Composiciones que comprenden un anticuerpo específico de aP2 o un fragmento del mismo para su uso en el tratamiento de la diabetes, intolerancia a la glucosa o insulinorresistencia inducida por obesidad.

Una composición que comprende un anticuerpo específico de aP2 o un fragmento de unión a aP2 del mismo,

para su uso en un método de tratamiento de la diabetes o

reducción de la intolerancia a la glucosa o

reducción de la insulinorresistencia inducida por obesidad,

comprendiendo el método la administración de la composición a un sujeto y en el que la administración de la composición al sujeto reduce la concentración de aP2 en suero.

Composiciones que comprenden un anticuerpo específico de aP2 o un fragmento del mismo para su uso en el tratamiento de la diabetes, intolerancia a la glucosa o insulinorresistencia inducida por obesidad.

Antecedentes de la invención

La expresión síndrome metabólico o enfermedad metabólica define un grupo de factores de riesgo metabólicos que se reúne en un solo individuo y conducen a la diabetes y a enfermedad cardiovascular. Las principales características del síndrome metabólico incluyen insulinorresistencia, hipertensión (presión arterial alta), anomalías del colesterol y un riesgo aumentado de coagulación. La insulinorresistencia se refiere a la capacidad disminuida de las células para responder a la acción de la insulina en promover el transporte de la glucosa del azúcar, de la sangre hacia el interior de los músculos y otros tejidos. En la mayoría de los casos, los pacientes con este grupo de factores de riesgo tienen sobrepeso o son obesos.

Sumario de la invención

La invención se basa en el descubrimiento de que la aP2 en suero regula la sensibilidad sistémica a la insulina y el

metabolismo de la glucosa. Por consiguiente, la presente invención proporciona una composición que comprende un

anticuerpo específico de aP2 o un fragmento de unión a antígeno de aP2 del mismo, para su uso en un método de

tratamiento de la diabetes o

reducción de la intolerancia a la glucosa o

reducción de la insulinorresistencia inducida por obesidad,

comprendiendo el método administrar la composición a un sujeto y en el que la administración de la composición al sujeto reduce la concentración de aP2 en suero. En el presente documento se describe el tratamiento de un síntoma de enfermedad metabólica administrando al sujeto una composición que se une a aP2 y la bloquea en la circulación (por ejemplo, aP2 en sangre o en suero), administrando una composición que se une a y reduce la cantidad de la proteína aP2 en la circulación. Por ejemplo, la intolerancia a la glucosa se reduce tras la administración de dicho inhibidor. Las composiciones ejemplares incluyen anticuerpos o fragmentos específicos de antígeno de los mismos.

La prevención o reducción de la gravedad de enfermedad metabólica implica administrar a un sujeto una composición que reduzca la concentración de aP2 en suero. El tratamiento comprende identificar a un sujeto caracterizado por un nivel elevado de aP2 en suero en comparación con el nivel de aP2 de un sujeto (o conjunto de sujetos) de control, normal, sano, de la misma edad y mismo sexo. Por ejemplo, un sujeto de control es delgado y se caracteriza por un nivel de aP2 en suero de 2 pg/l, y un sujeto que necesita intervención terapéutica se caracteriza por un nivel de aP2 que es elevado. El sujeto a tratar en la presente invención, como se indica en las reivindicaciones 1-6, tiene sobrepeso, es obeso y/o comprende un nivel de aP2 en suero mayor de 2 pg/l (por ejemplo, 25, 28, 3, 32, 35, 4 pg/l o más de aP2 en suero). Opcionalmente los sujetos se identifican como de peso normal (IMC 18,5-24,9), sobrepeso (IMC 25-29,9) u obesos (IMC de 3 o mayor).

En cada uno de los métodos terapéuticos descritos en el presente documento, la concentración de aP2 en suero se reduce al menos un 1 %, 25 %, 5 %, 75 %, 2 veces, 5 veces, 1 veces o más en comparación con la concentración de aP2 en suero antes del tratamiento. En un ejemplo, la composición que reduce la concentración de aP2 en suero es un anticuerpo específico de aP2. El anticuerpo es un anticuerpo monoclonal o policlonal purificado. Por ejemplo, el anticuerpo que se une a epítopos de aP2 accesibles para el anticuerpo, por ejemplo, los resaltados en la Fig. 3. Dichos anticuerpos se unen a epítopos de aP2 que están expuestos en la superficie basándose en la estructura tridimensional de la proteína en solución (por ejemplo, en sangre y suero) como se muestra en el modelo cristalográfico (Fig. 3). Por ejemplo, el anticuerpo se une a un epítopo discontinuo de aP2. Un epítopo discontinuo es uno en el que los aminoácidos están muy juntos en la estructura 3dimensional de la proteína (plegada), pero separados cuando no está plegada. Preferentemente, el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal cuya especificidad de unión comprende un epítopo conformacional que es accesible a la superficie en la molécula de aP2 tal como existe en un fluido corporal tal como sangre, suero o plasma. Por ejemplo, el epítopo comprende al menos una de las siguientes partes de una proteína aP2 humana: los restos 1-5, el resto 22, los restos 36-37, los restos 46-47, el resto 57, los restos 59-6, el resto 78, 8, 89, los restos 97-11, los restos 11-112, el resto 122 de la SEC ID Ne: 4. Opcionalmente, el anticuerpo se une a dos o más de los epítopos (resto o cadena de restos) tal como se expongan en la superficie de la proteína aP2 en solución. En algunos ejemplos, el anticuerpo no se une a aP2 desnaturalizada o no se une a un epítopo lineal de aP2.

