Composición de bacillus resistente a la bilis.

Composición de Bacillus subtilis, que comprende de 105 a 1012 CFU/g de células de espora de Bacillus subtilis,

donde la composición de Bacillus subtilis se caracteriza por el hecho de que:

(i): las esporas de Bacillus subtilis tienen una germinación y crecimiento rápidos de espora a célula vegetativa en presencia de un medio de sal de bilis que comprende 4 mM de sales de bilis y en presencia de un medio de sal de bilis que comprende 6 mM de sales de bilis, definido por el hecho de que las esporas de Bacillus subtilis alcanzan un punto de crecimiento de célula vegetativa de 0,4 OD630 dentro de menos de 18 y 19 horas, respectivamente, donde el punto de crecimiento de célula vegetativa es el punto en la curva de crecimiento donde el valor OD comienza a aumentar (debido a crecimiento de las células vegetativas) en un cierto sentido continuo y alcanza un OD630 de 0,4;

(I): donde el medio de sal de bilis es el medio de Caldo de Infusión de Ternero no selectivo (VIB) del ejemplo 1 aquí suplementado con una mezcla de sal de bilis que comprende el taurodesoxicolato de sales de bilis conjugadas y glicodeoxicolato y el deoxicolato de sal de bilis desconjugada en las proporciones 60 % del taurodesoxicolato, 30 % del glicodeoxicolato y 10 % de deoxicolato; y

(II): donde el análisis de ensayo OD se realiza por los pasos siguientes:

(a): rellenar un pocillo en una placa de microtitulación con 0,150 ml medio de sal de bilis con 108 esporas de Bacillus subtilis por ml medio (es decir, este es tiempo cero); y

(b): incubar la placa a 37 °C bajo condiciones atmosféricas y medir los valores OD630, utilizando un espectrofotómetro y con agitación antes cada lectura, para obtener una curva de crecimiento representativa a lo largo del tiempo;

y

(ii) las células vegetativas de Bacillus subtilis producen una enzima o un aminoácido seleccionado del grupo que consiste en fenilalanina, valina, treonina, triptófano, isoleucina, metionina, leucina, lisina, cisteína, tirosina, histidina y arginina;

y con la condición de que las células vegetativas de Bacillus subtilis no son células, como se describe en la reivindicación 1 de PCT/EP2008/057296 y la solicitud de prioridad de esta, EP07111 939.0, publicada como EP2011858A1, donde las células vegetativas de bacillus del punto (ii) según la reivindicación 1 de PCT/EP2008/057296 y EP2011858 A1

producen fitasa en una cantidad de al menos 1,25 veces más de la célula de Bacillus de referencia DSM 19467, donde la cantidad de fitasa producida se mide por el ensayo de fitasa del ejemplo 2 de PCT/EP2008/057296 y EP2011858A1 después de 4 horas de crecimiento a 37 °C en el medio de Caldo de Infusión de Corazón (HIB) no selectivo del ejemplo 2 de PCT/EP2008/057296 y EP2011858A1, y

donde el análisis de ensayo de fitasa se realiza por los pasos siguientes:

(a): hacer un cultivo de células vegetativas de bacillus durante toda la noche en un medio de cultivo enriquecido;

y

(b): transferir un 1 % de inóculo del cultivo a un medio HIB (es decir, este es tiempo cero) durante toda la noche e incubar a 37 °C hasta la medición de actividad de fitasa.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2009/067317.

Solicitante: CHR. HANSEN A/S.

Nacionalidad solicitante: Dinamarca.

Dirección: Boege Alle 10-12 2970 Hoersholm DINAMARCA.

Inventor/es: KNAP,INGE, Knarreborg,Ane, Leser,Thomas Dyrmann, Lund,Bente, CANTOR,METTE DINES, DERKX,PATRICK.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A23K1/00 SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A23 ALIMENTOS O PRODUCTOS ALIMENTICIOS; SU TRATAMIENTO, NO CUBIERTO POR OTRAS CLASES.A23K ALIMENTOS PARA ANIMALES; METODOS ESPECIALMENTE ADAPTADOS PARA SU PRODUCCION.Productos alimenticios para animales.
  • A23L1/30 A23 […] › A23L ALIMENTOS, PRODUCTOS ALIMENTICIOS O BEBIDAS NO ALCOHOLICAS NO CUBIERTOS POR LAS SUBCLASES A21D O A23B - A23J; SU PREPARACION O TRATAMIENTO, p. ej. COCCION, MODIFICACION DE LAS CUALIDADES NUTRICIONALES, TRATAMIENTO FISICO (conformación o tratamiento, no enteramente cubierto por la presente subclase, A23P ); CONSERVACION DE ALIMENTOS O DE PRODUCTOS ALIMENTICIOS, EN GENERAL (conservación de la harina o las masas panificables A21D). › A23L 1/00 Alimentos o productos alimenticios; Su preparación o tratamiento (su conservación en general A23L 3/00). › que contienen aditivos (A23L 1/308 tiene prioridad).
  • C12N1/20 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Bacterias; Sus medios de cultivo.
  • C12N15/01 C12N […] › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Preparación de mutantes sin introducción de material genético extraño; Procedimientos de cribado para ello.

PDF original: ES-2613805_T3.pdf

 

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