Composiciones inmunogénicas que contienen fosfolípidos.

Una composición inmunogénica que comprende: (a) agua; (b) un aceite metabolizable;

(c) un agente emulsionante; (d) un antígeno; y (e) un compuesto fosfolípido que tiene la fórmula siguiente:**Fórmula**

en la que:

R1 está seleccionado del grupo que consiste en

(a) C(O);

(b) C(O)-alquilo C1-14-C(O), en el que el alquilo C1-14 está opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi C1-5, alquilendioxi C1-5, alquilamino C1-5, o alquilo C1-40 5-arilo en el que el resto arilo del alquilo C1-5-arilo está opcionalmente sustituido con alcoxi C1-5, alquilamino C1-5, alcoxi C1-5-amino, alquilamino C1-5-alcoxi C1-5, -Oalquilamino C1-5, alcoxi C1-5, -O-alquilamino C1-5-C(O)-alquilo C1-5 C(O)OH, -O-alquilamino C1-5-C(O)-alquilo C1- 5-C(O)alquilo C1-5;

(c) alquilo de C2 a C15 de cadena lineal o ramificada sustituida opcionalmente con hidroxi o alcoxi; y

(d) -C(O)-arileno C6-12-C(O)-, en el que el arileno está opcionalmente sustituido con hidroxi, halógeno, nitro o amino;

a y b son, de forma independiente, 0, 1, 2, 3 o 4;

d, d', d", e, e' y e" son, de forma independiente, un número entero de 1 a 4;

X1, X2, Y1 e Y2 están seleccionados, de forma independiente, del grupo que consiste en cero, oxígeno, NH y N(C(O)alquilo C1-4) y N(alquilo C1-4)2 ;

W1 y W2 está seleccionados, de forma independiente, del grupo que consiste en carbonilo, metileno, sulfona y sulfóxido;

R2 y R5 están seleccionados, de forma independiente, del grupo que consiste en:

(a) alquilo de C2 a C20 de cadena lineal o de cadena ramificada que está sustituido opcionalmente con oxo, hidroxi o alcoxi,

(b) alquenilo o dialquenilo de C2 a C20 de cadena lineal o de cadena ramificada que está sustituido opcionalmente con oxo, hidroxi o alcoxi,

(c) alcoxi de C2 a C20 de cadena lineal o de cadena ramificada que está sustituido opcionalmente con oxo, hidroxi o alcoxi;

(d) -NH-alquilo de C2 a C20 de cadena lineal o de cadena ramificada, en el que el grupo alquilo está sustituido opcionalmente con oxo, hidroxi o alcoxi; y**Fórmula**

en la que Z está seleccionado del grupo que consiste en O y NH, y M y N están seleccionados de forma independiente del grupo que consiste de alquilo, alquenilo, alcoxi, aciloxi, alquilamino y acilamino de C2 y C20 de cadena lineal o de cadena ramificada;

R3 y R6 están seleccionados de forma independiente del grupo que consiste en alquilo o alquenilo de C2 a C20 de cadena lineal o de cadena ramificada, sustituido opcionalmente con flúor u oxo;

R4 y R7 está seleccionados de forma independiente del grupo que consiste en C(O) alquilo o alquenilo de C2 a C20 de cadena lineal o ramificada; alquilo de C2 a C20 de cadena lineal o ramificada; alcoxi de C2 a C20 de cadena lineal o ramificad; alquenilo de C2 a C20 de cadena lineal o ramificada; en los que los grupos alquilo, alquenilo o alcoxi están sustituidos independiente u opcionalmente con hidroxi, flúor o alcoxi de C1 a C5;

G1, G2, G3 y G4 está seleccionados de forma independiente del grupo que consiste en oxígeno, metileno, amino, tiol, NHC(O)- y -N(C(O)alquilo C1-4)-; o G2 R4 o G4 R7 pueden juntos se un átomo de hidrógeno o hidroxilo;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

en la que la composición es una emulsión de aceite en agua que tiene fases oleosas y acuosas, y

en donde la fase oleosas está en la forma de gotitas de aceite, que son menores de 1 micra de diámetro.

Composiciones inmunogénicas que contienen fosfolípidos Campo de la invención

La presente invención se refiere, en general, a composiciones farmacéuticas. En concreto, la invención se refiere a composiciones inmunogénicas que comprenden fosfolípidos como adyuvantes.

