Inhibidores de JAK2 y su uso para el tratamiento de enfermedades mieloproliferativas y cáncer.

Un compuesto de fórmula

o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

en la que

X es alquilo C1-4;

Y es alquilo C1-4;

R es

cualquiera de los cuales está opcionalmente condensado con un carbociclo o heterociclo de 5 o 6 miembros, teniendo dicho heterociclo un heteroátomo seleccionado entre NR3 o S, estando dicho carbociclo o heterociclo condensado opcionalmente sustituido con 0-3 R1,

R1 es H, halo, CN, alquilo C1-6 sustituido con 0-3 Rc, CF3, CONRaRa, NRaRa, COORb, SO2-alquilo C1-4, C(O)Rd, cicloalquilo sustituido con 0-3 Re, furanilo, tetrahidropiranilo o piridinilo;

R2 es H, alquilo C1-6 sustituido con 0-3 Rc, C(O)O-alquilo C1-4, SO2-alquilo C1-4, cicloalquilo sustituido con 0-3 Re, tetrahidropiranilo o R2 está ausente;

R3 es H, C(O)O-alquilo C1-4, o R3 está ausente;

Ra es H, alquilo C1-6 sustituido con 0-3 Re, cicloalquilo C3-6 sustituido con 0-3 Re, tetrahidropiranilo o dioxotetrahidrotiofenilo;

Rb es H o alquilo C1-6;

Rc es H, halo, CN, OH, O-alquilo C1-4, O-alquil C1-4-O-alquilo C1-4, NH2, N(alquilo C1-4)2, C(O)N(alquilo C1-4)2, SO2- alquilo C1-4, o morfolinilo o piperazinilo cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con 0-1 alquilo C1-4; Rd es alquilo C1-6 o azeridinilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, dioxidotiomorfolinilo o tetrahidropiranilo, cualquiera de los cuales está sustituido con 0-2 Re; y

Re es H, halo, CN, alquilo C1-4, OH, O-alquilo C1-4, SO2-alquilo C1-4, NHC(O)-alquilo C1-4, morfolinilo, OC(O)-alquilo C1-4, C(O)N(alquilo C1-4)2 o O-alquil C1-4-O-alquilo C1-4.

Inhibidores de JAK2 y su uso para el tratamiento de enfermedades mieloproliferativas y cáncer

Campo de la invención La presente invención se refiere a compuestos novedosos que son útiles como agentes anticancerosos/antiproliferativos. La presente invención también se refiere a un procedimiento de uso de los compuestos en el tratamiento de enfermedades proliferativas, tales como cáncer y a composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos.

Antecedentes de la invención Los esfuerzos para identificar nuevas estrategias terapéuticas para la enfermedad Ph (-) mieloproliferativa se han reforzado por las observaciones de la activación constitutiva de la ruta de señalización de JAK-Stat en pacientes con MPD. En particular, se ha observado una mutación simple de valina a fenilalanina en el resto 617 (JAK2-V617F) en JAK2 en la mayoría de los pacientes de PV (95%) , ET (50-60%) y PMF (50-60%) (Tabla 2, Kralovics y col., 2005; Baxter y col., 2005; Tefferi y col., 2005) . La mutación V617F reside en la región del gen JAK2 que codifica el dominio pseudocinasa que se cree que funciona como un dominio autoinhibidor para regular la actividad tirosina-cinasa de JAK2. También se observan con menor frecuencia (<5% en PV y ET) mutaciones en el exón 12 de JAK2 que también da como resultado una actividad cinasa de JAK2 constitutiva y son mutuamente exclusivas con lesiones en JAK2V617F (Pardanari y col., 2007; Scott y col., 2007) . JAK2 es un miembro de una familia de tirosina-cinasas no receptoras que también incluye JAK1, Tyk2 y JAK3 y funcionan como mediadores de la señalización de receptores de citocinas (para una revisión véase Murray, 2007) . Tras una unión de citocina a su receptor afín, los miembros de la familia JAK de unión al receptor se activan y fosforilan un STAT, un factor de transcripción latente, que tras la fosforilación mediada por JAK experimenta dimerización y traslocación hacia el núcleo para regular la expresión génica. Estudios genéticos y bioquímicos han establecido combinaciones distintas de acoplamiento de un miembro de la familia JAK con un receptor individual de citocina. Por ejemplo, el acoplamiento del receptor de eritropoyetina (EPO) , trombopoyetina (TPO) y factor estimulador de colonias de granulocitos (GM-CSF) da como resultado una activación de JAK2 predominante para mediar la señalización corriente abajo. De acuerdo con la patofisiología de MPD asociada con la mutación JAK2-V617F, estas citocinas promueven la diferenciación y la expansión de los tipos celulares PV, ET y PMF subyacentes, respectivamente. A diferencia de otros sucesos de activación genética, la expresión de JAK2-V617F no es suficiente para promover la transformación en sistemas de modelos basados en células y se ha demostrado que requiere la co-expresión de los receptores de citocinas tipo I, resaltando una codependencia funcional importante de la interacción del receptor JAK-citocina (Lu y col., 2005) . De forma interesante, se han identificado mutaciones de activación en el receptor TPO (MLP, sustitución de triptófano por leucina en el resto 515) en pacientes con MPD afligidos con PMF y ET negativas en JAK2-V617F (5% y 1% respectivamente) , dando como resultado la activación constitutiva de JAK2-Stat (Pikman y col., 2006) . Estas observaciones indican que la transducción de señal de JAK-Stat puede activarse a través de la mutación en MPD en múltiples puntos de la ruta de una manera mutuamente exclusiva y sugiere la posible presencia de mutaciones adicionales de la ruta en MPD JAK2 -V617F y MPL-W515L negativo.

