N-((1R,2S,5R)-5-(terc-butilamino)-2-((S)-3-(7-terc-butilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ilamino)-2-oxopirrolidin-1-il) ciclohexil) acetamida, un modulador doble de la actividad del receptor de las quimiocinas, formas cristalinas y procedimientos.

Un compuesto que tiene la fórmula: **Fórmula**

o una sal del mismo.

N- ( (1R, 2S, 5R) -5- (terc-butilamino) -2- ( (S) -3- (7-terc-butilpirazolo[1, 5-a][1, 3, 5]triazin-4-ilamino) -2-oxopirrolidin-1-il) ciclohexil) acetamida, un modulador doble de la actividad del receptor de las quimiocinas, formas cristalinas y procedimientos.

Antecedentes de la invención

Campo de la invención La presente invención proporciona N- ( (1R, 2S, 5R) -5- (terc-butilamino) -2- ( (S) -3- (7-terc-butilpirazolo[1, 5-a][1, 3, 5]triazin4-ilamino) -2-oxopirrolidin-1-il) ciclohexil) acetamida o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, que tiene una actividad doble deseada inesperada. También se proporcionan formas cristalinas de la presente invención. Las composiciones farmacéuticas que contienen las mismas y las mismas para uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias, enfermedades alérgicas, autoinmunes, metabólicas, cancerosas y/o cardiovasculares también es un objetivo de la presente invención, La presente divulgación también proporciona un procedimiento de preparación de N- ( (1R, 2S, 5R) -5- (terc-butilamino) -2- ( (S) -3- (7-terc-butilpirazolo[1, 5-a][1, 3, 5]triazin-4-ilamino) -2-oxopirrolidin-1il) ciclohexil) acetamida. En la presente memoria también se proporcionan compuestos que son intermedios útiles e el procedimiento. En la presente memoria también se proporcionan metabolitos de compuestos activos, composiciones farmacéuticas y uso de los mismos.

Descripción de la técnica relacionada Las quimiocinas son citocinas quimiotácticas de un peso molecular de 6-15 kDa, que son liberadas por una amplia variedad de células para atraer y activar, entre otros tipos celulares, macrófagos, linfocitos T y B, eosinófilos, basófilos y neutrófilos (recapitulación en: Charo y col., New Eng. J. Med., 354:610-621 (2006) ; Luster, New Eng. J. Med., 338:436-445 (1998) ; y Rollins, Blood, 90:909-928 (1997) ) . Hay dos clases principales de quimiocinas, CXC y CC, en función de si las primeras dos cisteínas en la secuencia de aminoácidos están separadas por un solo aminoácido (CXC) o si están adyacentes (CC) . Las quimiocinas CXC, tales como la interleucina-8 (IL-8) , la proteína activadora de neutrófilos 2 (NAP-2) y la proteína de activación estimuladora del crecimiento del melanoma (MGSA) , son quimiotácticas principalmente para neutrófilos y linfocitos T, mientras que las quimiocinas CC, tales como RANTES, MIP-1α, MIP-1β, las proteínas quimiotácticas de monocitos (MCP-1, MCP-2, MCP-3, MCP-4 y MCP-5) y las eotaxinas (1 y 2) son quimiotácticas para, entre otros tipos celulares, macrófagos, linfocitos T, eosinófilos, células dendríticas y basófilos. También existen las quimiocinas linfotactina-1, linfotactina-2 (ambas quimiocinas C) y fractalquina (una quimiocina CX3C) que no entran dentro de las principales subfamilias de quimiocinas) .

