Péptidos derivados de la trombina para estimular la reparación del tejido cardíaco.

Un equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico para uso enpromover reparación de tejido cardíaco,

en donde el equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivadode la trombina angiogénico comprende un dominio de unión del receptor de trombina que tiene la secuencia Arg-Gli-Asp-Ala (SEC ID Nº 1), y una secuencia conservada serin esterasa, y en donde dicho equivalente fisiológicamentefuncional de un péptido derivado de la trombina angiogénico es o C-amidado con-C(O)-NH2, o C amidado con -C(O)-NH2 y N -acetilado.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

La alfa-trombina humana parece tener actividad estimuladora de crecimiento para una amplia variedad de células de diversos tejidos. Por ejemplo, se ha mostrado que la alfa-trombina inicia la proliferación de células fibroblásticas en cultivo sin adición de suero u otros factores purificados de crecimiento, para tener un efecto sinérgico con el factor de crecimiento epidérmico en ciertos fibroblastos de hamster y células endoteliales humanas, para iniciar división celular o síntesis de ADN en cálulas lenticulares epiteliales y del bazo y activar monocitos y neutrófilos. Sin embargo, el uso de trombina como factor de crecimiento y su potencial importancia para cicatrización de heridas no ha sido ampliamente aclamado. En parte, esto se debe a la complejidad de la implicación de la trombina con la coagulación, activación de plaquetas e iniciación de proliferación celular así como a la compleja regulación de moléculas de trombina y similares a trombina por inhibidores de proteasa de suero y por nexinas de proteasa liberadas por células. Esta complejidad y alto grado de regulación fisiológica, sin embargo, soporta la importancia potencial de esta ruta de iniciación en la cicatrización de heridas.

La trombina también puede jugar un papel tanto en la revascularización y migración normal de las células de la sangre a la zona de la lesión como en la metástasis y la angiogénesis anormal asociadas con tumores. La capacidad de la trombina para aumentar la proliferación de células endoteliales y alterar la función de barrera de los vasos sanguíneos puede contribuir a la angiogénesis y la inflamación en los sitios de lesión tisular.

Han sido descritos por los presentes inventores péptidos derivados de la trombina para la actividad agonista y antagonista de la trombina y / o del receptor de trombina, como en el tratamiento de heridas. La patente de Estados Unidos Nº 5.500.412 o 5.352.664, el contenido de las cuales se incorpora aquí por referencia en su totalidad. Sin embargo, la patente no enseña el uso novedoso de los péptidos derivados de trombina para el tratamiento del tejido cardíaco dañado, para revascularización, o para la inhibición de la oclusión vascular y reestenosis.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

La invención se refiere a un equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico para uso tal como se establece en la reivindicación 1 y la reivindicación 9. La invención también se refiere a un stent como se establece en la reivindicación 11 y el uso de la reivindicación 13. Otras realizaciones se establecen en las reivindicaciones 2 a 8, 10 y 12.

Equivalentes fisiológicamente funcionales de péptidos angiogénicos derivados de trombina están dentro del alcance de la invención. Estos péptidos están amidados en el extremo carboxilo con-C (O) -NH2 o amidados según lo especificado y acetilados en el extremo amino. En realizaciones particulares, la secuencia de aminoácidos de la SEC ID N º 3 se representa como los siguientes equivalentes fisiológicamente funcionales: Ala-Gli-Tir-Lis-Pro-Asp-Glu-Gli-Lis-Arg-Gli-Asp-Ala-Cis -Glu-Gli-Asp-Ser-Gli-Gli-Pro-Fen-Val-CONH2 (SEC ID N º 4) ; o Ac-Ala-Gli-Tir-Lis-Pro-Asp-Glu-Gli-Lis-Arg -Gli-Asp-Ala-Cis-Glu-Gli-Asp-Ser-Gli-Gli-Pro-Fen-Val- CONH2 (SEC ID Nº 6) . ("Ac" es CH3-C (O) -) . El péptido que tiene la secuencia de SEC ID Nº 4 también es referido aquí como "TP5O8".

El péptido preferentemente puede ser administrado durante o después de cirugía cardíaca, por ejemplo, por inyección directa o mediante catéter en el tejido cardiaco dañado o isquémico como un péptido soluble o en una formulación de liberación sostenida.

