Uso de anticuerpos monoclonales antagonistas anti-CD40.

Un anticuerpo monoclonal anti-CD40 humano para uso en el tratamiento de un cáncer caracterizado por laexpresión de CD40,

donde dicho anticuerpo monoclonal anti-CD40 humano es seleccionado entre el grupoconsistente en:

a) un anticuerpo monoclonal que se une a un epitopo capaz de unirse al anticuerpo monoclonal CHIR-5.9,que se puede obtener de la línea de células de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de PatenteNº PTA-5542, o al anticuerpo monoclonal CHIR-12.12, que se puede obtener de la línea de células dehibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543;

b) un anticuerpo monoclonal que se une a un epitopo que comprende los residuos 82-87 de la secuencia delCD40 humano mostrada en la SEC. Nº ID.: 10 o en la SEC. Nº ID.: 12;

c) un anticuerpo monoclonal que se une a un epitopo que comprende los residuos 82-89 de la secuencia delCD40 humano mostrada en la SEC. Nº ID.: 10 o en la SEC. Nº ID.: 12; y

d) un anticuerpo monoclonal que compite con el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9, que puede ser obtenido dela línea de células de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542, o con elanticuerpo monoclonal CHIR-12.12, que puede ser obtenido de la línea de células de hibridoma depositadaen la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543, en un ensayo de unión competitiva,

donde dicho anticuerpo es administrado en combinación con uno o más de otros agentes terapéuticos.

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La invención se relaciona con anticuerpos humanos capaces de unirse a CD40, con métodos de utilización de los anticuerpos y con métodos para el tratamiento de enfermedades mediadas por la estimulación de la señalización de CD40 en células que expresan CD40.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Las células B juegan un importante papel durante la respuesta inmune normal in vivo. Un antígeno extraño se unirá a las inmunoglobulinas superficiales sobre células B específicas, para desencadenar una serie de sucesos, incluyendo endocitosis, procesamiento, presentación de péptidos procesados sobre moléculas de la clase II del MHC y regulación a más del antígeno B7 sobre la superficie de las células B. Se une entonces una célula T específica a la célula B por reconocimiento por parte del receptor de las células T (RCT) del antígeno procesado presentado sobre la molécula de la clase II del MHC. La estimulación a través del RCT activa la célula T e inicia la producción de citoquinas por las células T. Una segunda señal que activa además la célula T es una interacción entre el antígeno CD28 sobre las células T y el antígeno B7 sobre las células B. Cuando se reciben las señales antes mencionadas, el ligando CD40 (CD40L o CD154) , que no se expresa en células T humanas en reposo, es regulado a más sobre la superficie de las células T. La unión del ligando CD40 al antígeno CD40 sobre la superficie de las células B estimula la célula B, haciendo que la célula B madure hacia una célula plasmática, que segrega elevados niveles de inmunoglobulina soluble.

CD40 es un antígeno de la superficie celular de 55 kDa que está presente sobre la superficie de las células B humanas tanto normales como neoplásicas, de las células dendríticas, de las células presentadoras de antígeno (CPA) , de las células endoteliales y de las células monocíticas y epiteliales. Las células transformadas de pacientes con linfomas de células B de bajo y alto grado, leucemia linfoblástica aguda de células B, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica y enfermedad de Hodgkin expresan CD40. También se detecta la expresión de CD40 en dos tercios de los casos de leucemia mieloblástica aguda y en un 50% de los linfomas relacionados con el SIDA. Las células B malignas de diversos tumores del linaje de las células B expresan un alto grado de CD40 y parecen depender de la señalización de CD40 para su supervivencia y proliferación.

Los linfomas inmunoblásticos de células B surgen frecuentemente en individuos inmunocomprometidos, tales como receptores de aloinjertos y otros que reciben terapia inmunosupresora a largo plazo, pacientes de SIDA y pacientes con síndromes de inmunodeficiencia primaria, tales como el síndrome linfoproliferativo ligado a X o el síndrome de Wiscott-Aldrich (Thomas et al. (1991) , Adv. Cancer Res. 57: 329; Straus et al. (1993) , Ann. Intern. Med.