Antecedentes

La aparición de vacunas por subunidades creadas mediante tecnología de ADN recombinante ha intensificado la necesidad de composiciones que contienen adyuvantes seguras y eficaces. Las vacunas de subunidades, aunque ofrecen ventajas significativas sobre las vacunas tradicionales con microorganismos vivos y muertos en términos de seguridad y costes de producción, en general presentan al sistema inmunológico polipéptidos aislados o mezclas de polipéptidos aislados, que tienen una inmunogenicidad limitada en comparación con, por ejemplo, virus enteros, bacterias y etc. Como resultado, estas vacunas en general se benefician de los adyuvantes con capacidades inmunoestimuladoras significativas, que les ayudan a alcanzar su potencial completo en el tratamiento de la enfermedad.

Por otro lado, las vacunas tradicionales con organismos vivos no suelen requerir adyuvantes. Además, las vacunas con microorganismos muertos son, en general, más inmunogénicas que las vacunas de subunidades y normalmente no requieren adyuvantes. No obstante, estas vacunas, como las vacunas de subunidades, pueden también beneficiarse de adyuvantes que tienen capacidades inmunoestimuladoras significativas.

La US2002/025329, la US6451325 y Ott. y otros., Pharm. Biotechnol., 1995, 6:277-96 describen composiciones inmunogénicas en la forma de emulsiones de aceite en agua submicrónicas que comprenden un antígeno y un fosfolípido.

Sumario de la invención

La presente invención se refiere a composiciones inmunogénicas que comprenden adyuvantes que tienen capacidades inmunoestimuladoras significativas y, en concreto, composiciones que comprenden adyuvantes fosfolípidos.

De acuerdo con un primer aspecto de la invención se proporciona una composición inmunogénica que comprende: (a) agua; (b) un aceite metabolizable; (c) un agente emulsionante; (d) un antígeno y (e) un compuesto fosfolípido que tiene la fórmula siguiente:

en la que:

R1 está seleccionado del grupo que consiste en

(a) C(0);

(b) C(0)-alquilo Ci_i4-C(0), en el que el alquilo C-m4 está opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi Ci.5l alquilendioxi Ci_5l alquilamino Ci_5, o alquilo Ci-s-arilo en el que el resto arilo del alquilo Ci_5-arilo está opcionalmente sustituido con alcoxi Ci_5) alquilamino Ci_5l alcoxi Ci-s-amino, alquilamino Ci_5-alcoxi Ci_5, -O- alquilamino C1-5, alcoxi C1-5, -O-alquilamino Ci-5-C(0)-alquilo C1-5 C(0)OH, -O-alquilamino Ci-5-C(0)-alquilo C1.

5.C(0)alquilo Ci_5¡

(c) alquilo de C2 a C15 de cadena lineal o ramificada sustituida opcionalmente con hidroxi o alcoxi; y

(d) -C(0)-arileno C6-12-C(0)-, en el que el arileno está opcionalmente sustituido con hidroxi, halógeno, nitro o

amino;

a y b son, de forma independiente, 0, 1, 2, 3 o 4;

d, d, d", e, e y e" son, de forma independiente, un número entero de 1 a 4;

X1, X2, Y1 e Y2 se seleccionan, de forma independiente, del grupo que consiste en cero, oxígeno, NH y N(C(0)alquilo C1.4) y N(alquilo Ci_4)2;

W1 y W2 están seleccionados, de forma independiente, del grupo que consiste en carbonilo, metileno, sulfona y sulfóxido;

R2 y R5 están seleccionados, de forma independiente, del grupo que consiste en:

(a) alquilo de C2 a C2o de cadena lineal o de cadena ramificada que está sustituida opcionalmente con oxo, hidroxi o alcoxi,

(b) alquenilo o dialquenilo de C2 a C20 de cadena lineal o de cadena ramificada que está sustituida opcionalmente con oxo, hidroxi o alcoxi,

(c) alcoxi de C2 a C2o de cadena lineal o de cadena ramificada que está sustituida opcionalmente con oxo, hidroxi o alcoxi;