La invención también se refiere al uso del péptido para estimular la revascularización que comprende administrar al tejido cardiaco una cantidad terapéuticamente efectiva de los péptidos angiogénicos derivados de trombina , como se describe en este documento.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

Las enfermedades cardiovasculares se caracterizan generalmente por un suministro deficiente de sangre al corazón u otros órganos de destino. El infarto de miocardio (MI) es resultado de estrechamiento o bloqueo de las arterias coronarias en el corazón que priva al corazón de nutrientes y el oxígeno necesarios. Cuando el suministro de sangre al corazón se ve comprometido, las células responden generando compuestos que inducen el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos con el fin de aumentar el suministro de sangre al corazón. Estos nuevos vasos sanguíneos son llamados vasos sanguíneos colaterales. El proceso por el cual los vasos sanguíneos nuevos son inducidos a crecer fuera de los vasos existentes se denomina angiogénesis, y las sustancias que se producen por las células para inducir la angiogénesis son los factores angiogénicos.

Cuando el músculo cardiaco se ve privado de oxígeno y nutrientes debido a oclusión vascular, el tejido muscular del corazón se vuelve isquémico y pierde su capacidad de contraerse y funcionar. Esta pérdida de función puede ser restaurada por señales naturales del músculo cardiaco isquémico que inducen revascularización angiogénica a través del desarrollo de vasos colaterales que eluden la oclusión. Este revascularización o angiogénesis implica la estimulación de la proliferación de células endoteliales y la migración y gemación de nuevos vasos sanguíneos. En muchos casos, sin embargo, las señales naturales no son suficientes para causar el crecimiento de vasos colaterales y el tejido isquémico puede hacerse fibrótico o necrótico. Si este proceso no se invierte mediante procedimientos para abrir los vasos ocluídos o inducción adicional de vasos sanguíneos colaterales, el corazón puede llegar a ser totalmente disfuncional y requerirse trasplante.

Los péptidos descritos aquí pueden ser empleados para inducir la proliferación angiogénica y la migración de células endoteliales que resulta en la formación de nuevos capilares y vasos colaterales para ayudar a restaurar la función al tejido cardiaco dañado o isquémico. Estos péptidos preferentemente pueden ser inyectados directamente en o aplicados al tejido cardíaco durante procedimientos a corazón abierto para cirugía de bypass o inserción de dispositivos de asistencia ventricular o entregados por inyección de catéter en el corazón como un péptido soluble o en una formulación de liberación sostenida.

La proliferación de células endoteliales, como la que ocurre en la angiogénesis, es también útil en la prevención o inhibición de la reestenosis tras angioplastia con balón. El procedimiento de angioplastia con balón a menudo lesiona las células endoteliales que revisten las paredes internas de los vasos sanguíneos y rompe la integridad de la pared del vaso. Las células musculares lisas y las células inflamatorias a menudo se infiltran en los vasos sanguíneos dañados causando una obstrucción secundaria en un proceso conocido como reestenosis. La estimulación de la proliferación y migración de las células endoteliales situadas en la periferia de la zona dañada inducida por balón con el fin de cubrir la superficie luminal del vaso con una nueva monocapa de células endoteliales restauraría potencialmente la estructura original del vaso sanguíneo.

Preferiblemente, la endotelialización comprende re-endotelialización después de la angioplastia, para reducir, inhibir o evitar la reestenosis. Los expertos en la materia reconocen que los pacientes tratados con los péptidos de la invención puede ser tratados con o sin stent.

Un catéter con balón inflable con péptido recubriendo el balón o un catéter que inyecta directamente el péptido en la pared del vaso se puede también emplear para entregar la sustancia a una arteria de destino.

La angioplastia con balón es un tratamiento común de la cardiopatía isquémica que que implica el inflado de un balón en un vaso sanguíneo obstruido con el fin de abrir el vaso sanguíneo bloqueado. Por desgracia, este método de tratamiento provoca lesión a las células endoteliales que revisten las paredes internas de los vasos sanguíneos a menudo conduciendo a la reestenosis. Los péptidos descritos en este documento pueden ser empleados para inducir proliferación y migración de las células endoteliales situadas en la periferia de la zona dañada inducida por balón con el fin de cubrir la superficie luminal del vaso con una nueva monocapa de células endoteliales, con la esperanza de restaurar la estructura original de los vasos sanguíneos. La angioplastia coronaria se acompaña con frecuencia de despliegue de un stent intravascular para mantener la función de los vasos y evitar la... [Seguir leyendo]

1. Un equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico para uso en promover reparación de tejido cardíaco, en donde el equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico comprende un dominio de unión del receptor de trombina que tiene la secuencia Arg-Gli-Asp-Ala (SEC ID Nº 1) , y una secuencia conservada serin esterasa, y en donde dicho equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico es o C-amidado con-C (O) -NH2, o C amidado con -C (O) -NH2 y N -acetilado.

