Célula para su uso en la producción de proteína exógena, y procedimiento de producción usando la célula.

Método de producción de un anticuerpo, que comprende cultivar una célula que expresa fuertemente un transportador de bicarbonato y tiene un ADN transferido que codifica un anticuerpo y permitiendo de ese modo que la célula produzca dicho anticuerpo,

en el que la célula que expresa fuertemente un transportador de bicarbonato es una célula a la que se ha transferido un ADN que codifica el transportador de bicarbonato.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/JP2008/069184.

Solicitante: CHUGAI SEIYAKU KABUSHIKI KAISHA.

Nacionalidad solicitante: Japón.

Dirección: 5-1 UKIMA 5-CHOME KITA-KU TOKYO 115-8543 JAPON.

Inventor/es: TABUCHI,HISAHIRO, SUGIYAMA,TOMOYA, TAINAKA,SATOSHI.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A61K38/00 SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE.A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L;   composiciones a base de jabón C11D). › Preparaciones medicinales que contienen péptidos (péptidos que contienen ciclos beta-lactama A61K 31/00; dipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina 2,5-dionas, A61K 31/00; péptidos basados en la ergolina A61K 31/48; que contienen compuestos macromoleculares que tienen unidades aminoácido repartidas estadísticamente A61K 31/74; preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos A61K 39/00; preparaciones medicinales caracterizadas por los ingredientes no activos, p. ej. péptidos como soportes de fármacos, A61K 47/00).
  • A61K39/395 A61K […] › A61K 39/00 Preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos (materiales para ensayos inmunológicos G01N 33/53). › Anticuerpos (aglutininas A61K 38/36 ); Inmunoglobulinas; Inmunosuero, p. ej. suero antilinfocitario.
  • C12N15/09 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
  • C12N5/10 C12N […] › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células modificadas por introducción de material genético extraño, p. ej. células transformadas por virus.
  • C12P21/00 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA.Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00).
  • C12P21/08 C12P […] › C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › Anticuerpos monoclonales.

PDF original: ES-2548294_T3.pdf

 


Fragmento de la descripción:

Célula para su uso en la producción de proteína exógena, y procedimiento de producción usando la célula Campo técnico

La presente invención se refiere a una célula que va a usarse en la producción de heteroproteínas y a un método de producción usando la célula. En más detalle, la presente invención se refiere a una célula que expresa fuertemente un transportador de bicarbonato y a un método para producir un polipéptido usando la célula.

Técnica anterior

Cuando se producen proteínas útiles como productos farmacéuticos con la técnica de ADN recombinante, el uso de células animales permite una modificación postraduccional y un plegamiento complicados que las células procariotas no pueden realizar. Por tanto, con frecuencia se usan células animales como células huésped para producir proteínas recombinantes.

Recientemente se han desarrollado un gran número de productos biofarmacéuticos, tales como anticuerpos y proteínas fisiológicamente activas. Las técnicas que permiten la producción eficaz de proteínas recombinantes por células animales conducen a una reducción del coste de los productos biofarmacéuticos y prometen su suministro estable a los pacientes.

En estas circunstancias, se desea un método de producción de proteínas con mayor eficacia de producción.

Un intercambiador aniónico es un transportador que media el antiporte de aniones intracelulares y extracelulares a través de una membrana plasmática (proteína de transporte de membrana). Una familia SLC4 es una familia de transportadores de HCO3", y tres miembros pertenecientes a la familia SLC4, concretamente AE1, AE2 y AE3, tienen la función de intercambiar CI' fuera de una membrana plasmática por HCO3' dentro de una membrana plasmática.

En el riñón, se encuentra AE1 en células a intercaladas en los conductos colectores en la membrana basolateral (documento no de patente 1). Se ha sabido que mutaciones en AE1 humano producen acidosis tubular renal distal (documentos no de patente 2 y 3).