(d) -NH-alquilo de C2 a C20 de cadena lineal o de cadena ramificada en el que el grupo alquilo está sustituido opcionalmente con oxo, hidroxi o alcoxi; y

en el que Z está seleccionado del grupo que consiste en O y NH, y M y N se seleccionan de forma independiente del grupo que consiste de alquilo, alquenilo, alcoxi, aciloxi, alquilamino y adlamino de C2 y C20 de cadena lineal o de cadena ramificada;

R3 y R6 están seleccionados de forma independiente del grupo que consiste en alquilo o alquenilo de C2 a C20 de cadena lineal o de cadena ramificada, sustituido opcionalmente con flúor u oxo;

R4 y R7 están seleccionados de forma independiente del grupo que consiste en C(O) alquilo o alquenilo de C2 a C20 de cadena lineal o ramificada; alquilo de C2 a C20 de cadena lineal o ramificada; alcoxi de C2 a C20 de cadena lineal o ramificad; alquenilo de C2 a C20 de cadena lineal o ramificada; en los que los grupos alquilo, alquenilo o alcoxi están sustituidos independiente u opcionalmente con hidroxi, flúor o alcoxi de C1 a C5;

G1, G2, G3 y G4 se seleccionan de forma independiente del grupo que consiste en oxígeno, metileno, amino, tiol, NHC(O)- y -N(C(0)alquilo Ci_4)-; o G2 R4 o G4 R7 pueden juntos se un átomo de hidrógeno o hidroxilo; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

en donde la composición es una emulsión de aceite en agua que tiene fases oleosa y acuosa, y

en donde la fase oleosa está en la forma de gotitas de aceite, de las cuales al menos el 80% en número son

menores de 1 miera de diámetro.

La invención también proporciona una composición inmunogénica para usar en un procedimiento para liberar una cantidad terapéutica de un antígeno a un animal huésped vertebrado.

La invención también proporciona una composición inmunogénica para usar en un procedimiento de tratar a un animal huésped que tiene una infección por organismos patógenos o un tumor.

La invención también proporciona una composición inmunogénica para usar en un procedimiento de inmunizar a un animal huésped contra un tumor o una infección por un organismo patógeno.

La invención también proporciona una composición inmunogénica para usar en un procedimiento de estimular una respuesta inmunitaria en un animal huésped.

La invención también proporciona una composición inmunogénica para uso en terapia.

La invención también proporciona el uso de una composición inmunogénica en la fabricación de un

medicamento para: liberar una cantidad terapéutica de un antígeno a un animal huésped vertebrado; tratar a un animal huésped que tiene una infección por un organismo patógeno o tumor; inmunizar a un animal huésped contra un tumor o infección por un organismo patógeno; o estimular una respuesta inmunitaria en un animal huésped.

El antigeno, la molécula fosfolípida y los varios componentes suplementarios pueden ser independientemente, por ejemplo: disueltos o dispersados dentro de las fases oleosas de la emulsión (incluyendo poblaciones separadas de gotitas de aceite), disueltos o dispersados dentro de la fase acuosa de la emulsión y// dispuestos en las interfaces entre las fases acuosa y oleosa de la emulsión.

El aceite metabolizable se selecciona típicamente de aceites animales (incluyendo aceites de pescado) y aceites vegetales, más típicamente un hidrocarburo insaturado de 20-40 carbonos, más típicamente un hidrocarburo poliinsaturado, ramificado que tiene de 20-40 átomos de carbono, por ejemplo terpenoides como el escualeno.

El agente emulsionante comprende típicamente al menos un tensioactivo no iónico, más típicamente ásteres de ácidos grasos y/o ásteres de ácidos grasos que comprenden un resto de polioxietileno, por ejemplo, derivados de sorbitán como monoésteres de ácidos grasos de sorbitán, sesquiésteres de ácidos grasos de sorbitán, triésteres de ácidos grasos de sorbitán, monoésteres de ácidos grasos de sorbitán de polioxietileno y triésteres de ácidos de grasos de sorbitán de polioxietileno. En un ejemplo más específico, el agente emulsionante comprende monooleato de sorbitán de polioxietileno y trioleato de sorbitán. Cuando el agente emulsionante comprende dos o más tensioactivos, un tensioactivo puede tener, por ejemplo, un valor de HLB que varía de 1 a 9, mientras que el otro tensioactivo puede tener un valor de HLB que varía de 10 a 20.

