Especies bifidobacterianas.

Bifidobacterium GC61 depositada en la CNCM el 9 de enero de 2007 con número de acceso CNCMI-3712.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2008/058490.

Solicitante: UNIVERSITE DE LIEGE.

Nacionalidad solicitante: Bélgica.

Dirección: Liège Science Park Avenue Pré-Aily 4 4031 Angleur BELGICA.

Inventor/es: POT, BRUNO, DAUBE,GEORGES, DELCENSERIE,VERONIQUE, GAVINI,FRANCOISE, FRANSSEN,CHRISTINE.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A23C9/123 SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A23 ALIMENTOS O PRODUCTOS ALIMENTICIOS; SU TRATAMIENTO, NO CUBIERTO POR OTRAS CLASES.A23C PRODUCTOS LáCTEOS, p. ej. LECHE, MANTEQUILLA, QUESO; SUCEDANEOS DE LA LECHE O DEL QUESO; SU FABRICACION (obtención de composiciones a base de proteínas para la alimentación A23J 1/00; preparación de péptidos, p. ej.de proteinas, en general C07K 1/00). › A23C 9/00 Preparados a base de leche; Leche en polvo o preparados a base de leche en polvo (A23C 21/06 tiene prioridad; conservación A23C 3/00; leche chocolateada A23G 1/00; helados, mezclas para la preparación de helados A23G 9/00; polvos para flanes o postres A23L 1/187). › que utilizan solamente microorganismos de la familia de las lactobacterias; Yogur (A23C 9/13 tiene prioridad).
  • C12N1/20 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Bacterias; Sus medios de cultivo.

PDF original: ES-2431572_T3.pdf

 


Fragmento de la descripción:

Especies bifidobacterianas La invención se refiere a una bacteria que pertenece al género Bifidobacterium, a composiciones probióticas que comprenden dicha bacteria, particularmente productos alimenticios, y al uso de dicha bacteria en el tratamiento de enfermedades, tales como enfermedades gastrointestinales.

Las bifidobacterias (o bacterias que pertenecen al género Bifidobacterium) constituyen una de las poblaciones más importantes de la flora fecal humana y animal. Generalmente se considera una indicación de buena salud cuando estas bacterias están presentes en una elevada tasa en la flora fecal. Por este motivo, se conocen como bacterias probióticas (microorganismos beneficiosos que mejoran el equilibrio natural de la flora intestinal cuando se ingieren vivos) . Ejemplos de bifidobacterias conocidas incluyen B. adolescentis, B. animalis, B. bifidum, B. breve, B. catenulatum y B. longum, que han demostrado tener efectos tecnológicos, organolépticos y probióticos beneficiosos.

Las bifidobacterias se hallan muy habitualmente como aditivo en leches fermentadas (yogures con "Bifidus activo") y por tanto constituyen un producto económicamente importante. Las cepas elegidas por la industria láctea deben cumplir numerosos requisitos estrictos, tales como resistencia al proceso de fabricación y supervivencia dentro del producto alimenticio. Las especies más habitualmente usadas en Francia son B. animalis subsp. lactis y B. animalis subsp. animalis, que es una subespecie de origen animal, nunca aislada de seres humanos. En vista de la importancia de las bifidobacterias, existe la gran necesidad de identificar nuevas especies dentro de este género que tengan propiedades que cumplan de forma óptima los requisitos de la industria alimentaria. Por ejemplo, en 2004, un grupo identificó y aisló Bifidobacterium psychraerophilum de un ciego porcino (Simpson, PJ. et al. (2004) Int J Syst Evol Microbiol 54: 401-6) . La Bifidobacterium previamente conocida solamente era capaz de crecer a temperaturas entre 20 ºC y 46-49, 5 ºC (Biavati, B. et al., (2000) , Annals of Microbiology 50: 117-131; Dong et al., (2000) Int J Syst Evol Microbiol 50 Pt 1:119-25) , sin embargo, Bifidobacterium psychraerophilum mostró una ventaja sobre todas las especies previas creciendo a entre 4 y 10 ºC. Esto es beneficioso para composiciones probióticas ya que las bacterias tienen mayor probabilidad de sobrevivir a las bajas temperaturas de almacenamiento de dichos productos y por lo tanto prolongarían la vida útil del producto. Por tanto existe la gran necesidad de identificar especies bifidobacterianas adicionales, que no solamente tengan ventajas únicas sino que también retengan los beneficios de las especies bifidobacterianas previamente identificadas.