La importante validación de la señalización de JAK2 como un accionador de MPD Ph (-) emergió de modelos de roedor en los que la señalización del mutante JAK2-V617F se reconstituyó en el compartimento hematopoyético de células madre. Varios laboratorios demostraron que la transducción viral de JAK2-V617F en médula ósea de ratón y la reimplantación posterior en los ratones receptores reconstituyó varios aspectos de la MPD humana (Wernig y col., 2006, Lacout y col., 2006, Bumm y col., 2006, Zaeleskas y col., 2006) . Estas características incluían hematocrito elevado, esplenomegalia de hematopoyesis extramedular, granulocitosis y fibrosis de la médula ósea todo ello también se manifiesta en policitemia vera. De forma interesante, a diferencia de la afección humana, no se observó trombocitosis en estos modelos murinos y se sugirió que era atribuible a acontecimientos genéticos secundarios que contribuyen a la expansión plaquetaria (Wernig y col., 2006) . Una reconstrucción similar de la mutación del receptor TPO (MPL-W515L) en médula ósea de roedores dio como resultado una enfermedad mieloproliferativa con un comienzo más rápido que en animales JAK2-V617F que era reminiscente de la mielofibrosis primaria incluyendo esplenomegalia, hepatomegalia y fibrosis de la reticulina de médula ósea (Pikman y col., 2006) . También a diferencia del modelo JAK2-V617F, ratones que expresan MPL-W515L presentaban trombocitosis dramática que quizás indicaba una función más dominante de la activación del receptor en comparación con JAK2-V617F en la expansión de este linaje. Sin embargo, estas observaciones enfatizan colectivamente el papel de MPL-W515L y JAK2-V617F como mutaciones de dirección subyacentes en la progresión de la MPD humana.

Una cuestión clave para la base genética de MPD es el papel de acontecimientos genéticos adicionales que contribuyen a la progresión de la enfermedad aparte de JAK2 y MPL. Varias líneas de evidencias sugieren modificaciones genéticas adicionales en la progresión de la enfermedad MPD. De hecho, la recombinación mitótica sucede con frecuencia en pacientes con MPD para generar dos alelos JAK2-V617F, indicando una selección de clones celulares homocigotos para la cinasa mutada (Levine y col., 2005) . En este sentido, sería importante desarrollar animales knock-in en JAK2-V617F condicionales y determinar las consecuencias fenotípicas del homocigoto contra carga JAK2-V617F de heterocigoto. Adicionalmente, existe evidencia de un alelo de la línea germinal heredada que precede y predispone pacientes a adquirir JAK2-V617F (Goerttler y col., 2005; Levine y col.,