Las quimiocinas se unen a receptores específicos de la superficie de las células que pertenecen a la familia de las proteínas con siete dominios transmembrana acopladas a proteína G, (recapitulación en: Horuk, Trends Pharm, Sci., 15:159-165 (1994) ) que se denominan "receptores de quimiocinas." Al unirse a sus ligandos afines, los receptores de quimiocinas transducen una señal intracelular a través de las proteínas G triméricas, lo que da como resultado, entre otras respuestas, un rápido incremento de la concentración de calcio intracelular, cambios en la forma de la célula, incrementos de la expresión de las moléculas de adhesión celular, desgranulación y estimulación de la migración celular. Al menos existen diez receptores de quimiocinas que se unen o responden a las quimiocinas CC con los siguientes patrones característicos (recapitulación en Zlotnik y col., Immunity, 12:121 (2000) ) : CCR-1 (or "CKR-1" or "CC-CKR-1") [MIP-1α, MCP-3, MCP-4, RANTES] (Ben-Barruch y col., Cell, 72:415-425 (1993) , y Luster, New Eng. J. Med., 338:436-445 (1998) ) ; CCR-2A y CCR-2B (o "CKR-2A"/"CKR-2B" or "CC-CKR-2A"/"CC-CKR-2B") [MCP-1, MCP-2, MCP-3, MCP-4, MCP-5] (Charo y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91:2752-2756 (1994) , y Luster, New Eng. J. Med., 338:436-445 (1998) ) ; CCR-3 (o "CKR-3" o "CC-CKR-3") [eotaxina-1, eotaxina-2, RANTES, MCP3, MCP-4] (Combadiere y col., J. Biol. Chem., 270:16491-16494 (1995) , y Luster, New Eng. J. Med., 338:436-445 (1998) ) ; CCR-4 (or "CKR-4" o "CC-CKR-4") [TARC, MDC] (Power y col., J. Biol. Chem, 270:19495-19500 (1995) , y Luster, New Eng. J. Med., 338:436-445 (1998) ) ; CCR-5 (o "CKR-5" O "CC-CKR-5") [MIP-1α, RANTES, MIP-1β] (Samson y col., Biochemistr y , 35:3362-3367 (1996) ) ; CCR-6 (o "CKR-6" o "CC-CKR-6") [LARC] (Baba y col., J. Biol. Chem., 272:14893-14898 (1997) ) ; CCR-7 (o "CKR-7" o "CC-CKR-7") [ELC] (Yoshie y col., J. Leukoc. Biol., 62:634644 (1997) ) ; CCR-8 (o "CKR-8" o "CC-CKR-8") [I-309] (Napolitano y col., J. Immunol., 157:2759-2763 (1996) ) ; CCR10 (o "CKR-10" o "CC-CKR-10") [MCP-1, MCP-3] (Bonini y col., DNA Cell Biol., 16:1249-1256 (1997) ) ; y CCR-11 [MCP-1, MCP-2, y MCP-4] (Schweickart y col., J. Biol. Chem., 275:9550 (2000) ) .

Además de los receptores de quimiocinas en mamíferos, se ha demostrado que los citomegalovirus, herpesvirus y poxvirus de mamíferos expresan, en células infectadas, proteínas con las propiedades de unión de los receptores de quimiocinas (recapitulación en: Wells y col., Curr. Opin. Biotech., 8:741-748 (1997) ) . Las quimiocinas CC humanas, tales como RANTES y MCP-3, pueden producir una rápida movilización del calcio a través de estos receptores codificados en los virus. La expresión del receptor permitir la aparición de infecciones al permitir la destrucción de la vigilancia del sistema inmunitario normal y la respuesta a la infección. De forma adicional, los receptores de quimiocinas humanas, tales como CXCR4, CCR-2, CCR-3, CCR-5 y CCR-8, pueden actuar como co-receptores para la infección de células de mamífero por microbios como, por ejemplo, los virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) .

Se cree que las quimiocinas y sus receptores afines son mediadores importantes de enfermedades y trastornos inflamatorios, infecciosos e inmunorreguladores, que incluyen asma y enfermedades alérgicas, así como patologías autoinmunitarias, tales como artritis reumatoide y aterosclerosis; y enfermedades metabólicas tales como aterosclerosis y diabetes (recapitulación en: Charo y col., New Eng. J. Med., 354:610-621 (2006) ; Gao, Z. y col., Chem. Rev., 103:3733 (2003) ; Carter, P.H., Curr. Opin. Chem. Biol., 6:510 (2002) ; Trivedi y col., Ann. Reports Med. Chem., 35:191 (2000) ; Saunders y col., Drug Disc. Today, 4:80 (1999) ; Premack y col., Nature Medicine, 2:1174 (1996) ) . Por ejemplo, la quimiocina quimioatrayente-1 de monocitos (MCP-1) y su receptor, receptor de quimiocinas CC 2 (CCR-2) , desempeñan un papel crucial en la atracción de leucocitos a sitios de inflamación y en la activación posterior de estas células. Cuando la quimiocina MIP-1 se une a CCR-2, induce un rápido incremento de la concentración de calcio intracelular, un incremento de la expresión de las moléculas de adhesión celular y la estimulación de la migración de leucocitos. La demostración de la importancia de la interacción MCP-1/CCR-2 se ha proporcionado en experimentos con ratones modificados genéticamente. Los ratones MCP-1 -/- fueron incapaces de reclutar monocitos a los sitios de inflamación después de varios tipos diferentes de desafío inmunitario (Lu, B. y col.,

