Derivados de oligosacáridos sulfatados.

Un compuesto de la fórmula general**Fórmula**

en donde:

n es un entero que tiene un valor de 0 a 6;

U es C, N, S o es O, o sus estados de oxidación superior, incluyendo CO, COO, NO, NO2, S(O), S(O)O;

cada R independientemente es SO3M o H, en donde M es cualquier catión aceptable para uso farmacéutico o es cualquiera de alqulo, arilo, acilo, aroilo, alquil sulfonilo, aril sulfonilo, PEG, un derivado de PEG, H o el grupo**Fórmula**

en donde independientemente en cada grupo AB, A es O o NH, y B es H, o M, en donde M es como se definió anteriormente, o un grupo alquilo, arilo o cualquier otro grupo apropiado;

R1 es alquilo, arilo, acilo, aroilo, alquil sulfonilo, aril sulfonilo, PEG o un derivado de PEG, o R1 junto con U es N3 o un triazol sustituido, o un tetrazol sustituido, o un arilo sustituido, o un heteroarilo sustituido;

con la condición de que:

al menos 50% de los grupos R sea SO3M.

Derivados de oligosacáridos sulfatados Campo técnico

La invención descrita aquí se refiere a compuestos que tienen actividad como inhibidores de proteínas fijadoras de heparan sulfato y como inhibidores de la enzima heparanasa. En particular, la invención está dirigida a derivados de oligosacáridos sulfatados. Específicamente, la invención se refiere a derivados de oligosacáridos polisulfatados, la derivación preferiblemente es en C-1 del extremo reductor y/o en C-6 de la unidad monosacárida del extremo no reductor. La invención también se refiere a composiciones que contienen los compuestos y uso de los compuestos y composiciones de ellos para el tratamiento antiangiogénico, antimetastásico, anti-inflamatorio, antimicrobiano, anticoagulante y/o antitrombótico de un sujeto mamífero. Los compuestos y composiciones de ellos también tienen utilidad para disminuir los niveles de triglicéridos en la sangre, y para inhibir la enfermedad cardiovascular en un sujeto mamífero. Las composiciones adicionalmente tienen utilidad en la prevención de los trastornos anteriores, cuando se administran a un sujeto mamífero.

El agente oligosacárido sulfatado conocido como PI-88 [1,2] (véase el compuesto 1 más adelante), ha demostrado ser un inhibidor promisorio del crecimiento tumoral y de la metástasis [1,3] y está siendo objeto de pruebas clínicas de fase II en pacientes con cáncer [4], El PI-88 ejerce efectos antiangiogénicos inhibiendo las interacciones de los factores de crecimiento angiogénico (principalmente, FGF-1, FGF-2 y VEGF) y sus receptores con heparan sulfato [1,5]. Además, el PI-88 es un inhibidor potente de la enzima heparanasa, una glicosidasa que divide las cadenas laterales de heparan sulfato de los proteoglicanos, que son un constituyente principal de la matriz extracelular (ECM) y las membranas de basamento que rodean las células tumorales [1,2], La heparanasa ha sido implicada fuertemente en la angiogénesis: es capaz de liberar factores de crecimiento angiogénico activos unidos a heparan sulfato de la ECM y está involucrada en la degradación de la ECM y en la remodelación subsiguiente del tejido asociada con el desarrollo de nuevos vasos sanguíneos [6], La degradación de la ECM mediante la heparanasa también es crucial para la diseminación de las células tumorales (metástasis), permitiéndoles pasar a la corriente sanguínea y alojarse en sitios remotos en donde pueden formar tumores secundarios [6,7].

Además de sus efectos angiogénicos, el PI-88 inhibe la cascada de coagulación sanguínea: (i) inhibiendo las proteasas en la ruta intrínseca, (ii) estimulando la liberación del inhibidor de ruta del factor del tejido (TFPI), y (iii) activando la inhibición de trombina mediada por el cofactor II de heparina. Sin embargo, el PI-88 no interactúa con la AT III y por lo tanto no muestra actividad anti-Xa o actividad anti-lla mediada por AT III [8,9]. Estudios in vivo en monos han demostrado que la dosis bajas de PI-88 estimulan la liberación de todo el TFPI unido a heparan sulfato desde la pared celular vascular [9], Aparte de su efecto en la coagulación, se mostró recientemente que el TFPI es un agente antiangiogénico [1] y un inhibidor de metástasis [11], El PI-88 también ha demostrado que bloquea la proliferación de células de músculos lisos vasculares y el engrasamiento intimal [12], para inhibir la infección de células por el virus del herpes simplex (HSV) y la diseminación de célula en célula del HSV-1 y HSV-2 [13], y para inhibir la proteinuria en la nefritis pasiva de Heymann [14].