2. Equivalente peptídico para uso en promover reparación de tejido cardiaco, según la reivindicación 1 que comprende la secuencia de aminoácidos: Ala-Gli-Tir-Lis-Pro-Asp-Glu-Gli-Lis-Arg-Gli-Asp-Ala-Cis-Glu-Gli-Asp-Ser-Gli-Gli-Pro-Fen-Val (SEC ID Nº 3) .

3. Equivalente peptídico para uso en promover reparación de tejido cardiaco, según la reivindicación 1, que consiste en la secuencia de aminoácidos Ala-Gli-Tir-Lis-Pro-Asp-Glu-Gli-Lis-Arg-Gli-Asp-Ala-Cis-Glu-Gli-Asp-Ser-Gli Gli-Pro-Fen-Val-CONH2 (SEC ID N º 4) .

4. Equivalente peptídico para uso en promover reparación de tejido cardiaco, según la reivindicación 1, que consiste en la secuencia de aminoácidos Ac-Ala-Gli-Tir-Lis-Pro-Asp-Glu-Gli-Lis-Arg-Gli-Asp-Ala-Cis-Glu-Gli-Asp-Ser-Gli-Gli-Pro-Fen-Val-CONH2 (SEC ID N º 6.)

5. Equivalente peptídico para uso en promover reparación de tejido cardiaco de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 que es para administración durante o después de la cirugía cardiaca.

6. Equivalente peptídico para uso en promover reparación de tejido cardiaco de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, que es para administración por inyección en el tejido cardíaco.

7. Equivalente peptídico para uso en promover reparación de tejido cardiaco de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en la forma de una formulación de liberación sostenida para administración en el tejido cardíaco.

8. Equivalente péptido para uso en promover reparación de tejido cardíaco según la reivindicación 7 en donde la formulación de liberación sostenida es micropartículas de ácido poliláctico / ácido poliglicólico que comprende el equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico.

9. Un equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico para uso en la estimulación de la revascularización del tejido cardiaco, en donde dicho equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico comprende un dominio de unión del receptor de trombina que tiene la secuencia Arg-Gli-Asp-Ala (SEC ID Nº 1) , y una consecuencia conservada serin esterasa, y en donde dicho equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico es o C-amidado con -C (O) -NH2, o C amidado con -C (O) -NH2 y N-acetilado.

10. Equivalente peptídico para uso en la estimulación de la revascularización del tejido cardiaco, según la reivindicación 9, que es Ala-Cli-Tir-Lis-Pro-Asp-Glu-Gli-Lis-Arg-Gli-Asp-Ala-Cis-Glu-Gli-Asp-Ser-Gli-Gli-Pro-Fen-Val-CONH2 (SEC ID Nº 4) .

11. Un stent revestido con un equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico, en donde el equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico comprende un dominio de unión del receptor de trombina que tiene la secuencia Arg-Gli-Asp-Ala (SEC ID N º 1) ; y una secuencia conservada serin esterasa, y en donde dicho equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico es o C-amidado con -C (O) -NH2, o C amidado con -C (O) -NH2 y N-acetilado.

12. El stent de la reivindicación 11 en donde el equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico es: Ala-Cli-Tir-Lis-Pro-Asp-Glu-Gli-Lis-Arg-Gli-Asp-Ala-Cis-Glu-Gli-Asp-Ser-Gli-Gli-Pro-Fen-Val-CONH2 (SEC ID N º 4) .

13. El uso de un equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénics en la fabricación de un medicamento para promover la reparación del tejido cardíaco, en donde el equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico comprende un dominio de unión del receptor de trombina que tiene la secuencia -Arg-Gli-Asp -Ala (SEC ID N º 1) , y una secuencia conservada de serin esterasa, y en donde dicho equivalente fisiológicamente funcional de un péptido derivado de la trombina angiogénico es o C-amidado con -C (O) -NH2, o C amidado con -C (O) -NH2 y N-acetilado.