Métodos de pronóstico en enfermedad renal crónica.

Un método de pronóstico de muerte de un sujeto de prueba de una enfermedad renal crónica (CKD) de cualquiercausa de mortalidad,

comprendiendo el método la detección de una cantidad elevada de citoquina inhibidora delmacrófago-1 (MIC-1) en un muestra corporal de prueba de dicho sujeto, en donde la cantidad elevada de MIC-1 seasocia con un aumento de la probabilidad de muerte del sujeto.

Métodos de pronóstico en enfermedad renal crónica Campo de la invención La presente invención se refiere a un método de pronóstico de la supervivencia de un sujeto con enfermedad renal crónica (CKD) , un método para la selección de sujetos con CDK en fase terminal para trasplantes de riñón y un método de pronóstico de la tolerancia de sujetos con CDK en fase terminal a la diálisis.

Antecedentes de la invención La citoquina inhibidora del macrófago (MIC) -1 es una proteína de la superfamilia del factor de crecimiento transformante-β (TGF-β) . MIC-1 originalmente se clona como citoquina inhibidora del macrófago-1 y después se identifica como factor de crecimiento transformante placentario-β (PTGF-β) , proteína morfogenética del hueso placentaria (PLAB) , gen activado por el fármaco anti-inflamatorio no-esteroidal 1 (NAG- 1) , factor derivado de la próstata (PDF) y factor de desarrollo de crecimiento-15 (GDF-1) (Bootcov et al., 1997; Hromas et al. 1997; Lawton et al., 1997; Yokoyama-Kobayashi et al., 1997; Paralkar et al., 1998) . Al igual que otras citoquinas relacionadas con TGF-β, MIC-1 se sintetiza como una proteína precursora inactiva, que experimenta homodimerización ligada por disulfuro. Tras la escisión proteolítica del pro-péptido N-terminal, MIC-1 madura se secreta como una proteína dimérica de aproximadamente 24.5 kDa (Bauskin et al., 2000) . Las secuencias de aminoácidos para MIC-1 se revelan en WO 99/06445, WO 00/70051, WO 01/81928, WO 2005/113585, Bottner et al. (1999b) ; Bootcov et al., 1997; Baek et ai., 2001; Hromas et al. (1997) , Paralkar et al., 1998; Morrish et al., 1996; y Yokoyama-Kobayashi et al., (1997) . La secuencia de aminoácido para el polipéptido de MIC-1 madura común o "tipo salvaje" se muestra en la Figura 1:

MIC-1 se expresa en varios tejidos (Moore et al., 2000; Bottner et al., 1999a; Fairlie et al., 1999; Bauskin et al., 2006) . Por ejemplo, las transferencias de Northern de tejidos humanos indican la presencia de pequeñas cantidades de mARN de MIC-1 en el riñón, páncreas y próstata, y grandes cantidades en la placenta (Moore et al., 2000; Fairlie et al., 1999) . Además, se ha demostrado que los niveles de MIC-1 en suero aumentan con la edad en sujetos normales, aparentemente saludables. La sobreexpresión de MIC-1 se ha asociado con el cáncer, particularmente cáncer de próstata (Welsh et al., 2003) , y altas concentraciones en suero de MIC-1 se asocian con la presencia de enfermedad metastásica (Welsh et al., 2003; Brown et al., 2006) . MIC-1 en suero también se eleva en enfermedades inflamatorias crónicas y predice los eventos ateroscleróticos independientemente de los factores de riesgo tradicionales. Los niveles de MIC-1 en suero también se aumentan en enfermedad renal crónica (CKD; Johnen et al., 2007) .

CKD (también conocido como enfermedad renal crónica) se caracteriza por una pérdida progresiva de la función renal durante un periodo de meses o años a través de cinco etapas. CKD inicialmente se caracteriza por la función renal suavemente disminuida con pocos síntomas manifiestos, que eventualmente pueden progresar a través de la etapa final, conocido como insuficiencia del riñón crónica (CKF) , falla renal crónica (CRF) , o insuficiencia renal en etapa terminal, que se caracteriza por una enfermedad grave y por lo general requiere algún tipo de "terapia de reemplazo renal" (por ejemplo, diálisis o trasplante renal) . Más de 15.5 millones de adultos en los Estados Unidos de américa tienen deterioro moderadamente severo de la función renal, y más de 480, 000 están recibiendo tratamiento activo para insuficiencia renal en etapa terminal con más de 100, 000 nuevos pacientes que inician el tratamiento anualmente. De los pacientes que recibieron tratamiento en 2005, más de 80, 000 murieron.