118: 45) .

El antígeno CD40 está relacionado con el receptor del factor de crecimiento de los nervios (NGF) humano, el factor de necrosis tumoral α (TNF-α) y Fas, lo que sugiere que CD40 es un receptor de un ligando con funciones importantes en la activación de las células B. La expresión de CD40 sobre las CPA tiene un importante papel coestimulante en la activación de los linfocitos tanto T-helper como T citotóxicos. El receptor CD40 se expresa sobre células T activadas, plaquetas activadas y células del músculo liso vascular inflamado. Los receptores CD40 pueden encontrarse también sobre eosinófilos, membranas sinoviales en la artritis reumatoide, fibroblastos dérmicos y otros tipos celulares no linfoides. La unión de CD40L al receptor CD40 estimula la proliferación y diferenciación de las células B, la producción de anticuerpos, el cambio de isotipos y la generación de memoria de las células B.

WO 01/83755 y WO 02/28904 describen anticuerpos capaces de unirse a CD40, métodos de producción de estos anticuerpos y métodos para su utilización.

Ellmark et al. (Immunology 2002, 106, 456-463) describen la modulación de la interacción CD40-ligando CD40 usando fragmentos de anticuerpos de una sola cadena anti-CD40 humanos.

BREVE RESUMEN DE LA INVENCIÓN

Un anticuerpo monoclonal anti-CD40 humano para uso en el tratamiento de un cáncer caracterizado por la expresión de CD40, donde dicho anticuerpo monoclonal anti-CD40 humano es seleccionado entre el grupo consistente en:

a) un anticuerpo monoclonal que se une a un epitopo capaz de unirse al anticuerpo monoclonal CHIR-5.9, que puede ser obtenido de la línea de células de hibridoma depositada en la ATCC como Nº de Depósito de Patente PTA-5542, o al anticuerpo monoclonal CHIR-12.12, que puede ser obtenido de la línea de células de hibridoma depositada en la ATCC como Nº de Depósito de Patente PTA-5543; b) un anticuerpo monoclonal que se une a un epitopo que comprende los residuos 82-87 de la secuencia del CD40 humano mostrada en la SEC. Nº ID.: 10 o en la SEC. Nº ID.: 12; c) un anticuerpo monoclonal que se une a un epitopo que comprende los residuos 82-89 de la secuencia del CD40 humano mostrada en la SEC. Nº ID.: 10 o en la SEC. Nº ID.: 12; y d) un anticuerpo monoclonal que compite con el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9, que puede ser obtenido de la línea de células de hibridoma depositada en la ATCC como Nº de Depósito de Patente PTA-5542, o con el anticuerpo monoclonal CHIR-12.12, que puede ser obtenido de la línea de células de hibridoma depositada en la ATCC como Nº de Depósito de Patente PTA-5543, en un ensayo de unión competitiva,

donde dicho anticuerpo es administrado en combinación con uno o más de otros agentes terapéuticos.