Además, en el riñón, se han encontrado tres ¡soformas de AE2, concretamente AE2a, AE2b y AE2c. Se considera que AE2 regula la homeostasls del pH ¡ntracelular para la transducción de señales celulares (documento no de patente 4). Sin embargo, se ha encontrado que un ratón deficiente en AE2 que muere durante el periodo de destete no padece anomalías fenotíplcas renales (documento no de patente 5).

SLC26 es una familia de intercambiadores aniónicos relativamente nueva, y se ha sugerido que un gran número de sus miembros (por ejemplo, SLC26A3, SLC26A4, SLC26A6 y SLC26A9) son intercambiadores de bicarbonato (documentos no de patente 6 a 11).

Por otra parte, se desconoce absolutamente si expresando fuertemente un intercambiador aniónico que tiene una función de transportador de bicarbonato, puede promoverse artificialmente la captación de aniones al interior de una célula en cultivo y la excreción de aniones al exterior de la célula, mediado por el intercambiador aniónico, lo que contribuye a la mejora en la producción de una proteína recombinante deseada en la célula en cultivo.

[Documento no de patente 1]

van Adelsberg JS. et. al., J Biol Chem 1993; 268:11283-11289 [Documento no de patente 2]

Shayakui C. et. al., Curr Opin Nephrol Hypertens 2000; 9:541-546 [Documento no de patente 3]

Alper SL. et. al., Annu Rev Physiol 2002; 64:899-923 [Documento no de patente 4]

Komlosi P. et. al., Am J Physiol Renal Physiol 2005; 288:F380-F386 [Documento no de patente 5]

Gawenis LR. et. al., J Biol Chem 2004; 279:30531-30539 [Documento no de patente 6]

Melvin etal, J Biol Chem 1999; 274:22855-22861

[Documento no de patente 7]

Ko et al., EMBO J. 2002; 21:5662-5672 [Documento no de patente 8]

Soleimani et al., Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2001; 280:F356-F364 [Documento no de patente 9]

Wang et al, Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2002; 282:G573-G579 [Documento no de patente 10]

Petrovlc etal., Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2004; 286:F161-F169 [Documento no de patente 11]

Xu etal., Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2005; 289:C493-C505

Descripción de la invención

Problemas que va a solucionar la invención

Un objeto de la presente Invención es proporcionar un método que pueda producir un polipéptido eficazmente. Medios para resolver el problema

Como resultado de extensas e Intensivas investigaciones enfocadas a la solución del problema anterior, los presentes inventores han encontrado que es posible aumentar el rendimiento de un polipéptido deseado mediante el uso de una célula que expresa fuertemente un transportador de bicarbonato. Así se ha logrado la presente invención. Además, el péptido deseado podría producirse en una cantidad incluso mayor mediante el uso de células que pueden coexpresar un transportador de bicarbonato y ácido cisteína-sulfínico descarboxilasa (a continuación en el presente documento denominada en ocasiones "OSAD") o alanina aminotransferasa (a continuación en el presente documento denominada en ocasiones "ALT").

La presente invención puede resumirse de la siguiente manera.

(1) Un método de producción de un polipéptido, que comprende cultivar una célula que expresa fuertemente un transportador de bicarbonato y tiene un ADN transferido que codifica un polipéptido deseado y permitiendo de ese modo que la célula produzca dicho polipéptido.

(2) El método de (1) anterior, en el que la célula que expresa fuertemente un transportador de bicarbonato es una célula a la que se ha transferido un ADN que codifica el transportador de bicarbonato.

(3) El método de producción de (1) ó (2) anterior, en el que la célula que expresa fuertemente un transportador de bicarbonato expresa además fuertemente ácido cisteína-sulfínico descarboxilasa o alanina aminotransferasa.

(4) El método de producción según uno cualquiera de (1 )-(3) anteriores, en el que el transportador de bicarbonato es un intercambiador aniónico SLC4 o un intercambiador aniónico SLC26.

(5) El método de producción según uno cualquiera de (1 )-(3) anteriores, en el que el transportador de bicarbonato es un intercambiador aniónico SLC4.