El PI-88 es una mezcla de oligosacáridos de mannosa monofosforilados altamente sulfatados que abarcan en tamaño desde di- hasta hexasacáridos [15,16], El PI-88 se prepara mediante sulfonación exhaustiva [2,16] de la fracción fosfato del oligosacárido (2) (véase la fórmula I después de este párrafo) obtenida por hidrólisis suave, catalizada con ácido, del fosfomannano extracelular de la levadura Pichia (Hansenula) holstii NRRL Y-2448 [17,18], Los componentes principales son los fosfatos de penta- y tetrasacáridos 3 (-6%) y 4 (-3%), respectivamente, mientras que el restante 1% está constituido por fosfatos de di-, tri- y hexasacáridos (5-7) y una tetrasacarilamina (no se muestra) [15,16].

Fórmula I

OR

En este contexto, Cochran et al. (Cochran, S. et al., Probing the Interactions of Phosphosulfomannans with Angiogenic Growth Factors by Surface Plasmon Resonance, J. Med. Chem. 46, 23, págs. 461 -468) describen las interacciones de unión de PI-88 con los factores decrecimiento angiogénico FGF-1, FGF-2 y VEGF.

Se conoce bien que otros diversos oligo- y polisacáridos polisulfatados y sus derivados muestran tipos similares de actividades biológicas para PI-88 [19-25], Estas actividades biológicas se atribuyen a la inhibición de diversas proteínas fijadoras de heparan sulfato (HS). El objeto de la presente invención es crear derivados de PI-88 que tengan actividades

biológicas similares, pero con propiedades mejoradas, por ejemplo, en sus perfiles farmacocinético y/o de ADME (absorción, distribución, metabolismo, excreción). Un objeto adicional de la invención es proporcionar compuestos que contienen un solo esqueleto de carbono para facilitar su síntesis y caracterización.

De acuerdo con una primera modalidad de la invención, se proporciona un compuesto de la fórmula general:

en donde;

n es un entero que tiene un valor de a 6;

U es C, N, S o es O, o sus estados de oxidación superior, incluyendo CO, COO, NO, NO2, S(O), S();

cada R independientemente es SO3M, en donde M es cualquier catión aceptable para uso farmacéutico o es cualquiera

de alquilo, arilo, acilo, aroilo, alquil sulfonilo, aril-suIfonilo, PEG, un derivado de PEG, H o el grupo

en donde independientemente en cada grupo AB, A es O o NH, y B es H, o M, en donde M es como se definió anteriormente, o un grupo alquilo, arilo o cualquier otro grupo apropiado;

R1 es alquilo, arilo, acilo, aroilo, alquil sulfonilo, aril sulfonilo, PEG o un derivado de PEG, o R1 junto con U es N3 o un triazol sustituido, o un tetrazol sustituido, o un arilo sustituido, o un heteroarilo sustituido;

con la condición de que al menos 5% de los grupos R sean SO3M.

De acuerdo con una segunda modalidad de la invención, se proporciona una composición farmacéutica o veterinaria para la prevención o para el tratamiento en un sujeto mamífero de un trastorno resultante de angiogénesis, metástasis, inflamación, coagulación/trombosis, niveles de triglicéridos elevados en la sangre, infección microbiana y/o enfermedad cardiovascular, cuya composición contiene al menos un compuesto de acuerdo con la primera modalidad junto con un portador o diluyente aceptable para uso farmacéutico o veterinario para dicho al menos un compuesto.

Una tercera modalidad de la invención comprende el compuesto de acuerdo con la primera modalidad, para su uso en la prevención o tratamiento en un sujeto mamífero de un trastorno resultante de angiogénesis, metástasis, inflamación, coagulación/trombosis, niveles de triglicéridos elevados en la sangre, infección microbiana y/o enfermedad cardiovascular.

Con el fin de que la invención pueda ser comprendida y puesta en práctica más fácilmente, se describirá ahora una o más modalidades preferidas de ella, a manera de ejemplo solamente, con referencia a la figura anexa.

Breve descripción de la figura

La figura 1 muestra el efecto de los compuestos similares a PI-88 sobre la infectividad con HSV-1 (A) y la diseminación

de célula a célula del HSV-1 (B). En el panel A, los resultados se expresan como un porcentaje de la cantidad de unidades... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de la fórmula general

en donde:

n es un entero que tiene un valor de a 6;

U es C, N, S o es O, o sus estados de oxidación superior, incluyendo CO, COO, NO, N2, S(O), S();

cada R Independientemente es S3M o H, en donde M es cualquier catión aceptable para uso farmacéutico o es cualquiera de alqulo, arilo, acilo, aroilo, alquil sulfonilo, aril sulfonilo, PEG, un derivado de PEG, H o el grupo

AB

en donde independientemente en cada grupo AB, A es O o NH, y B es H, o M, en donde M es como se definió anteriormente, o un grupo alquilo, arilo o cualquier otro grupo apropiado;

R1 es alquilo, arilo, acilo, aroilo, alquil sulfonilo, aril sulfonilo, PEG o un derivado de PEG, o R1 junto con U es N3 o un triazol sustituido, o un tetrazol sustituido, o un arilo sustituido, o un heteroarllo sustituido;

con la condición de que:

al menos 5% de los grupos R sea S3M.

2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde M es sodio.

3. El compuesto de la reivindicación 1, en donde n es 3.

4. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es n-octilo.

