Método para detectar polimorfismos en el gen de la ABCB1 asociados con una falta de respuesta a un medicamento activo en el SNC y medicamento que comprende un agente inhibidor de la ABCB1 para su uso en el tratamiento de enfermedades relacionadas con el SNC.

Un método in vitro para determinar el pronóstico de una respuesta clínica en un paciente humano a unmedicamento activo en el sistema nervioso central (SNC) que es un substrato de la proteína ABCB1,

en el que sedetermina la presencia de por lo menos un polimorfismo en el gen de la ABCB1 de dicho paciente, en el que dichopolimorfismo está asociado con una respuesta clínica retrasada, parcial, sub-óptima o ausente a dichomedicamento, en el que el polimorfismo está situado dentro del exón 29, del intrón 5, 13, 21, 22 o 23 o de lasecuencia 3'UTR del gen de la ABCB1 humana.

Método para detectar polimorfismos en el gen de la ABCB1 asociados con una falta de respuesta a un medicamento activo en el SNC y medicamento que comprende un agente inhibidor de la ABCB1 para su uso en el tratamiento de enfermedades relacionadas con el SNC

El presente invento se refiere a unos métodos para determinar el pronóstico de una respuesta clínica en un paciente humano a un medicamento que actúa en el sistema nervioso central (SNC, acrónimo de central nervous system) y que es un substrato de la proteína ABCB1. Además, el invento se refiere a una composición terapéutica y a un estuche terapéutico destinado a usarse en el tratamiento de pacientes humanos que tienen unos polimorfismos específicos en el gen de la ABCB1.

La depresión es un trastorno médico muy corriente, con prevalencias durante toda una vida de hasta 14 %, afectando de esta manera a millones de personas por todo el mundo. Mientras que los antidepresivos constituyen el tratamiento más efectivo para trastornos depresivos, todavía hay una necesidad sustancial de mejoramiento de la terapia. Hasta ahora, no hay criterios objetivos para la elección del tratamiento óptimo con antidepresivos para un paciente individual. Los pacientes deprimidos son tratados por lo tanto sobre una base de tanteo, dando como resultado una tasa de fallo de un único intento de tratamiento en hasta un 30-40 %, incluso en la presencia de unos niveles en plasma suficientemente altos 1. Sin embargo, unos niveles de fármacos en plasma, que se consideran como que incitan una respuesta clínica pueden, sin embargo, no traducirse en unos adecuados niveles intracerebrales de fármacos en todos los pacientes a causa de unas actividades de moléculas transportadoras expresadas junto a la membrana luminal de las células endoteliales que revisten a los pequeños capilares sanguíneos que forman la barrera hematoencefálica. Una de las moléculas más estudiadas de esta última clase es una glicoproteína p 2, 3. Una glicoproteína p es un miembro de la superfamilia altamente conservada de proteínas transportadoras 4 de una casete de fijación de ATP (ABC) . En seres humanos, esta glicoproteína p de 170 kDa es codificada en el cromosoma 7 por el gen de la ABCB1, también conocido como el gen de resistencia a múltiples fármacos (MDR1, acrónimo de multidrug resistance 1) 5, 6. Esta proteína de membrana plasmática transporta activamente sus substratos frente a un gradiente de concentraciones. Una glicoproteína p actúa como una bomba de eflujo activa para compuestos xenobióticos, así como para substratos endógenos tales como algunos esteroides 7, 8.

Se encontró que la proteína ABCB1 está implicada en la asimilación de citalopram y trimipramina dentro del cerebro de ratones. Se especuló sobre que unas diferencias interindividuales en la actividad del gen de la ABCB1 puede responder en parte de la gran variación en la respuesta clínica a antidepresivos en pacientes psiquiátricos, incluso con unos comparables niveles en plasma 26. Sin embargo, no hay ninguna sugerencia de que existan en el gen de la ABCB1 unos polimorfismos que están asociados con una falta de respuesta clínica a ciertos medicamentos. Un estudio adicional mostró una diferente intensificación de la penetración de los antidepresivos doxepina, venlafaxina y paroxetina en el cerebro de ratones con una mutación de supresión de la respuesta inmune (knockout) abcb1ab 29. Sin embargo, no se describen unos polimorfismos en el gen de la ABCB1 con una respuesta clínica a ciertos medicamentos.

Una investigación de polimorfismos en el gen de la ABCB1 y de una manía inducida por antidepresivos mostró que no había ninguna asociación entre una manía inducida por antidepresivos y unos alelos o genotipos de la ABCB1 30. Parece ser que estos resultados indican que unos polimorfismos en el gen de la ABCB1 no tienen importancia clínica. Además, un reciente artículo recopilativo indica que los efectos anteriormente informados de los polimorfismos en el gen de la ABCB1 han resultado ser inconsistentes y en algunos casos conflictivos 31.