(6) El método de producción de (5) anterior, en el que el intercambiador aniónico SLC4 es AE1.

(7) El método según uno cualquiera de (1)-(6) anteriores, en el que la célula son células de ovario de hámster chino.

(8) El método según uno cualquiera de (1)-(7) anteriores, en el que el péptido deseado es un anticuerpo.

(9) El método según uno cualquiera de (4)-(6) anteriores, en el que el ADN que codifica el intercambiador aniónico SLC4 es uno cualquiera de los siguientes (a) a (e):

(a) un ADN que codifica un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos tal como se muestra en SEQ ID NO:

2;

(b) un ADN que codifica un polipéptido que tiene una secuencia de aminoácidos derivada de la secuencia de aminoácidos tal como se muestra en SEQ ID NO: 2 mediante sustitución, deleción, adición y/o inserción de uno o más residuos de aminoácido y aún tiene actividad de intercambiador aniónico SLC4;

(c) un ADN que codifica un polipéptido que tiene una homología de secuencia de aminoácidos del 50% o más con la

secuencia de aminoácidos tal como se muestra en SEQ ID NO: 2 y que aún tiene actividad de intercambiador aniónico SLC4;

(d) un ADN que tiene la secuencia de nucleótidos tal como se muestra en SEQ ID NO: 1;

(e) un ADN que se híbrida con un ADN complementario a un ADN que tiene la secuencia de nucleótidos tal como se muestra en SEQ ID NO: 1 en condiciones rigurosas y aún codifica un polipéptido que tiene actividad de intercambiador aniónico SLC4.

(10) Un método de preparación de un producto farmacéutico que contiene un polipéptido preparado mediante el método según uno cualquiera de (1 )-(9) anteriores.

(11) Una célula que tiene un ADN transferido que codifica un transportador de bicarbonato y un ADN transferido que codifica un polipéptido deseado.

(12) La célula según (11) anterior, que tiene además un ADN transferido que codifica ácido cisteína-sulfínico descarboxilasa o alanina aminotransferasa.

(13) Una célula que tiene un ADN transferido que codifica un transportador de bicarbonato y un ADN transferido que codifica ácido cisteína-sulfínico descarboxilasa o alanina aminotransferasa.

Efecto de la invención

Según la presente invención, se ha hecho posible producir un polipéptido deseado con alto rendimiento.

La presente memoria descriptiva engloba el contenido descrito en la memoria descriptiva y/o los dibujos de la solicitud... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

Método de producción de un anticuerpo, que comprende cultivar una célula que expresa fuertemente un transportador de bicarbonato y tiene un ADN transferido que codifica un anticuerpo y permitiendo de ese modo que la célula produzca dicho anticuerpo, en el que la célula que expresa fuertemente un transportador de bicarbonato es una célula a la que se ha transferido un ADN que codifica el transportador de bicarbonato.

Método de producción según la reivindicación 1, en el que la célula que expresa fuertemente un transportador de bicarbonato expresa además fuertemente ácido cistefna-sulfínico descarboxilasa o alanina aminotransferasa.

Método de producción según la reivindicación 1 ó 2, en el que el transportador de bicarbonato es un intercambiador aniónico SLC4 o un intercambiador aniónico SLC26.

Método de producción según la reivindicación 1 ó 2, en el que el transportador de bicarbonato es un intercambiador aniónico SLC4.

Método de producción según la reivindicación 4, en el que el intercambiador aniónico SLC4 es AE1.

Método según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que la célula son células de ovario de hámster chino.