BREVE RESUMEN DE LA DESCRIPCIÓN

Se describen composiciones y métodos para el tratamiento de enfermedades mediadas por la estimulación de la señalización de CD40 en células que expresan CD40, incluyendo linfomas, enfermedades autoinmunes y rechazos de trasplantes. Las composiciones incluyen anticuerpos monoclonales capaces de unirse a un antígeno CD40 humano localizado sobre la superficie de una célula que expresa el CD40 humano, donde la unión evita el crecimiento o la diferenciación de la célula. Las composiciones también incluyen anticuerpos monoclonales capaces de unirse específicamente a un antígeno CD40 humano expresado en la superficie de una célula que expresa el CD40 humano, estando dicho anticuerpo monoclonal libre de actividad agonista significativa, donde la administración de dicho anticuerpo monoclonal da lugar a un volumen significativamente menor del tumor en comparación con una concentración similar del anticuerpo monoclonal anti-CD20 quimérico IDEC-C2B8 en un modelo tumoral de xenoinjerto en ratón desnudo estadificado utilizando la línea celular de linfoma de células B humana Daudi. Las composiciones también incluyen fragmentos de unión a antígeno de estos anticuerpos monoclonales, líneas celulares de hibridoma que producen estos anticuerpos y moléculas de ácido nucleico aisladas codificantes de las secuencias de aminoácidos de estos anticuerpos monoclonales. También se describen aquí composiciones farmacéuticas que incluyen estos anticuerpos anti-CD40 en un soporte farmacéuticamente aceptable.

Se describen métodos para prevenir o tratar una enfermedad mediada por la estimulación de la señalización de CD40, consistentes en tratar al paciente con un anticuerpo anti-CD40 o un fragmento de unión a antígeno del mismo que está libre de actividad agonista significativa cuando se une a un antígeno CD40 sobre una célula que expresa CD40 humano. Como enfermedades mediadas por la estimulación de células que expresan CD40, se incluyen enfermedades autoinmunes, cánceres y rechazos de injertos de órganos y tejidos. Como linfomas que se pueden tratar o prevenir mediante un método como aquí se describe, se incluyen los linfomas no Hodgkin (linfomas de alto grado, linfomas de grado intermedio y linfomas de bajo grado) , la enfermedad de Hodgkin, las leucemias linfoblásticas agudas, los mielomas, las leucemias linfocíticas crónicas y las leucemias mieloblásticas.

Como enfermedades autoinmunes particulares contempladas para el tratamiento empleando los métodos aquí descritos, se incluyen el lupus eritematoso sistémico (LES) , la artritis reumatoide, la enfermedad de Crohn, la psoriasis, la púrpura trombocitopénica autoinmune, la esclerosis múltiple, la espondilitis anquilosante, la miastenia gravis y el pénfigo vulgar. Dichos anticuerpos podrían ser también utilizados para prevenir el rechazo de injertos de órganos y tejidos por supresión de las respuestas autoinmunes, para tratar linfomas privando a los linfocitos B malignos de la señal activadora proporcionada por... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo monoclonal anti-CD40 humano para uso en el tratamiento de un cáncer caracterizado por la expresión de CD40, donde dicho anticuerpo monoclonal anti-CD40 humano es seleccionado entre el grupo consistente en:

a) un anticuerpo monoclonal que se une a un epitopo capaz de unirse al anticuerpo monoclonal CHIR-5.9, que se puede obtener de la línea de células de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542, o al anticuerpo monoclonal CHIR-12.12, que se puede obtener de la línea de células de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543; b) un anticuerpo monoclonal que se une a un epitopo que comprende los residuo.

8. 87 de la secuencia del CD40 humano mostrada en la SEC. Nº ID.: 10 o en la SEC. Nº ID.: 12; c) un anticuerpo monoclonal que se une a un epitopo que comprende los residuo.

8. 89 de la secuencia del CD40 humano mostrada en la SEC. Nº ID.: 10 o en la SEC. Nº ID.: 12; y d) un anticuerpo monoclonal que compite con el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9, que puede ser obtenido de la línea de células de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542, o con el anticuerpo monoclonal CHIR-12.12, que puede ser obtenido de la línea de células de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543, en un ensayo de unión competitiva,

donde dicho anticuerpo es administrado en combinación con uno o más de otros agentes terapéuticos.

2. El anticuerpo para uso según la reivindicación 1, donde dicho anticuerpo es el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9, que puede ser obtenido de la línea de células de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542, o el anticuerpo monoclonal CHIR-12.12, que puede ser obtenido de la línea de células de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543.