El documento de solicitud de patente internacional WO 01/09183 describe unos polimorfismos en el gen de la ABCB1 humana destinados a su uso en ensayos de diagnóstico con el fin de mejorar una terapia con fármacos consagrados y ayudar a correlacionar unos genotipos con la actividad de un fármaco y efectos colaterales del mismo. Este documento no describe unos polimorfismos asociados con la respuesta clínica a antidepresivos. El documento de solicitud de patente de los EE.UU. US 2001/0034023 se refiere generalmente a unos métodos para identificar unas variaciones de secuencias en diferentes genes con el fin de averiguar la eficacia y la seguridad de unas terapias médicas. Aunque se mencionan unos SNPs en el gen de la ABCB1, no existe ninguna evidencia de polimorfismos específicos que estén asociados con la respuesta clínica a antidepresivos.

Por lo tanto, hasta ahora, no se han identificado en el gen de la ABCB1 unos polimorfismos que tengan una asociación manifiesta y significativa con la respuesta clínica a ciertos medicamentos que actúan en el sistema nervioso central y que son substratos para la proteína ABCB1.

En este estudio se ensayó si tres antidepresivos corrientemente usados son substratos de una glicoproteína p, usando unos ratones transgénicos que carecen de los homólogos de la ABCB1 y sus crías de la misma camada de tipo salvaje. Luego, se investigó la asociación de polimorfismos de nucleótidos únicos (SNPs, acrónimo de single nucleotide polymorphisms) en el gen de la ABCB1 con la respuesta clínica a fármacos antidepresivos en 255 pacientes deprimidos.

Sorprendentemente, se identificaron en el gen de la ABCB1 unos polimorfismos, situados particularmente en los intrones de los genes, que tienen una asociación manifiesta y estadísticamente relevante con una respuesta clínica insuficiente, p.ej. un estado de alivio de las seis semanas de tratamientos con los antidepresivos citalopram, paroxetina y/o venlafaxina. La determinación de los genotipos de estos polimorfismos permite predecir la respuesta clínica a un substrato de la ABCB1 con una certidumbre de más de un 75 %, abriendo una ruta hacia el diagnóstico y unos métodos terapéuticos basados en los genotipos.

Un primer aspecto del invento se refiere a un método in vitro para determinar el pronóstico de una respuesta clínica en un paciente humano a un medicamento activo en el sistema nervioso central (SNC) , que es un substrato de la proteína ABCB1, en el que se determina la presencia de por lo menos un polimorfismo en el gen de la ABCB1 de dicho paciente, en el que dicho polimorfismo está asociado con una respuesta clínica retrasada, parcialmente subóptima o ausente a dicho medicamento, y en el que el polimorfismo está situado dentro del exón 29, del intrón 5, 13, 21, 22 o 23 o de la secuencia 3’UTR del gen de la ABCB1 humana.

También se describe una composición o un estuche de diagnóstico para el pronóstico de una respuesta clínica en un paciente humano a un medicamento activo en el SNC, que es un substrato de la proteína ABCB1, que comprende por lo menos un cebador o una sonda para determinar por lo menos un polimorfismo en el gen de la ABCB1 en dicho paciente, en el que dicho polimorfismo está asociado con una respuesta clínica retrasada, parcialmente subóptima o ausente a dicho medicamento.

Además se describe una micromatriz para el pronóstico de una respuesta clínica en un paciente humano a un medicamento activo en el SNC, que es un substrato de la proteína ABCB1 que comprende un vehículo que tiene inmovilizada en el por lo menos una sonda para determinar por lo menos un polimorfismo en el gen de la ABCB1 en dicho paciente, en la que dicho polimorfismo está asociado con una respuesta clínica retrasada, parcialmente subóptima o ausente a dicho medicamento.

Además, se describe un cebo o una sonda para el pronóstico de una respuesta clínica en un paciente humano a un medicamento activo en el SNC, que es un substrato de la proteína ABCB1 que comprende un vehículo que tiene inmovilizado en él por lo menos una sonda para determinar por lo menos un polimorfismo en el gen de la ABCB1 en dicho paciente, en el o la que dicho polimorfismo está asociado con una respuesta clínica retrasada, parcialmente sub-óptima o ausente a dicho medicamento.

Finalmente, un aspecto adicional del invento se refiere a una composición terapéutica o un estuche terapéutico como se definen en la reivindicación 14.

El presente invento describe por primera vez en el gen de la ABCB1 humana unos polimorfismos, que tienen una asociación estadísticamente significativa con una respuesta clínica retrasada, parcialmente sub-óptima o ausente... [Seguir leyendo]

1. Un método in vitro para determinar el pronóstico de una respuesta clínica en un paciente humano a un medicamento activo en el sistema nervioso central (SNC) que es un substrato de la proteína ABCB1, en el que se determina la presencia de por lo menos un polimorfismo en el gen de la ABCB1 de dicho paciente, en el que dicho polimorfismo está asociado con una respuesta clínica retrasada, parcial, sub-óptima o ausente a dicho medicamento, en el que el polimorfismo está situado dentro del exón 29, del intrón 5, 13, 21, 22 o 23 o de la secuencia 3’UTR del gen de la ABCB1 humana.