Método según una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 5, en el que el ADN que codifica el intercambiador aniónico SLC4 es uno cualquiera de los siguientes (a) a (e):

(a) un ADN que codifica un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos tal como se muestra en SEQ ID NO: 2;

(b) un ADN que codifica un polipéptido que tiene una secuencia de aminoácidos derivada de la secuencia de aminoácidos tal como se muestra en SEQ ID NO: 2 mediante sustitución, deleción, adición y/o inserción de uno o más residuos de aminoácido y aún tiene actividad de intercambiador aniónico SLC4;

(c) un ADN que codifica un polipéptido que tiene una homología de secuencia de aminoácidos del 50% o más con la secuencia de aminoácidos tal como se muestra en SEQ ID NO: 2 y que aún tiene actividad de intercambiador aniónico SLC4;

(d) un ADN que tiene la secuencia de nucleótidos tal como se muestra en SEQ ID NO: 1;

(e) un ADN que se híbrida con un ADN complementario a un ADN que tiene la secuencia de nucleótidos tal como se muestra en SEQ ID NO: 1 en condiciones rigurosas y aún codifica un polipéptido que tiene actividad de intercambiador aniónico SLC4.

Método según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que dicho método se usa para producir un anticuerpo en la preparación de un producto farmacéutico.

Célula que tiene un ADN transferido que codifica un transportador de bicarbonato, y

(a) un ADN transferido que codifica un anticuerpo; y/o

(b) un ADN que codifica ácido cisteína-sulfínico descarboxilasa o alanina aminotransferasa.


 

Patentes similares o relacionadas:

Método y medios para purificar vectores retrovíricos, del 29 de Julio de 2020, de Autolus Limited: Una célula productora de retrovirus que expresa una proteína de marcaje en la superficie celular, de tal manera que los vectores retrovíricos producidos por la célula se […]

Biblioteca de péptidos y su uso, del 8 de Julio de 2020, de DAIICHI SANKYO COMPANY, LIMITED: Una biblioteca de péptidos que comprende una pluralidad de péptidos diferentes en la que los péptidos comprenden cada uno una secuencia de aminoácidos […]

Marcador de células endoteliales corneales, del 17 de Junio de 2020, de OSAKA UNIVERSITY: Método para producir una célula endotelial corneal, comprendiendo el método la etapa de clasificar, a partir de una población celular que comprende una célula […]

Vectores de AAV dirigidos a oligodendrocitos, del 10 de Junio de 2020, de THE UNIVERSITY OF NORTH CAROLINA AT CHAPEL HILL: Un ácido nucleico que codifica una cápside de AAV, comprendiendo el ácido nucleico una secuencia codificante de la cápside de AAV que es al menos el 96 % idéntica […]

Reconocimiento de unión a diana celular mediante un agente bioactivo usando transferencia de energía de resonancia de bioluminiscencia intracelular, del 6 de Mayo de 2020, de PROMEGA CORPORATION: Un sistema de ensayo que comprende: (a) una biblioteca de agentes bioactivos, cada uno de los cuales está fijado a un fluoróforo; (b) una diana celular fusionada a […]

Anticuerpo contra péptido codificado por exón-21 de periostina y composición farmacéutica para prevenir o tratar enfermedades asociadas a inflamación que contienen el mismo, del 6 de Mayo de 2020, de OSAKA UNIVERSITY: Anticuerpo que se une a uno o más péptidos seleccionados del grupo que consiste en un péptido codificado por el exón-21 de periostina que […]

Combinación de dos elementos genéticos para el control del desarrollo del tipo floral de una planta dicotiledónea, y utilización en procedimientos de detección y selección, del 1 de Abril de 2020, de Institut national de recherche pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement: Utilización de una combinación de dos elementos genéticos para el control del desarrollo del tipo floral de una planta dicotiledónea, comprendiendo dicha combinación, respectivamente: […]

Producción de proteínas en medios de cultivo celular libres de glutamina, del 25 de Marzo de 2020, de F. HOFFMANN-LA ROCHE AG: Un procedimiento para producir un polipéptido en una célula huésped de mamífero que expresa dicho polipéptido, que comprende cultivar la célula […]

Utilizamos cookies para mejorar nuestros servicios y mostrarle publicidad relevante. Si continua navegando, consideramos que acepta su uso. Puede obtener más información aquí. .