Tratamiento del cáncer con polipéptidos inmunoestimuladores derivados de Tat del VIH.

Una composición farmacéutica que comprende una secuencia de aminoácidos modificada de la proteínatransactivadora de la transcripción (Tat) del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH),

teniendo dichasecuencia de aminoácidos modificada una identidad de secuencia mayor del 95% con una secuencia deaminoácidos seleccionada del grupo constituido por las SEC ID Nº 2, SEC ID Nº 3 y SEC ID Nº 4.

Tratamiento del cáncer con polipéptidos inmunoestimuladores derivados de Tat del VIH

Referencia a solicitudes de patente relacionadas Campo de la invención La presente invención se refiere al campo de los agentes terapéuticos inmunitarios para el cáncer.

Antecedentes de la invención El transactivador de la transcripción (Tat) del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) es un péptido de unión a ARN variable de 86 a 110 aminoácidos de longitud que está codificado en dos exones diferentes del genoma del VIH. El Tat está muy conservado entre todos los lentivirus humanos y es esencial para la replicación vírica. Cuando el Tat del lentivirus se une a la región TAR (respondedora a la transactivación) del ARN, los niveles de transcripción (conversión del ARN vírico en ADN y después a ARN mensajero) aumentan significativamente. Se ha demostrado que el Tat aumenta la transcripción del ARN vírico y se ha propuesto que el Tat puede iniciar la apoptosis (muerte celular programada) en los linfocitos T4 y los macrófagos (una parte clave del sistema de vigilancia inmunitario del organismo para la infección del VIH) y posiblemente estimula la sobreproducción de alfa-interferón (el α-interferón es una citocina inmunosupresora bien establecida) .

La presencia de Tat extracelular en la evolución de la infección por VIH podría reducir la respuesta inmunitaria del paciente, lo que proporciona al virus una ventaja sobre el huésped. Además, la destrucción directa de los linfocitos T y la inducción de la producción de α-interferón podría ayudar a explicar la falta de una respuesta inmunitaria celular sólida que se ve en los pacientes de síndrome de deficiencia adquirida (SIDA) , además de ser la responsable de la profunda inmunosupresión inicial.

No obstante, la proteína Tat aislada de pacientes infectados por VIH que no progresan durante un tiempo prolongado (LTNP) es diferente del C-Tat hallado en los pacientes con SIDA. La proteína Tat hallada en LTNP pude transactivar el ARN vírico, no obstante, el Tat de LNTP (en lo sucesivo en el presente documento denominado IS-Tat para Tat inmunomodulador) no inducir apoptosis en linfocitos T4 o macrófagos y no es inmunosupresor. Además, los linfocitos T4 infectados ex vivo con VIH aislado de LTNP (estas líneas celulares se denominan Tat TcL) pueden dar lugar a la sobreexpresión de las proteínas IS-Tat, a menudo a la exclusión virtual de otras proteínas víricas, que son potentes estimuladores del crecimiento en lugar de pro-apoptóticos. Los genes Tat clonados de estas Tac Tcl revelan variaciones de secuencia en dos regiones Tat, en el extremo amino y dentro de la primera parte del segundo exón. Estos sorprendentes descubrimientos podrían ayuda a explicar por qué los linfocitos T4 LTNP infectados por el VIH no mueren a la asombrosa velocidad que se ha visto en individuos infectados por el VIH que evolucionan a SIDA.

Adicionalmente, se encuentran variantes de Tat en los lentivirus que infectan especies de mono, aunque no dan lugar al desarrollo de inmunodeficiencia y a infección epidémica. Estas proteínas Tat variantes dirigen la diferenciación de los monocitos en células dendríticas (CD) que estimulan las respuestas de los linfocitos T citotóxicos (LTC) . Estas variantes Tat de simios y otras variantes Tat que no son inmunosupresoras se han denominado Tat inmunoestimuladoras (IS-Tat) o atenidas.