2. El método de la reivindicación 1, en el que el polimorfismo se selecciona entre el conjunto que consiste en los rs 2235015, rs 2235040, rs 2235067, rs 2032583, rs 17064, rs 2032588, rs 1055302, y combinaciones de los 10 mismos.

3. El método de la reivindicación 2, en el que el polimorfismo es el rs 2235015 o rs 2235040.

4. El método de la reivindicación 3, en el que el polimorfismo es el rs 2235015.

5. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en el que el polimorfismo es determinado por un análisis de determinación de genotipos.

6. El método de la reivindicación 5, en el que el análisis de determinación de genotipos comprende el uso de cebadores y/o sondas que son específicos/as para un polimorfismo.

7. El método de la reivindicación 6, en el que el análisis de determinación de genotipos comprende una reacción de extensión de un cebador.

8. El método de la reivindicación 6 o 7, en el que los cebadores y/o las sondas comprenden por lo menos una 20 secuencia como se muestra en las Tablas 3, 4 y 5.

9. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 6-8, en el que el análisis de determinación de genotipos comprende un análisis de micromatrices.

10. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 6-8, en el que el análisis de determinación de genotipos comprende un análisis por espectrometría de masas.

11. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en el que el medicamento se selecciona entre el conjunto que consiste en antidepresivos, ansiolíticos, hipnóticos, intensificadores cognitivos, antipsicóticos, agentes neuroprotectores, antieméticos, antiepilépticos, antibióticos, agentes anticancerosos, antimicóticos, agentes contra la enfermedad de Parkinson, agentes antivíricos, glucocorticoides, inmunosupresores, estatinas, neurolépticos y opioides.

12. El método de la reivindicación 11, en el que el medicamento es un antidepresivo.

13. El método de la reivindicación 12, en el que el antidepresivo es citalopram, venlafaxina y/o paroxetina.

14. Una composición terapéutica o un estuche terapéutico para usarse en un método de tratamiento de un paciente humano que tiene por lo menos un polimorfismo en el gen de la ABCB1, que está asociado con una respuesta retrasada, parcial, sub-óptima o ausente a un medicamento activo en el SNC y en el que el polimorfismo está

situado dentro del exón 29, del intrón 5, 13.

2. 23 o de la secuencia 3’UTR del gen de la ABCB1 humana, y en el que el método de tratamiento comprende: determinar el pronóstico de una respuesta clínica en el paciente humano de acuerdo con el método de la reivindicación 1, en el que la composición terapéutica o el estuche terapéutico comprende:

(a) un medicamento activo en el SNC, que es un substrato de la proteína ABCB1, seleccionado entre antidepresivos, ansiolíticos, hipnóticos, intensificadores cognitivos, antipsicóticos, antieméticos, antiepilépticos, agentes contra la enfermedad de Parkinson, neurolépticos y opioides; y

(b) un medicamento adicional que es un inhibidor de la proteína ABCB1.

15. La composición terapéutica o el estuche terapéutico de acuerdo con la reivindicación 14, en la/el que los antidepresivos se seleccionan entre amitriptilina, citalopram, doxepina, flesinoxano, nortriptilina, paroxetina, trimipramina y venlafaxina, los ansiolíticos se seleccionan entre alprazolam, bromazepam, clonazepam, diazepam, lorazepam, halazepam, clorodiazepóxido,

buspirona, azapirona, pagoclone, prazosina, biperideno y kava kava, los hipnóticos se seleccionan entre secobarbital, pentobarbital, metacualona, etoclorovinol, hidrato de cloral y meprobamato, los intensificadores cognitivos se seleccionan entre acetil L-carnitina, adrafinilo, aniracetam, deprenilo, galantamina, hidergina, idebenona, modafinilo, picamilon, piracetam, piritinol, vasopresina y vinpocetina, los antipsicóticos se seleccionan entre risperidona, olanzapina, quetiapina, ziprasidona, cloropromazina, flufenazina, trifluoparazina, perfenazina,

tioridazina, haloperidol, tiotixeno, molindona, loxapina, clozapina, olanzapina, quetiapina, risperidona, sertindol, ziprasidona, amisulpida, aripriprazol, benperidol, cloropromazina, clorprotixeno, flupentixol, fluspirileno, levomepromazina, benperidol, melperona, perazina, perfenazina, pimozida, pipamperona, sulpirida, triflupromazina, zotepina y zuclopentixol, los ntieméticos se seleccionan entre domperidona y ondansetrona, los antiepilépticos se seleccionan entre carbamazepina, felbamato, lamotrigina, fenobarbital y fenitoína, los agentes contra la enfermedad

de Parkinson se seleccionan entre budipina y L-Dopa, los neurolépticos se seleccionan entre olanzapina, quetiapina, risperidona y sulpirida, y/o los opioides se seleccionan entre fentanil y morfina.