J. Exp. Med., 187:601 (1998) ) . Asimismo, los ratones CCR-2 -/- fueron incapaces de reclutar monocitos o producir interferón-γ cuando se exponen a varios agentes exógenos; además, los leucocitos de ratones atímicos CCR-2 no migraron en respuesta a MCP-1 (Boring, L. y col., J. Clin. Invest., 100:2552 (1997) ) , de modo que se demostró la especificidad de la interacción MCP-1/CCR-2. Otros dos grupos han notificado de forma independiente resultados con diferentes cepas de ratones CCR-2 -/- (Kuziel, W.A. y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94:12053 (1997) , y Kurihara, T. y col., J. Exp. Med., 186:1757 (1997) ) . La viabilidad y la salud generalmente normal de los animales MCP-1 -/- y CCR-2 -/- es notable en cuanto a que dicha rotura de la interacción MCP-1/CCR-2 no induce crisis fisiológicas. En conjunto, estos datos conducen a la conclusión de que moléculas que bloqueen las acciones de MCP-1/CCR-2 serían útiles en el tratamiento de una serie de trastornos inflamatorios y autoinmunitarios (recapitulación en: Feria, M. y col., Exp. Opin. Ther. Patents, 16:49 (2006) ; y Dawson, J. y col., Exp. Opin. Ther. Targets, 7:35 (2003) ) . Esta hipótesis se ha validado ahora en una serie de diferentes modelos de enfermedad en animales, como se describe más adelante.

Se sabe que la MCP-1 está regulada por aumento en pacientes con artritis reumatoide (Koch, A. y col., J. Clin. Invest.,... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto que tiene la fórmula:

o una sal del mismo.

2. El compuesto de la reivindicación 1, que no está en forma de sal.

3. El compuesto de las reivindicaciones 1 o 2, que es una forma cristalina de dicho compuesto.

4. El compuesto de la reivindicación 2 en una forma cristalina, que comprende la forma N-1, en el que la forma N-1 es caracterizada por parámetros de celda unitaria sustancialmente iguales a los siguientes:

Dimensiones de la celda:

a = 7, 3085 (6) b = 16, 257 (1) c = 22, 688 (2)

α° = 90

β° = 90 y° = 90

Grupo espaciador P212121 Moléculas/celda unitaria (Z) : 1 Densidad, calc. g-cm-3: 1, 194

en el que dicho cristal está a una temperatura de aproximadamente -70° C.

5. La forma cristalina de acuerdo con la reivindicación 4, en la que dicha forma N-1 está en forma sustancialmente pura.

6. La forma cristalina como se define en la reivindicación 4, caracterizada por un patrón de difracción en polvo de rayos X (PXRD) sustancialmente de acuerdo con lo mostrado en la Figura 1.

7. La forma cristalina como se define en la reivindicación 4, que se caracteriza por un termograma de calorimetría diferencial de barrido sustancialmente de acuerdo con lo mostrado en la Figura 2, que tiene una transición endotérmica por encima de aproximadamente 205° C.

8. La forma cristalina como se define en la reivindicación 4, caracterizada por una curva termogravimétrica de acuerdo con lo mostrado en la Figura 3.

9. Un compuesto que tiene la fórmula:

o una sal del mismo.

10. Una composición farmacéutica, que comprende el compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 y que además comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable.

11. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 9, que además comprende al menos un agente terapéutico adicional.

12. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 para su uso en terapia.

13. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para su uso en el tratamiento de un trastorno en el que dicho trastorno es seleccionado de diabetes, obesidad, síndrome metabólico, accidente 10 cerebrovascular, dolor neuropático, miocardiopatía isquémica, psoriasis, hipertensión, esclerodermia, osteoartritis, aneurisma, fiebre, enfermedad cardiovascular, enfermedad de Crohn, insuficiencia cardiaca congestiva, enfermedades autoinmunes, infección por VIH, demencia asociada al VIH, psoriasis, fibrosis pulmonar idiopática, arteriosclerosis del trasplante, traumatismo cerebral inducido física o químicamente, enfermedad inflamatoria intestinal, alveolitis, colitis, lupus eritematoso sistémico, nefritis por suero neurotóxico, glomerulonefritis, asma,

esclerosis múltiple, ateroesclerosis, vasculitis, placas vulnerables, artritis reumatoide, reestenosis, hiperplasia de la neoíntima venosa, hiperplasia de la neoíntima de inserción de diálisis, hiperplasia de la íntima de derivación arteriovenosa, trasplante de órganos, nefropatía crónica de aloinjertos, cáncer, hiperplasia de la neoíntima venosa, hiperplasia de la neoíntima en la inserción de la diálisis e hiperplasia de la neoíntima por derivación arteriovenosa.

14. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 9 para su uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias, 20 alérgicas, autoimunes, metabólicas, cancerosas y cardiovasculares.

15. Un procedimiento de prepararación N- ( (1R, 2S, 5R) -5- (terc-butilamino) -2- ( (S) -3- (7-terc-butilpirazolo[1, 5a][1, 3, 5]triazin-4-ilamino) -2-oxopirrolidin-1-il) ciclohexil) acetamida, que comprende el procedimiento expuesto en el esquema siguiente.