Los componentes suplementarios se pueden incluir dentro de las diversas composiciones de la presente invención, incluidos productos farmacéuticos, hormonas, enzimas, mediadores de la transcripción o la traducción, intermedios de las vías metabólicas, inmunomoduladores, adyuvantes inmunológicas adicionales y combinaciones de los mismos.

Los antígenos pueden... [Seguir leyendo]

1. Una composición inmunogénica que comprende: (a) agua; (b) un aceite metabolizable; (c) un agente emulsionante; (d) un antígeno; y (e) un compuesto fosfolípido que tiene la fórmula siguiente:

en la que:

R1 está seleccionado del grupo que consiste en

(a) C(O);

(b) C(0)-alquilo Ci_i4-C(0), en el que el alquilo C1-14 está opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi C1-5, alquilendioxi C1-5, alquilamino C1.5, o alquilo Ci-5-arilo en el que el resto arilo del alquilo Ci_5-arilo está opcionalmente sustituido con alcoxi C1-5, alquilamino C1-5, alcoxi Ci-5-amino, alquilamino Ci-5-alcox¡ C1-5, -O- alquilamino C1-5, alcoxi C1-5, -O-alquilamino Ci-5-C(0)-alquilo Ci-5C(0)OH, -O-alquilamino Ci-5-C(0)-alquilo C1. 5-C(0)alquilo C1-5;

(c) alquilo de C2 a Cisde cadena lineal o ramificada sustituida opcionalmente con hidroxi o alcoxi; y

(d) -C(0)-arileno C^12-C(0)-, en el que el arileno está opcionalmente sustituido con hidroxi, halógeno, nitro o amino;

a y b son, de forma independiente, 0, 1,2, 3 o 4;

d, d, d", e, e y e" son, de forma independiente, un número entero de 1 a 4;

X1, X2, Y1 e Y2 están seleccionados, de forma independiente, del grupo que consiste en cero, oxígeno, NH y N(C(0)alquilo C1-4) y N(alquilo 01-4)2;

W1 y W2 está seleccionados, de forma independiente, del grupo que consiste en carbonilo, metileno, sulfona y sulfóxido;

R2 y R5 están seleccionados, de forma independiente, del grupo que consiste en:

(a) alquilo de C2 a C20 de cadena lineal o de cadena ramificada que está sustituido opcionalmente con oxo, hidroxi o alcoxi,

(b) alquenilo o dialquenilo de C2 a C20 de cadena lineal o de cadena ramificada que está sustituido opcionalmente con oxo, hidroxi o alcoxi,

(c) alcoxi de C2 a C20 de cadena lineal o de cadena ramificada que está sustituido opcionalmente con oxo, hidroxi o alcoxi;

(d) -NH-alquilo de C2 a C2ode cadena lineal o de cadena ramificada, en el que el grupo alquilo está sustituido opcionalmente con oxo, hidroxi o alcoxi; y

en la que Z está seleccionado del grupo que consiste en O y NH, y M y N están seleccionados de forma Independiente del grupo que consiste de alquilo, alquenilo, alcoxi, aclloxl, alqullamino y acilamino de C2 y C2o de cadena lineal o de cadena ramificada;

R3 y R6 están seleccionados de forma independiente del grupo que consiste en alquilo o alquenilo de C2 a C20 de cadena lineal o de cadena ramificada, sustituido opcionalmente con flúor u oxo;

R4 y R7 está seleccionados de forma independiente del grupo que consiste en C(O) alquilo o alquenilo de C2 a C20 de cadena lineal o ramificada; alquilo de C2 a C20 de cadena lineal o ramificada; alcoxi de C2 a C20 de cadena lineal o ramificad; alquenilo de C2 a C20 de cadena lineal o ramificada; en los que los grupos alquilo, alquenilo o alcoxi están sustituidos independiente u opcionalmente con hidroxi, flúor o alcoxi de Ci a C5;

G1, G2, G3 y G4 está seleccionados de forma independiente del grupo que consiste en oxígeno, metileno, amino, tiol, NHC(O)- y -N(C(0)alquilo C1-4)-; o G2 R4 o G4 R7 pueden juntos se un átomo de hidrógeno o hidroxilo; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

en la que la composición es una emulsión de aceite en agua que tiene fases oleosas y acuosas, y en donde la fase oleosas está en la forma de gotitas de aceite, que son menores de 1 miera de diámetro.