Los pacientes con CKD tienden a sufrir de aterosclerosis acelerada (una enfermedad inflamatoria crónica que afecta los vasos sanguíneos arteriales) , y son más propensos a desarrollar una enfermedad cardiovascular que la población general. Se considera que el aumento de niveles de marcadores inflamatorios tales como proteína C reactiva (CRP) es un factor de riesgo para eventos cardiovasculares agudos tanto para pacientes con insuficiencia renal en etapa terminal como poblaciones normales (Apple et al., 2004) . La enfermedad renal en etapa terminal se asocia con la anorexia, la pérdida de peso y la caquexia. Se piensa que es un enlace entre la desnutrición y la inflamación en pacientes con insuficiencia renal con las dos condiciones a menudo coexistiendo.

Algunos pacientes con CKD en etapa terminal pueden sobrevivir indefinidamente en diálisis; sin embargo, muchos pacientes por lo general mueren en la ausencia de un trasplante de riñón. La pérdida de peso, un índice de masa corporal (BMI) disminuido y elevados marcadores inflamatorios en suero se considera que son predictores de mortalidad. Sin embargo, la contribución de la desnutrición y la inflamación al resultado de la enfermedad y la naturaleza del enlace entre ellos está mal definida. Actualmente no hay métodos potenciales confiables para determinar que pacientes por lo general mueren en la ausencia de un trasplante de riñón, y en consecuencia es difícil determinar pacientes para los cuales un trasplante de riñón les puede salvar la vida.

El presente solicitante investigó la relación entre MIC-1 y la nutrición alterada en CKD y encontró que los niveles de MIC-1 tienen utilidad clínica para pronosticar la mortalidad en CKD. El presente solicitante también se ha dado cuenta que los niveles de MIC-1 ventajosamente pueden proveer una media para la selección de un sujeto con CKD en etapa terminal para un trasplante de riñón.

Resumen de la invención En un primer aspecto, la presente invención provee un método de pronóstico de la probabilidad de muerte de un sujeto de prueba de una enfermedad renal crónica (CKD) de toda causa de mortalidad, el método que comprende la detección WO2009/046495 A1 describe un método de tratamiento de la caquexia que involucra la eliminación o inactivación de MIC-1 presente en la sangre, plasma o suero de un sujeto con caquexia. WO2009/021293 A1 describe un método y tipos novedosos de agentes para modular el apetito y/o el peso corporal en un sujeto y un método de selección de agentes que interactúan y modulan la actividad del complejo del receptor para MIC-1.

WO 2009/141357 A1 describe un método para predecir si un paciente con diabetes tipo 1 sufrirá de una o más complicaciones seleccionadas de complicaciones cardiovasculares, insuficiencia renal en fase terminal, y muerte, el método que comprende a) determinación de la cantidad de MIC-1 (también conocido como GDF-15 en esta referencia) en una muestra de un paciente con diabetes tipo 1; y b) comparación de la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa a) con una cantidad de referencia y establecimiento de una predicción. Una cantidad elevada de MIC-1 en una muestra corporal de prueba de dicho sujeto, en donde la cantidad elevada de MIC-1 se asocia con un aumento de la probabilidad de muerte del sujeto.

En un segundo aspecto, la presente invención provee un método de pronóstico de la probabilidad de muerte de un sujeto de prueba con CKD de mortalidad por cualquier causa, el método comprende las siguientes etapas:

(i) determinación de la cantidad de MIC-1 en una muestra corporal de prueba de dicho sujeto; y

(ii) comparación de la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) con una cantidad de referencia de MIC-1, que es una cantidad elevada de MIC-1 asociada con un aumento de la probabilidad de muerte del sujeto;

de tal manera que cuando la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) es mayor de o sustancialmente equivalente a la cantidad de referencia, el sujeto tiene un aumento de la probabilidad de muerte, y cuando la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) es menor de la cantidad de referencia, el sujeto tiene una disminución de la probabilidad de muerte.

En un tercer aspecto, la presente invención provee un método de selección de un sujeto de prueba de CDK terminal para un trasplante de riñón, el método que comprende la detección de una cantidad elevada de MIC-1 en una muestra corporal de prueba de dicho sujeto, en donde la cantidad elevada de MIC-1 se asocia con un aumento de la probabilidad de muerte del sujeto en la ausencia de un trasplante de riñón.