2006) así como la pérdida de la región cromosómica 20q en algunos pacientes con MPD. Aunque se observa clínicamente la conversión de MPD a AML a niveles moderados y se observan traslocaciones cromosómicas de activación de JAK en leucemia, los datos epidemiológicos sugieren que es cuestionable que JAK2-V617F sea un conductor genético en este contexto lo que sugiere que son necesarias modificaciones genéticas adicionales para la 5 transformación leucémica total (Theocharides y col., 2007) . A pesar de las presentes observaciones, la inhibición de JAK2 con inhibidores de moléculas pequeñas es suficiente para modular la progresión de la enfermedad en modelos animales preclínicos lo que sugiere que la activación de JAK2 es suficiente para el mantenimiento de MPD (Paradani y col., 2007) . Será importante identificar estas modificaciones genéticas adicionales y descifrar cómo contribuyen estos cambios genéticos a la progresión de la enfermedad de PV, ET y PMF en el contexto de JAK2-V617F y MPL

W515L. También será importante aplicar estrategias para identificar si otros componentes de la ruta de JAK2 están mutados en pacientes de MPD no asociados con la adquisición de JAK2-V617F, el exón 12 de JAK2 o mutaciones de MPL-W515L.

La publicación de patente WO2006/122137 desvela compuestos que son útiles como inhibidores de IKK. El Ejemplo Nº A171 desvela el compuesto de fórmula que se encontró que tenía una débil actividad frente a JAK2 en el ensayo que se describe más adelante en el presente documento.

Descripción detallada de la invención La presente invención proporciona compuestos de fórmula I, composiciones farmacéuticas que emplean dichos 20 compuestos y procedimientos de uso de dichos compuestos.

De acuerdo con la presente invención, se divulgan compuestos de fórmula I

o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en la que: Y es alquilo C1-4;

X es alquilo C1-4; R es

cualquiera de los cuales está opcionalmente condensado con un carbociclo o heterociclo de 5 o 6 miembros que tiene un heteroátomo seleccionado entre NR3 o S, estando dicho carbociclo o heterociclo condensado opcionalmente sustituido con 0-3 R1.

R1 es H, halo, CN, alquilo C1-6 sustituido con 0-3 Rc, CF3, CONRaRa, NRaRa, COORb, SO2-alquilo C1-4, C (O) Rd, cicloalquilo sustituido con 0-3 Re, furanilo, tetrahidropiranilo o piridinilo;

R2 está ausente, es H, alquilo C1-6 sustituido con 0-3 Rc, C (O) O-alquilo C1-4, SO2-alquilo C1-4, cicloalquilo sustituido con 0-3 Re, o tetrahidropiranilo;

1. Un compuesto de fórmula

o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que X es alquilo C1-4; Y es alquilo C1-4; R es

,

cualquiera de los cuales está opcionalmente condensado con un carbociclo o heterociclo de 5 o 6 miembros, 10 teniendo dicho heterociclo un heteroátomo seleccionado entre NR3 o S, estando dicho carbociclo o heterociclo condensado opcionalmente sustituido con 0-3 R1,

R1 es H, halo, CN, alquilo C1-6 sustituido con 0-3 Rc, CF3, CONRaRa, NRaRa, COORb, SO2-alquilo C1-4, C (O) Rd, cicloalquilo sustituido con 0-3 Re, furanilo, tetrahidropiranilo o piridinilo;

R2 es H, alquilo C1-6 sustituido con 0-3 Rc, C (O) O-alquilo C1-4, SO2-alquilo C1-4, cicloalquilo sustituido con 0-3 Re, 15 tetrahidropiranilo o R2 está ausente;

R3 es H, C (O) O-alquilo C1-4, o R3 está ausente;

Ra ReRe es H, alquilo C1-6 sustituido con 0-3 , cicloalquilo C3-6 sustituido con 0-3 , tetrahidropiranilo o dioxotetrahidrotiofenilo;

Rb es H o alquilo C1-6; Rc

es H, halo, CN, OH, O-alquilo C1-4, O-alquil C1-4-O-alquilo C1-4, NH2, N (alquilo C1-4) 2, C (O) N (alquilo C1-4) 2, SO2alquilo C1-4, o morfolinilo o piperazinilo cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con 0-1 alquilo C1-4;

Rd

es alquilo C1-6 o azeridinilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, dioxidotiomorfolinilo o tetrahidropiranilo, cualquiera de los cuales está sustituido con 0-2 Re; y

Re es H, halo, CN, alquilo C1-4, OH, O-alquilo C1-4, SO2-alquilo C1-4, NHC (O) -alquilo C1-4, morfolinilo, OC (O) -alquilo 25 C1-4, C (O) N (alquilo C1-4) 2 o O-alquil C1-4-O-alquilo C1-4.