En base a las observaciones con líneas de linfocitos T Tat CD4+, observaciones clínicas y experimentos en animales, la proteína Tat atenuada (más específicamente IS-Tat o, como alternativa, proteínas Tat que se han modificado química o físicamente) puede actuar como linfocitos T4 activadores estimulantes del sistema inmunitario que inducen su proliferación. Este principio puede ayudar a explicar los niveles estables de T4 observados en los LTNP. Además, las Tat atenuadas pueden ser útiles como adyuvantes cuando se administran junto con otros componentes vacunales activos, tales como, entre otros, vacunas para otros virus, bacterias, rickettsia y células cancerosas.

Los cánceres y las infecciones crónicas son los ejemplos más importantes de enfermedades humanas comunes que responden a tratamientos inmunitarios. Aunque las infecciones han sido las primeras enfermedades combatidas mediante inmunización, en los ensayos clínicos realizados en seres humanos se ha establecido que una respuesta inmunitaria, en particular de la rama de los LTC del sistema inmunitario, podía remitir algunos melanomas y cánceres renales humanos. Estas observaciones se ampliaron con el descubrimiento de que las CD, una clase específica de células presentadoras de antígenos (CPA) son particularmente eficaces en el inicio de la actividad de los LTC contra cánceres y otras enfermedades. Las tecnologías que están dirigidas a las CD y las activan han proporcionado algunos éxitos tempranos contra las pre-neoplasias malignas cervicales causadas por infección por el virus del papiloma humano (VPH) y el cáncer de pulmón humano. En contraste con los fármacos quimioterapéuticos que actualmente se usan contra el cáncer, los agentes que provocan respuesta de los LTC contra el cáncer se acompañan potencialmente de pocos efectos secundarios debido a la gran especificidad de la respuesta inmunitaria.

Los esfuerzos para desarrollar fármacos inmunoterapéuticos que traten el cáncer se han visto retrasados por las dificultades técnicas a la hora de apuntar a las CD y activarlas, para liberar y mantener las señales de entrada a los LTC requeridas. El antígeno dirigido a la inducción de una respuesta de LTC es un reto en cuanto que el procesamiento natural requiere que el antígeno entre en el citoplasma de la célula para unirse al antígeno del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) de clase I del sistema inmunitario, un requisito previo para la activación de los LTC porque el ligando para activar el receptor de los linfocitos T en las LTC es un complejo de antígeno y MHC de clase I. En casi todos los casos, los antígenos proteicos, incuso cuando están acoplados al coactivador de las CD, entran exclusivamente en la vía de presentación del antígeno de MHC de clase II alternativa que excluye la estimulación de los LTC. Esto puede superarse, en parte, con tecnologías basadas en péptidos, porque los péptidos se unen al MHC de clase I que ya está en la superficie de las CD. No obstante, esta tecnología es inespecífica y la mayoría de los péptidos son poco activadores de las CD, lo que limita su eficacia como tratamientos del cáncer para seres humanos.

Se sabe que un grupo limitado de proteínas biológicas estimula una respuesta de LTC. Variantes y derivados del transactivador de la transcripción (Tat) del virus de la inmunodeficiencia humana 1 (VIH-1) puede estimular esta respuesta de los LTC. Productos biológicos adicionales que actualmente se sabe que desencadenan directamente una respuesta de LTC están basados en las proteínas del choque térmico (HSP) o en la proteína de la cubierta externa de determinadas bacterias. Las proteínas del choque térmico han mostrado una eficacia limitada en el tratamiento de determinadas neoplasias genitales relacionadas con la infección por el VPH.