El método del tercer aspecto preferiblemente comprende las siguientes etapas:

(i) determinación de la cantidad de MIC-1 en una muestra corporal de prueba de dicho sujeto; y

(ii) comparación de la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) con una cantidad de referencia de MIC-1 que se asocia con... [Seguir leyendo]

1. Un método de pronóstico de muerte de un sujeto de prueba de una enfermedad renal crónica (CKD) de cualquier causa de mortalidad, comprendiendo el método la detección de una cantidad elevada de citoquina inhibidora del macrófago-1 (MIC-1) en un muestra corporal de prueba de dicho sujeto, en donde la cantidad elevada de MIC-1 se asocia con un aumento de la probabilidad de muerte del sujeto.

2. El método de la reivindicación 1, en donde la cantidad elevada de MIC-1 en la muestra corporal de prueba se detecta mediante el uso de medición en serie mediante:

(i) determinación de la cantidad de MIC-1 presente en la citada muestra corporal de prueba; y

(ii) comparación de dicha cantidad de MIC-1 contra una cantidad o un rango de cantidades de MIC-1 presente en la (s) muestra (s) comparativa (s) corporal (es) tomada (s) del mismo sujeto en un momento anterior;

en donde la cantidad de MIC-1 presente en la etapa (i) se eleva en comparación con la cantidad o rango de cantidades de MIC-1 presente en dicha (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) .

3. El método de la reivindicación 1, en donde la cantidad elevada de MIC-1 en la muestra corporal de prueba se detecta por comparación con un sujeto normal mediante:

(i) determinación de la cantidad de MIC-1 presente en la citada muestra corporal de prueba; y

(ii) comparación de dicha cantidad de MIC-1 contra una cantidad o un rango de cantidades de MIC-1 presente en muestra (s) corporal (es) comparativa (s) tomada (s) a partir del sujeto (s) normal;

en donde la cantidad de MIC-1 presente en la etapa (i) se eleva en comparación con la cantidad o rango de cantidades de MIC-1 presente en dicha (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) .

4. El método de reivindicación 1, en donde la cantidad elevada de MIC-1 en la muestra corporal de prueba se detecta por comparación con un sujeto con enfermedad renal en etapa terminal mediante:

(i) determinación de la cantidad de MIC-1 presente en la citada muestra corporal de prueba; y

(ii) comparación de dicha cantidad de MIC-1 contra una cantidad o un rango de cantidades de MIC-1 presente en la (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) tomada (s) de al menos otro sujeto que ha sido diagnosticado con enfermedad renal terminal;

de tal manera que cuando la cantidad de MIC-1 presente en la etapa (i) se aumenta en comparación con la cantidad

o rango de cantidades de MIC-1 presente en dicha (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) , el sujeto de prueba tiene un aumento de la probabilidad de muerte en comparación con al menos otro sujeto.

5. El método de reivindicación 1, en donde la cantidad elevada de MIC-1 en la muestra corporal de prueba se detecta por comparación con una cantidad de referencia de MIC-1 asociada con un aumento de la probabilidad de muerte del sujeto, mediante:

(i) determinación de la cantidad de MIC-1 presente en la citada muestra corporal de prueba; y

(ii) comparación de dicha cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) con dicha cantidad de referencia de MIC-1;

de tal manera que cuando la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) es mayor de o equivalente a la cantidad de referencia, el sujeto tiene un aumento de la probabilidad de muerte, y cuando la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) es menor de la cantidad de referencia, el sujeto tiene una reducida probabilidad de muerte.

6. Un método de selección de un sujeto de prueba de CDK terminal para un trasplante de riñón, comprendiendo el método la detección de una cantidad elevada de MIC-1 en una muestra corporal de prueba de dicho sujeto, en donde la cantidad elevada de MIC-1 se asocia con un aumento de la probabilidad de muerte del sujeto en la ausencia de un trasplante de riñón.

7. El método de reivindicación 6, en donde el método comprende las siguientes etapas:

(i) determinación de la cantidad de MIC-1 en una muestra corporal de prueba de dicho sujeto; y

(ii) comparación de la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) con una cantidad de referencia de MIC-1 que se asocia con un incremento de la probabilidad de muerte del sujeto en la ausencia de un trasplante de riñón; de tal manera que cuando la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) es mayor de o equivalente a la cantidad de referencia, el sujeto tiene un aumento de la probabilidad de muerte en la ausencia de un trasplante de riñón, y cuando la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) es menor de la cantidad de referencia, el sujeto tiene una reducida probabilidad de muerte en la ausencia de un trasplante de riñón.

8. El método de la reivindicación 6, en donde la cantidad elevada de MIC-1 en la muestra corporal de prueba se detecta, mediante el uso de la medición en serie mediante:

(i) determinación de la cantidad de MIC-1 presente en la citada muestra corporal de prueba; y

(ii) comparación de dicha cantidad de MIC-1 contra una cantidad o un rango de cantidades de MIC-1 presente en la (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) tomadas del mismo sujeto en un momento inicial;

en donde la cantidad de MIC-1 presente en la etapa (i) se eleva en comparación con la cantidad o rango de cantidades de MIC-1 presente en dicha (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) .