De acuerdo con un primer aspecto de la invención, se proporciona Bifidobacterium GC61 depositada en la CNCM el 9 de enero de 2007 con el número de acceso CNCMI-3712 y Bifidobacterium GC61 depositada en la CNCM el 9 de enero de 2007 con el número de acceso CNCMI-3713 o un homólogo de la misma.

GC61 representa una nueva especie de Bifidobacterium. Las expresiones GC61, grupo GC61, Bifidobacterium GC61 y Bifidobacterium vercorsense se usan de forma intercambiable para hacer referencia a esta nueva especie de Bifidobacterium.

Ejemplos de cepas de GC61 analizadas en este documento incluyen FR41/2, FR49/f/2, FR101/h/8, MarV3/22, FR39/1, MarV4/2, MarV1/5, FR66/e/1, MarC1/13, MarF/3, PicD/1, FR70/g/2 y FR47/2. Los genes de ARNr 16S de las cepas FR41/2, FR49/f/2 y FR101/h/8 se han secuenciado y se nombran como ID de secuencia Nº 1 para el gen de ARNr 16S de FR101/h/8; ID de secuencia Nº 2 para el gen de ARNr 16S de FR41/2; e ID de secuencia Nº 3 para 45 el gen de ARNr 16S de FR49/f/2.

Se hizo un depósito de Bifidobacterium GC61 cepa FR41/2 en la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM) en el Institut Pasteur en París el 9 de enero de 2007, a este depósito se le concedió el número de acceso CNCMI-3712.

Se hizo un depósito de Bifidobacterium GC61 cepa FR49/f/2 en la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM) en el Institut Pasteur en París el 9 de enero de 2007, a este depósito se le concedió el número de acceso CNCMI-3713.

En la presente invención, un homólogo de GC61 puede definirse por referencia al grado de homología de secuencia en el gen 16 de ADN. Una bacteria en la que la secuencia del ADNr 16S se más del 98 % homóloga al gen del ADNr 16S de GC61 puede describirse como un homólogo de GC61. La secuencia del ADNr 16S de GC61 puede ser la secuencia consenso de ADNr 16S mencionada en la Figura 1A (ID de secuencia Nº 4) o puede tener la secuencia del ADNr 16S de cualquier cepa GC61 de la presente invención. Asimismo, o como alternativa, una bacteria que 60 tiene un gen hsp60 con más del 90 % de homología de secuencia con la secuencia del gen hsp60, o con la secuencia consenso del gen hsp60, en GC61 puede describir como un homólogo de GC61. Preferiblemente, la secuencia consenso del gen hsp60 es la secuencia identificada en la Figura 3. Preferiblemente se usa la secuencia del ADNr 16S o la secuencia de hsp60 de la cepa FR41/2 o FR49/f/2 de GC61 cuando se determina el grado de homología de secuencia.

Los homólogos de GC61 pueden ser de origen natural o pueden producirse de forma artificial, por ejemplo por manipulación genética.

GC61 se aisló de leche sin procesar durante el proceso de fabricación del queso "L'etoile du Vercors" que se hace mediante un proceso tradicional y manual. GC61 está presente durante todo el proceso de producción del queso (es decir desde la leche sin procesar hasta el final de la maduración) , con un aumento estadísticamente significativo durante el proceso. Estas bacterias pertenecen a una población microbiana natural que participa en el desarrollo de las propiedades organolépticas del producto.

GC61 tiene la ventaja de aislarse de un proceso de producción de alimentos mientras que muchas especies bifidobacterianas previamente aisladas se han extraído de los tractos digestivos de seres humanos o animales, por tanto GC61 es más fácil de integrar en el proceso de fabricación y también es más fácil de estabilizar en productos alimenticios y fermentados que muchas otras especies bifidobacterianas.