El cáncer de mama es una causa principal de muerte relacionada con el cáncer en las mujeres de todo el mundo. Anualmente se producen aproximadamente 1 millón de nuevos casos de cáncer de mama que tienen como resultado 370.000 muertes en todo el mundo. En EE.UU. se diagnostican más de 200.000 casos nuevos de cáncer de mama invasivo todos los años y aproximadamente 45.000 muertes se atribuyen a esta enfermedad, o que hace del cáncer de mama la segunda causa principal de mortalidad por cáncer en EE.UU. entre el sexo femenino y la quinta causa más importante de muertes por cáncer en general. Después de un descenso constante de la morbididad por cáncer de mama, la supervivencia media del cáncer de mama desde el momento del diagnóstico de enfermedad ampliamente invasiva (estadio 4) no ha cambiado en las últimas dos décadas. La tasa de supervivencia a cinco años para el cáncer de mama en estadio 4 sigue en aproximadamente un 20% desde 1988, lo que significa que las ventajas sobre la supervivencia de los agentes más recientes han llegado a término en lo referente a enfermedad terminal.

El tratamiento del cáncer de mama como adyuvante ha experimentado significativas mejoras en los últimos cuarenta años. Además de mejores tumorectomía, radioterapia, quimoterapia convencional y tratamiento de sustitución hormonal, han emergido nuevas clases de terapias con distintos mecanismos oncolíticos, tales como TAXOL® y HERCEPTIN®. HERCEPTIN® ha sido el último de estos agentes en ser introducido en 2003. No se ha expandido significativamente... [Seguir leyendo]

1. Una composición farmacéutica que comprende una secuencia de aminoácidos modificada de la proteína transactivadora de la transcripción (Tat) del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) , teniendo dicha secuencia de aminoácidos modificada una identidad de secuencia mayor del 95% con una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo constituido por las SEC ID Nº 2, SEC ID Nº 3 y SEC ID Nº 4.

2. Un polipéptido derivado de Tat que comprende una secuencia de aminoácidos modificada de la proteína Tat como se define en la reivindicación 1 para usar en el tratamiento del cáncer causando el cese del crecimiento de dicho cáncer o la regresión de dicho cáncer en un sujeto o para usar en la reducción de la carga del tumor causando la regresión de dicho cáncer en un sujeto.

3. Uso de un polipéptido derivado de Tat que comprende una secuencia de aminoácidos modificada de la proteína Tat como se define en la reivindicación 1 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento del cáncer causando el cese del crecimiento de dicho cáncer o la regresión de dicho cáncer en un sujeto o para reducir la carga del tumor causando la regresión de dicho cáncer en un sujeto.

4. El polipéptido derivado de Tat de la reivindicación 2 o el uso de la reivindicación 3, para tratar el cáncer o reducir la carga tumoral en dicho sujeto mediante la administración del polipéptido derivado de Tat en una pluralidad de dosis.

5. El polipéptido derivado de Tat de la reivindicación 2 o el uso de la reivindicación 3 para tratar el cáncer o reducir la carga tumoral en dicho sujeto mediante la administración mediante un ciclo de administración repetida en la que cada ciclo comprende administrar una pluralidad de dosis de dicho polipéptido derivado de Tat en un periodo de tiempo definido seguido de un periodo de descanso y en la que dicho ciclo se repite una pluralidad de veces.

6. El polipéptido derivado de Tat de la reivindicación 2 o el uso de la reivindicación 3 para tratar el cáncer o reducir la carga tumoral en dicho sujeto mediante la administración mediante un ciclo de administración repetida en la que cada ciclo comprende administrar una pluralidad de dosis de dicho polipéptido derivado de Tat en un periodo de tiempo definido seguido de una administración de una o una pluralidad de dosis de un agente terapéutico en un periodo de tiempo definido y en la que dicho ciclo se repite una pluralidad de veces.

7. El polipéptido derivado de Tat, o el uso, de la reivindicación 6, en el que el agente terapéutico es ciclofosfamida.

8. El polipéptido derivado de Tat de la reivindicación 2 o el uso de la reivindicación 3, en el que dicho polipéptido 30 derivado de Tat tiene una identidad de al menos el 95% con la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 3.