9. El método de reivindicación 6, en donde la cantidad elevada de MIC-1 en la muestra corporal de prueba se detecta, mediante la comparación con un sujeto normal mediante:

(i) determinación de la cantidad de MIC-1 presente en la citada muestra corporal de prueba; y

(ii) comparación de dicha cantidad de MIC-1 contra una cantidad o un rango de cantidades de MIC-1 presente en la (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) tomada (s) del mismo sujeto (s) normal (es) ;

en donde la cantidad de MIC-1 presente en la etapa (i) se eleva en comparación con la cantidad o rango de cantidades de MIC-1 presente en dicha (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) .

10. El método de la reivindicación 6, en donde la cantidad elevada de MIC-1 en la muestra corporal de prueba se detecta por comparación con un sujeto con enfermedad renal en la etapa terminal mediante:

(i) determinación de la cantidad de MIC-1 presente en la citada muestra corporal de prueba; y

(ii) comparación de dicha cantidad de MIC-1 contra una cantidad o un rango de cantidades de MIC- I presente en la (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) tomada (s) de al menos otro sujeto que ha sido diagnosticado con enfermedad renal terminal; de tal manera que cuando la cantidad de MIC-1 presente en la etapa (i) se eleva en comparación con la cantidad o rango de cantidades de MIC-1 presente en dicha (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) , el sujeto de prueba tiene un aumento de la probabilidad de muerte en comparación con al menos otro sujeto.

11. Un método de evaluación de un sujeto de prueba de CDK terminal sometido a diálisis para la tolerancia de dicha diálisis, comprendiendo el método la detección de una cantidad elevada de MIC-1 en una muestra corporal de prueba de dicho sujeto, en donde la cantidad elevada de MIC-1 se asocia con una baja tolerancia a la diálisis.

12. El método de la reivindicación 11, en donde el método comprende las siguientes etapas:

(i) determinación de la cantidad de MIC-1 presente en una muestra corporal de prueba de dicho sujeto; y

(ii) comparación de dicha cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) contra una cantidad o un rango de cantidades de MIC-1 presente en la (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) tomadas de dicho sujeto de prueba en un momento al comienzo antes o después del comienzo de dicha diálisis, o sujeto (s) control con enfermedad renal terminal con tolerancia a diálisis a largo plazo, de tal manera que cuando la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) es una cantidad elevada en comparación con la cantidad o rango de cantidades de MIC-1 presente en dicha (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) , es probable que el sujeto tenga una baja tolerancia a la diálisis, y cuando la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) es menos de o equivalente a la cantidad o rango de cantidades de MIC-1 presente en dicha (s) muestra (s) corporal (es) comparativa (s) , es probable que el sujeto tolere la diálisis; o

(iii) comparación de dicha cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) con una cantidad de referencia de MIC-1 que se asocia con la tolerancia a largo plazo a la diálisis, de tal manera que cuando la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) es una cantidad elevada en comparación con la cantidad de referencia de MIC-1, es probable que el sujeto tenga una baja tolerancia a la diálisis, y cuando la cantidad de MIC-1 determinada en la etapa (i) es menos de o equivalente a la cantidad de referencia de MIC-1, es probable que el sujeto tolere la diálisis.

13. El método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en donde el método además comprende la detección al menos un predictor de la mortalidad seleccionado del grupo que consiste de índice de masa corporal (BMI)

disminuido, índice de masa corporal de componente de grasa disminuido (FBMI) , puntuación de evaluación global nutricional (SGA) disminuida, una mayor pérdida de peso, aumento del nivel de proteína reactiva-C en suero (CRP) , aumento del nivel de fibrinógeno, y aumento del nivel de 8- hidroxideoxiguanosina (8-OHdG) ; en donde el o los predictores de la mortalidad son iguales a o más allá de un punto de partida pre-determinado.

14. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la muestra corporal de prueba se 10 selecciona del grupo que consiste de sangre, plasma, suero y orina.

15. El método de la reivindicación 14, en donde la cantidad elevada de MIC-1 es o corresponde a un nivel de MIC-1 en suero de más de 6000 pg/ml.

16. El método de la reivindicación 14, en donde la cantidad elevada de MIC-1 es o corresponde a un nivel de MIC-1 en suero de más de 7000 pg/ml.

17. El método de reivindicación 14, en donde la cantidad elevada de MIC-1 es o corresponde a un nivel de MIC-1 en suero de más de 14000 pg/ml.