plásmidos de ADN, añadiendo a la primera mezcla de la etapa b), una solución que contenga una o más sales, para formar una segunda mezcla usando medios que provoquen un efecto Venturi, en el que dicha sal, o sales, se seleccionan del grupo que consiste en CaCl2, MgCl2, ZnCl2, SrCl2 y BaCl2, LiCl, acetato de amonio, sulfato de amonio, sulfato de sodio y sulfato de magnesio o una mezcla de los mismos y en el que dicha una o más sales están en dicha solución añadida que contiene una o más sales, a una concentración comprendida entre 2 M y 6 M;

d) recuperar la segunda mezcla y permitir que se separe un precipitado de la solución de la segunda mezcla; y

e) recuperar un material soluble, que comprenda el plásmido de ADN de interés, de la solución de la segunda mezcla, excluyendo al mismo tiempo la recuperación del precipitado de la segunda mezcla.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2010/057276.

Solicitante: Eurogentec SA.

Nacionalidad solicitante: Bélgica.

Dirección: Liege Science Park Rue Bois Saint-Jean 5 4102 Seraing BELGICA.

Inventor/es: LEDENT,PHILIPPE.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N15/10 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
  • C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2614429_T3.pdf

 

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