3. El anticuerpo para uso según la reivindicación 1, donde dicho anticuerpo incluye:

(i) los residuos de la región determinante de complementariedad (RDC) de la SEC. Nº ID.: 2 y los residuos de la región determinante de complementariedad (RDC) de la SEC. Nº ID.: 4; o

(ii) los residuos de la región determinante de complementariedad (RDC) de la SEC. Nº ID.: 6 y los residuos de la región determinante de complementariedad (RDC) de la SEC. Nº ID.: 7.

4. El anticuerpo para uso según la reivindicación 1, donde dicho anticuerpo comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo consistente en:

(i) residuo.

2. 132 de la SEC. Nº ID.: 2;

(ii) residuo.

2. 239 de la SEC. Nº ID.: 2;

(iii) SEC. Nº ID.: 2;

(iv) residuo.

2. 139 de la SEC. Nº ID.: 4;

(v) residuo.

2. 469 de la SEC. Nº ID.: 4;

(vi) SEC. Nº ID.: 4;

(vii) residuo.

2. 469 de la SEC. Nº ID.: 5;

(viii) SEC. Nº ID.: 5;

(ix) residuo.

2. 132 de la SEC. Nº ID.: 2 y residuo.

2. 139 de la SEC. Nº ID.: 4;

(x) residuo.

2. 239 de la SEC. Nº ID.: 2 y residuo.

2. 469 de la SEC. Nº ID.: 4;

(xi) residuo.

2. 239 de la SEC. Nº ID.: 2 y residuo.

2. 469 de la SEC. Nº ID.: 5;

(xii) SEC. Nº ID.: 2 y SEC. Nº ID.: 4; y

(xiii) SEC. Nº ID.: 2 y SEC. Nº ID.: 5.

5. El anticuerpo para uso según la reivindicación 1, donde dicho anticuerpo comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada entre el grupo consistente en:

(i) residuo.

2. 132 de la SEC. Nº ID.: 6;

(ii) residuo.

2. 239 de la SEC. Nº ID.: 6;

(iii) SEC. Nº ID.: 6;

(iv) residuo.

2. 144 de la SEC. Nº ID.: 7;

(v) residuo.

2. 474 de la SEC. Nº ID.: 7;

(vi) SEC. Nº ID.: 7;

(vii) residuo.

2. 474 de la SEC. Nº ID.: 8;

(viii) SEC. Nº ID.: 8;

(ix) residuo.

2. 132 de la SEC. Nº ID.: 6 y residuo.

2. 144 de la SEC. Nº ID.: 7;

(x) residuo.

2. 239 de la SEC. Nº ID.: 6 y residuo.

2. 474 de la SEC. Nº ID.: 7;

(xi) residuo.

2. 239 de la SEC. Nº ID.: 6 y residuo.

2. 474 de la SEC. Nº ID.: 8

(xii) SEC. Nº ID.: 6 y SEC. Nº ID.: 7; y

(xiii) SEC. Nº ID.: 6 y SEC. Nº ID.: 8.

6. El anticuerpo para uso según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde dicho anticuerpo se une al CD40 humano con una afinidad (KD) de al menos aproximadamente 10-6 M o al menos 10-8 M.

7. El anticuerpo para uso según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde dicho anticuerpo es un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo monoclonal, donde dicho fragmento conserva la capacidad de unirse específicamente al antígeno CD40 humano.

8. El anticuerpo para uso según la reivindicación 7, donde dicho fragmento es seleccionado entre el grupo consistente en un fragmento Fab, un fragmento F (ab’) 2, un fragmento Fv y un fragmento Fv de una sola cadena.

9. El anticuerpo para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3-8, donde dicho anticuerpo es producido en una línea de células CHO.

10. El anticuerpo para uso según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde dicho anticuerpo es administrado en combinación con al menos otra terapia contra el cáncer.

11. El anticuerpo para uso según la reivindicación 10, donde la otra terapia contra el cáncer es administrada antes, durante o después de la terapia con el anticuerpo antagonista anti-CD40.