2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que

X es etilo;

Y es metilo; y R es , o cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con 0-3 R1;

o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que R es

4. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que R es

cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con 0-2 R1.

5. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que R es

R1 es H, halo, CN, alquilo C1-6 sustituido con 0-3 Rc, CF3, CONRaRa, COORb, SO2-alquilo C1-4, C (O) Rd, cicloalquilo 10 sustituido con 0-3 Re, o piridinilo;

Ra ReRe es H, alquilo C1-6 sustituido con 0-3 , cicloalquilo C3-6 sustituido con 0-3 , tetrahidropiranilo, o dioxotetrahidrotiofenilo;

Rb es H o alquilo C1-6;

Rc es H, halo, OH, O-alquilo C1-4, SO2-alquilo C1-4 o morfolinilo; 15 Rd es alquilo C1-6, o azetidinilo, pirrolidinilo, morfolinilo, piperazinilo o dioxidotiomorfolinilo, cualquiera de los cuales está sustituido con 0-2 Re; y Re es H, halo, CN, OH, O-alquilo C1-4, SO2-alquilo C1-4, NHC (O) -alquilo C1-4 o morfolinilo; o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

6. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que R es

R1 es H, halo, alquilo C1-6 sustituido con 0-3 Rc, CF3, CONRaRa, COORb, C (O) Rd, cicloalquilo sustituido con 0-3 Re, o furanilo;

R2 es H, alquilo C1-6 sustituido con 0-3 Rc, SO2-alquilo C1-4, cicloalquilo sustituido con 0-3 Re, o tetrahidropiranilo;

Ra es H, o alquilo C1-6 sustituido con 0-3 Re;

Rb es H o alquilo C1-6; Rc

es H, halo, CN, OH, O-alquilo C1-4, O-alquil C1-4-O-alquilo C1-4, NH2, N (alquilo C1-4) 2, C (O) N (alquilo C1-4) 2, SO2alquilo C1-4, o morfolinilo o piperazinilo, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con 0-1 alquilo C1-4;

Rd es alquilo C1-6, o morfolinilo, piperazinilo o dioxidotiomorfolinilo, cualquiera de los cuales está sustituido con 0-2 Re

; Re es H, alquilo C1-4, CN, OH, NHC (O) -alquilo C1-4 o morfolinilo;

o su estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

7. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 6, en el que R1 es alquilo C1-6 sustituido con 0-3 Rc; y

R2 es alquilo C1-6.

8. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es:

o una sal farmacéuticamente aceptable, tautómero o estereoisómero del mismo.

9. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y uno o más compuestos de cualquiera de las reivindicaciones 1-8 o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros o estereoisómeros de el/los mismo (s) .

10. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-8 o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros

o estereoisómeros del mismo, para su uso en terapia.

11. Uso de un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-8 o sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros o estereoisómeros del mismo, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de enfermedades mieloproliferativas o cáncer.

12. Uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, en el que el cáncer está seleccionado de tumores sólidos del páncreas, la próstata, el pulmón, cabeza y cuello, mama, colon, ovario, cáncer gástrico, mieloma múltiple, melanoma, neuroblastoma, glioblastoma, mastocitosis sistémica y tumores hematológicos malignos tales como leucemia mielógena aguda (incluyendo leucemia mieloide aguda refractaria) y leucemia linfoide aguda o

la enfermedad mieloproliferativa es policitemia vera, trombocitopenia esencial o mielofibrosis primaria.

13. Uno o más compuestos de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para su uso en el tratamiento de enfermedades mieloproliferativas o cáncer en un mamífero.

14. Uno o más compuestos para su uso de acuerdo con la reivindicación 13, en los que el cáncer está

seleccionado de tumores sólidos del páncreas, la próstata, el pulmón, cabeza y cuello, mama, colon, ovario, cáncer gástrico, mieloma múltiple, melanoma, neuroblastoma, glioblastoma, mastocitosis sistémica y tumores hematológicos malignos tales como leucemia mielógena aguda (incluyendo leucemia mieloide aguda refractaria) y leucemia linfoide aguda.

15. Uno o más compuestos para su uso de acuerdo con la reivindicación 13, en los que la enfermedad 10 mieloproliferativa es policitemia vera, trombocitopenia esencial o mielofibrosis primaria.