5. El compuesto de la reivindicación 1, en donde de 7 a 1% de los grupos R contienen S3M.

6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicho compuesto es PG5: bencil-2,3,4,6-tetra-- sulfono-a-D-mannop¡ranos¡l-(1^3)-(2,4,6-tr¡--sulfono-a-D-mannop¡ranos¡l)-(1>3)-(2,4,6-tri--sulfono-a-D- mannop¡ranosil-(1>3)-(2,4,6-tri--sulfono-a-D-mannop¡ranos¡l)-(1^2)-3,4,6-tr¡--sulfono-a-D-mannop¡ranos¡da, sal de hexadecasodio; PG51: octil-2,3,4,6-tetra--sulfono-a-D-mannopiranosil-(1^3)-(2,4,6-tri--sulfono-a-D-mannopiranosil)- (1>3)-(2,4,6-tri--sulfono-a-D-mannop¡ranosil)-(1>3)-(2,4,6-tri--sulfono-a-D-mannopiranosil)-(1^2)-3,4,6-tri-- sulfono-a-D-mannopiranosida, sal de hexadecasodio; PG52: 2,3,4,6-tetra--sulfono-a-D-mannopiranosil-(1>3)-{2,4,6- tri--sulfono-a-D-mannopiranosil)-(1>3)-(2,4,6-tri--sulfono-a-D-mannopiranosil-(1>3)-(2,4,6-tri--sulfono-a-D-

mannop¡ranos¡l)-(1->2)-A/-(2-fenoxiacet¡l)-3,4,6-tr¡--sulfono-a-D-mannop¡ranos¡lam¡na, sal de hexadecasodio; PG53: 2,3,4,6-tetra--sulfono-a-D-mannopiranos¡l-(1>3)-(2,4,6-tr¡--sulfono-c(-D-mannop¡ranos¡l)-(1-»-3)-(2,4,6-tr¡--sulfono-a- D-mannopiranos¡l-(1>3)-(2,4,6-tr¡--sulfono-a-D-mannop¡ranos¡l)-(1>2)-A/-(6-(5-((3aS,4S,6aR)-2-oxohexahidro-1/-/- t¡eno[3,4-d]¡m¡dazol-4-¡l)pentanamido)hexanam¡da)-3,4,6-tr¡--sulfono-a-D-mannop¡ranos¡lam¡na, sal de hexadecasodio; PG54: 2,3,4,6-tetra--sulfono-a-D-mannopiranos¡l-(1>3)-(2,4,6-tr¡--sulfono-c(-D-mannop¡ranos¡l)-(1 »3)-(2,4,6-tri-O-

sulfono-a-D-mannopiranos¡l-(1>-3)-(2,4,6-tr¡--sulfono-a-D-mannop¡ranos¡l)-(1>-2)-1-(metox¡pol¡(et¡lenglicol)5ooo)-3,4,6- tri-O-sulfono-a-D-mannopiranosida, sal de hexadecasodio; o PG56: 2,3,4,6-tetra--sulfono-a-D-mannopiranos¡l-(1>3)- (2,4,6-tri--sulfono-a-D-mannop¡ranos¡l)-(1>3)-(2,4,6-tr¡--sulfono-a-D-mannop¡ranos¡l-(1>3)-(2,4,6-tr¡--sulfono-a-D- mannopiranos¡l)-(1>-2)-1-(metox¡pol¡(et¡lengl¡col)2)-3,4,6-tr¡-O-sulfono-a-D-mannop¡ranos¡da, sal de hexadecasodio.

7. Una composición para uso farmacéutico o veterinario, para la prevención o tratamiento en un sujeto mamífero, de un trastorno resultante de angiogénesis, metástasis, inflamación, coagulación/trombosis, niveles de trilicéridos elevados en sangre, infección por el virus del herpes simplex (HSV-1) y/o enfermedad cardiovascular, cuya composición contiene al menos un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6;

junto con un portador o diluyente aceptable para uso farmacéutico o veterinario para dicho al menos un compuesto.

8. La composición de acuerdo con la reivindicación 7, que incluye además un excipiente, regulador, estabilizador, agente isotonizante, conservador o antioxidante, aceptable para uso farmacéutico o veterinario.

9. La composición de acuerdo con la reivindicación 7 u 8, en donde dicho compuesto está presente en ella como un éster, un ácido o base libre o un hidrato.

1. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para su uso en la prevención o tratamiento en un sujeto mamífero, de un trastorno resultante de angiogénesis, metástasis, inflamación, coagulación/trombosis, niveles de triglicéridos elevados en la sangre, infección con HSV-1 y/o enfermedad cardiovascular.

11. El compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicho sujeto mamífero es un sujeto humano.

12. El compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicho trastorno resultante de angiogénesis es una retinopatía proliferativa o aniogénesis resultante del crecimiento de un tumor sólido.

13. El compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicho trastorno resultante de inflamación es artritis reumatoide, esclerosis múltiple, enfermedad Inflamatoria intestinal, rechazo de alolnjerto o asma crónica.

14. El compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicho trastorno resultante de coagulación y/o trombosis es trombosis venosa profunda, embolia pulmonar, derrame trombótico, trombosis arterial periférica, angina inestable o infarto al miocardio.