También se ha descubierto que GC61 es psicotrópica y es capaz de crecer a temperaturas tan bajas como aproximadamente 12 ºC. La ventaja clave de crecer a bajas temperaturas es que las bacterias GC61 tienen mayor probabilidad de sobrevivir a bajas temperaturas de almacenamiento que la mayoría de las demás composiciones bacterianas probióticas, lo que por lo tanto prolongaría su vida útil. Ventajas adicionales de las bacterias GC61 son que proporcionan una buena resistencia a la acidez del estómago, las sales biliares y a las enzimas intestinales (pepsina) .

Una ventaja adicional más de las bacterias GC61 es que son resistentes al aire/oxígeno, es decir, son aerotolerantes.

Una ventaja adicional más de las bacterias GC61, y la cepa FR49/f/2 en particular, es que tienen un sorprendente efecto inmunomodulador, y pueden causar un elevado nivel de producción de la citoquina IL10, pero un bajo nivel de IL12. Esta proporción de IL10 a IL12 es indicativa de las propiedades anti-inflamatorias. Las propiedades antiinflamatorias también se demostraron in vivo en un modelo experimental de colitis en ratones.

La Bifidobacterium GC61 puede estar en forma de células viables.

Además, o como alternativa a las células viables, pueden ser útiles cultivos muertos de Bifidobacterium GC61 que contienen factores beneficiosos expresados por las células de Bifidobacterium GC61.

La Bifidobacterium GC61 puede estar en forma de un cultivo biológicamente puro.

Los mutantes de Bifidobacterium GC61 incluyen cepas con cambios conservativos o degenerativos en el código genético. Los mutantes pueden ser de origen natural o diseñarse por ingeniería genética.

De acuerdo con un segundo aspecto de la invención, se proporciona una composición que comprende Bifidobacterium GC61 como se ha definido anteriormente en este documento y uno o más excipientes aceptables. Preferiblemente, la composición es una composición probiótica.

Se apreciará que un excipiente aceptable será bien conocido para los especialistas en la técnica de la preparación 45 de composiciones probióticas.

Ejemplos de excipientes aceptables incluyen: azúcares tales como sacarosa, azúcar isomerizado, glucosa, fructosa, palatinosa, trehalosa, lactosa y xilosa; alcoholes de azúcar tales como sorbitol, xilitol, eritritol, lactitol, palatinol, jarabe glutinoso reducido de almidón y jarabe glutinoso reducido de maltosa; emulsionantes tales como ésteres... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Bifidobacterium GC61 depositada en la CNCM el 9 de enero de 2007 con número de acceso CNCMI-3712.

2. Bifidobacterium GC61 depositada en la CNCM el 9 de enero de 2007 con número de acceso CNCMI-3713.

3. Una cepa de Bifidobacterium que tiene un gen de ARNr 16S con más de un 98 % de homología de secuencia de ADN con el gen de ARNr 16S (SEC ID Nº 4) de Bifidobacterium GC61 de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2.

4. Una cepa de Bifidobacterium que tiene un gen hsp60 con más del 90 % de homología de secuencia de ADN con el gen hsp60 (SEC ID Nº 5) de Bifidobacterium GC61 de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

5. Una composición probiótica que comprende Bifidobacterium GC61 de acuerdo con la reivindicación 1 o 2 o una 15 cepa de Bifidobacterium de acuerdo con la reivindicación 3 ó 4 y uno o más excipientes aceptables.

6. Una composición probiótica como se ha definido en la reivindicación 5 en donde dicha composición es un producto alimenticio.

7. Una composición probiótica como se ha definido en la reivindicación 6 en donde dicho producto alimenticio es un producto de base láctea seleccionado entre leche fermentada, leche vegetal, leche de soja, mantequilla, queso y yogur.