La invención no solo abarca el uso médico como se reivindica de un anticuerpo monoclonal intacto específico de aP2 que reduce la concentración de aP2 en suero y el uso del mismo como se reivindica, sino también un fragmento de anticuerpo inmunológicamente activo, por ejemplo, un fragmento Fab o (Fab)2; una molécula Fv monocatenaria modificada por ingeniería genética; o una molécula quimérica, por ejemplo, un anticuerpo que contiene la especificidad de unión de un anticuerpo, por ejemplo, de origen murino, y las partes restantes de otro anticuerpo, por ejemplo, de origen humano.

Los tratamientos y composiciones descritos en el presente documento son útiles para tratar o reducir la gravedad de trastornos clínicos que se caracterizan por una secreción de aP2 elevada de una manera aberrante, por ejemplo, niveles de aP2 elevados en la sangre o en el suero. Dichas afecciones incluyen el síndrome metabólico, la intolerancia a la glucosa, la obesidad y la diabetes.

La presente invención se describe en las reivindicaciones 1-6.

Breve descripción de los dibujos

La Fig. 1 a es una fotografía de un gel electroforético que muestra la secreción de aP2 en adipocitos. Un Usado de células enteras (LCE) y un medio acondicionado (MA) de adipocitos de TS (Tipo Silvestre) o carentes de FABP (DK) diferenciados, se transfirieron usando anticuerpos anti-aP2, malí, caveolina o AKT.

La Fig. 1b es un gráfico de barras que muestra la concentración de aP2 en suero de ratones de TS, aP2/' (aP2KO), malí'7' (mal 1 KO) y aP2-maU /(DKO). Los niveles de aP2 se determinaron con un ELISA para aP2 como se describe en los procedimientos experimentales.

La Fig. 1c es un gráfico de barras que muestra la concentración de aP2 en suero en ratones delgados (TS con dieta regular, DR), con obesidad inducida por dieta (TS con dieta rica en grasas, DRG) o con obesidad genética carentes de leptina (ob).

La Fig. 1d es un gráfico de barras que muestra la concentración de aP2 en suero en ratones que se han sometido a trasplante de médula ósea. Los trasplantes de médula ósea de realizaron entre ratones de TS y carentes de FABP (DKO) y los niveles de aP2 en suero se determinaron con un ELISA para aP2. Inserto, transferencia de aP2 de medio acondicionado de macrófagos transfectados con plásmidos de control o aP2.

La Fig. 2a es una fotografía de un gel electroforético que muestra los resultados de un ensayo de transferencia de Western usando un anticuerpo específico de aP2. El Usado celular de adipocitos TS o carentes de FABP se transfirieron usando IgG control de conejo, suero pre-inmune o anticuerpos aP2.

La Fig. 2b es un gráfico de barras que muestra la concentración de aP2 en suero en ratones antes y después de la administración del anticuerpo aP2. Los niveles de aP2 en suero en ratones que se mantuvieron con una dieta rica en grasas y a los que se inyectó anticuerpos aP2 o control durante dos semanas, se analizaron con un ELISA para aP2.

La Fig. 2c es un gráfico de barras que muestra los niveles de glucosa en ratones con aP2 en suero disminuida. Ratones de TS mantenidos con una dieta rica en grasa recibieron una inyección de anticuerpos aP2 o IgG control durante dos semanas y los pesos corporales se determinaron antes y después de las inyecciones.

La Fig. 2d es una gráfica lineal que muestra los resultados de un ensayo de tolerancia a glucosa de ratones a los que se inyectó anticuerpos aP2 o control durante dos semanas.

La Fig. 2e es una gráfica lineal que muestra los resultados de un ensayo de tolerancia a insulina de ratones a los que se inyectó aP2 recombinante o control durante dos semanas.

La Fig. 2f es un gráfico de barras que muestra la tasa de producción hepática de glucosa de pinzamiento... [Seguir leyendo]

1. Una composición que comprende un anticuerpo específico de aP2 o un fragmento de unión a aP2 del mismo, para su uso en un método de tratamiento de la diabetes o 5 reducción de la intolerancia a la glucosa o

reducción de la insulinorresistencia inducida por obesidad,

comprendiendo el método la administración de la composición a un sujeto y en el que la administración de la composición al sujeto reduce la concentración de aP2 en suero.

2. La composición para su uso en el método de la reivindicación 1, en la que el sujeto tiene sobrepeso, es obeso y/o

tiene un nivel de aP2 en suero mayor de 2 pg/l.

3. La composición para su uso en el método de la reivindicación 1, en la que la concentración de aP2 en suero se reduce al menos un 1 %.

4. La composición para su uso en el método de la reivindicación 1, en la que el anticuerpo específico de aP2 se une a un epítopo discontinuo de aP2.

5. La composición para su uso en el método de la reivindicación 4, en la que el epítopo se expone en la superficie 2 sobre una estructura tridimensional de aP2 en solución.

6. La composición para su uso en el método de la reivindicación 4, en la que el epítopo comprende al menos una de las siguientes secuencias: los restos 1-5, el resto 22, los restos 36-37, los restos 46-47, el resto 57, los restos 59-6, el resto 78, el resto 8, el resto 89, los restos 97-11, los restos 11-112, el resto 122 de la SEC ID Ne: 4.