Estabilización de termolisina en solución acuosa.

Una composición líquida que comprende la termolisina en una forma disociada y a una concentración en el rango de aproximadamente 1 mg/ml y aproximadamente 10 mg/ml,

en el que a una temperatura en el rango de aproximadamente 2 °C y aproximadamente 8 °C y al menos cinco horas después de la formación de la composición, la turbidez de la composición es igual a la turbidez de una solución de referencia, siendo la composición obtenible por un método que comprende la primera etapa (P) de mezclar una preparación sólida que comprende la termolisina con un disolvente acuoso y obteniendo una primera solución, en el que la preparación sólida comprende la termolisina a una concentración de aproximadamente 20% [p/p] o superior,

y en el que la primera solución comprende

(i) una sal de tampón capaz de mantener un pH en el rango de pH 4,5 y pH 9,

(ii) una o más sales, y

(iii) termolisina,

y en la primera solución, la concentración de la preparación que comprende la termolisina en el disolvente acuoso está en el rango de aproximadamente 1 mg/ml y aproximadamente 100 mg/ml, y la concentración agregada de una o más sales incluyendo las sales de tampón está en el rango de aproximadamente 0,1 mM y 500 mM, y en el que el método comprende además la etapa posterior (Q) de añadir a la primera solución una cantidad medida de una sal adicional, en el que la sal se selecciona del grupo que consiste en NaCl, NaBr, NaNO3, NaJ, KCl, LiCl, MgCl2, CaCl2, y una mezcla de los mismos,

y disolver la sal adicional, y en el que la concentración total de la sal adicional en la solución obtenida después de la etapa (Q) se encuentra en el rango de aproximadamente 1,5 M y aproximadamente 5 M,

en la que la turbidez se determina mediante inspección visual de atenuación de la luz, o midiendo la densidad óptica con un fotómetro o por medición de la dispersión de la luz con un fotómetro de dispersión de luz, en el que la solución de referencia se compone de los mismos ingredientes disociados a las mismas concentraciones correspondientes que en la composición, y en el que la solución de referencia carece de termolisina o fragmentos de la misma.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E12185993.

Solicitante: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG.

Inventor/es: WEBER, MARKUS, THALHOFER,JOHANN-PETER, HOELKE,WERNER, Liehre,Antje.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N9/54 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.; Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › siendo las bacterias del género Bacillus.
  • C12N9/96 C12N 9/00 […] › Estabilización de una enzima por formación de un aducto o de una composición; Formación de conjugaciones de enzimas.

PDF original: ES-2577006_T3.pdf

 

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