8. Bifidobacterium de acuerdo con la reivindicación 1 o 2 o una cepa de Bifidobacterium de acuerdo con la reivindicación 3 o 4 para su uso como sustancia terapéutica o profiláctica, en particular en el tratamiento y/o la profilaxis de una o más de enfermedades gastrointestinales, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, trastornos inflamatorios, inmunodeficiencia, enfermedad inflamatoria del intestino, síndrome del intestino irritable, cáncer (particularmente de los sistemas gastrointestinal e inmune) , enfermedad diarreica, diarrea asociada con antibióticos, diarrea pediátrica, apendicitis, trastornos autoinmunes, esclerosis múltiple, enfermedad de Alzheimer, artritis reumatoide, enfermedad celíaca, diabetes mellitus, rechazo de un órgano transplantado, infecciones bacterianas, infecciones víricas, infecciones fúngicas, enfermedad periodontal, enfermedad urogenital, enfermedad de transmisión sexual, infección por VIH, replicación del VIH, diarrea asociada con el VIH, traumatismo asociado a cirugía, enfermedad metastásica inducida por cirugía, sepsis, pérdida de peso, anorexia, control de la fiebre, caquexia, curación de heridas, úlceras, función de barrera intestinal, alergia, asma, trastornos respiratorios,

trastornos circulatorios, cardiopatía coronaria, anemia, trastornos del sistema de coagulación de la sangre, enfermedad renal, trastornos del sistema nervioso central, enfermedad hepática, isquemia, trastornos nutricionales, osteoporosis, trastornos endocrinos, trastornos epidérmicos, psoriasis; acné vulgar y/o exceso de colesterol.

9. Uso de Bifidobacterium de acuerdo con la reivindicación 1 o 2 o una cepa de Bifidobacterium de acuerdo con la reivindicación 3 o 4 en la preparación de un medicamento para el tratamiento y/o la profilaxis de una o más de enfermedades gastrointestinales, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, trastornos inflamatorios, inmunodeficiencia, enfermedad inflamatoria del intestino, síndrome del intestino irritable, cáncer (particularmente de los sistemas gastrointestinal e inmune) , enfermedad diarreica, diarrea asociada con antibióticos, diarrea pediátrica, apendicitis, trastornos autoinmunes, esclerosis múltiple, enfermedad de Alzheimer, artritis reumatoide, enfermedad celíaca,

diabetes mellitus, rechazo de un órgano transplantado, infecciones bacterianas, infecciones víricas, infecciones fúngicas, enfermedad periodontal, enfermedad urogenital, enfermedad de transmisión sexual, infección por VIH, replicación del VIH, diarrea asociada con el VIH, traumatismo asociado a cirugía, enfermedad metastásica inducida por cirugía, sepsis, pérdida de peso, anorexia, control de la fiebre, caquexia, curación de heridas, úlceras, función de barrera intestinal, alergia, asma, trastornos respiratorios, trastornos circulatorios, cardiopatía coronaria, anemia,

trastornos del sistema de coagulación de la sangre, enfermedad renal, trastornos del sistema nervioso central, enfermedad hepática, isquemia, trastornos nutricionales, osteoporosis, trastornos endocrinos, trastornos epidérmicos, psoriasis; acné vulgar y/o exceso de colesterol.

10. Una composición que comprende Bifidobacterium GC61 de acuerdo con la reivindicación 1 o 2 o una cepa de 55 Bifidobacterium de acuerdo con la reivindicación 3 o 4 junto con un agente o agentes terapéuticos adicionales.

11. Bifidobacterium GC61 de acuerdo con la reivindicación 1 o 2 o una cepa de Bifidobacterium de acuerdo con la reivindicación 3 o 4, para su uso como, o en la preparación de, un probiótico o un medicamento inmunomoduladores y/o anti-inflamatorios.

12. Uso de Bifidobacterium GC61 de acuerdo con la reivindicación 1 o 2 o una cepa de Bifidobacterium de acuerdo con la reivindicación 3 o 4, en la preparación de un medicamento para el tratamiento de la inflamación en un sujeto mamífero.

Glóbulos rojos Glóbulos blancos


 

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