2. La composición inmunogénica de la reivindicación 1, en la que:

i) R1 es C(O); a, b, d, d, d", e, e y e" son, de forma independiente, 1 o 2; X1, X2, Y1 e Y2 son NH; W1 y W2 son carbonilo; R2 y R5 son alquilo de C10 a C2o de cadena lineal que está sustituido con oxo; R3 y R6 son alquilo de C5- C10 de cadena lineal; R^ y R7 son C(0)alquilo o alquinilo de Cs-C-m de cadena lineal; y G1, G2, G3 y G4 son oxígeno; o

ii) R1 es C(O); a y b son 2, d, d y e son 1; , d" y e" son, 2; X1, X2, Y1 e Y2 son NH; W1 y W2 son carbonilo; R2 y R5 son alquilo de C13 a C20 de cadena lineal que está sustituido con oxo en la posición 2; R3 y R6 son alquilo de C7 de cadena lineal; R4 y R7 son C(0)alquilo de Cu de cadena lineal; y G1, G2, G3 y G4 son oxígeno.

3. La composición inmunogénica de cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2, en la que al menos el 80% en número de las gotitas de aceite son:

i) menores de 500 nm de diámetro;

ii) menores de 250 nm de diámetro

4. La composición inmunogénica de cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en la que el aceite metabolizable se selecciona de un aceite animal y un aceite vegetal, como:

i) aceite de pescado;

ii) un hidrocarburo poliinsaturado ramificado que tiene de 20-40 átomos de carbono;

iii) un terpenoide;

iv) escualeno

5. La composición inmunogénica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en la que el agente emulsionante comprende un derivado de sorbitán, como monoésteres de ácidos grasos de sorbitán, sesquiésteres de ácidos grasos de sorbitán, triésteres de ácidos grasos de sorbitán, monoésteres de ácidos grasos de sorbitán de polioxietileno y triésteres de ácidos de grasos de sorbitán de polioxietileno.

6. La composición inmunogénica de cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en la que el fosfolípido se disuelve o dispersa en la:

iii) fase oleosa; o

iv) la fase acuosa.

7. La composición inmunogénica de cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en la que el antígeno se disuelve o dispersa en la fase acuosa.

8. La composición inmunogénica de cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en la que el antígeno es:

i) un antígeno que contiene polipéptido;

ii) un antígeno que contiene polinucleótido; o

iii) está derivado de una célula tumoral.

9. La composición ¡nmunogénica de cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en la que el antígeno está derivado de un organismo patógeno, como un virus, una bacteria, un hongo y un parásito.

10. La composición ¡nmunogénica de la reivindicación 9, en la que el organismo patógeno se selecciona de:

i) VIH, virus de la hepatitis B, virus de la hepatitis C, virus de la meningitis B, Haemophilus influenza de tipo B, pertussis, difteria, tétanos y virus de la gripe A; o

ii) virus de inmunodeficiencia humana, Neisseria meningitidis, y virus de hepatitis.

11. La composición ¡nmunogénica de cualquiera de las reivindicaciones 1-10, que además comprende un adyuvante inmunológico suplementario.

12. La composición ¡nmunogénica de cualquiera de las reivindicaciones 1-11, en la que la composición ¡nmunogénica es una composición inyectable.

13. La composición ¡nmunogénica de cualquiera de las reivindicaciones 1-12 para su uso en terapia.

14. La composición ¡nmunogénica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-12, para su uso en:

i) un procedimiento para administrar una cantidad terapéutica de un antígeno a un animal huésped vertebrado;

ii) un procedimiento de tratar a un animal huésped que tiene una infección por organismos patógenos o un tumor; ¡ii) un procedimiento de inmunización de un animal huésped frente a una infección por un organismo patógeno o un tumor; o

iv) un procedimiento de estimular una respuesta inmunitaria en un animal huésped

15. La composición de la reivindicación 14, cualquiera de las partes ¡i-iv), en la que el animal huésped es:

i) un animal vertebrado;

ii) un mamífero; o ¡ii) un humano.