Variantes de la endonucleasa doméstica I-CreI que tienen nueva especifidad de escisión y uso de las mismas.
Un procedimiento para someter a ingeniería una variante de endonucleasa doméstica I-CreI que tieneuna especificidad de escisión modificada en las posiciones 8 y 9 del sitio diana de I-CreI (SEQ ID NO:
1) quecomprende las etapas de:
(a) sustituir al menos uno de los aminoácidos K28, N30, Y33, Q38 y/o S40 de la horquilla 12 de I-CreI, paramodificar la especificidad de escisión en la posición 8 de dicho sitio diana de I-CreI (SEQ ID NO: 1) con unaminoácido seleccionado del grupo constituido por A, C, D, E, G, H, K, N, P, Q, R, S, T, L, V, W e Y, y/o
(b) sustituir al menos uno de los aminoácidos K28, Y33 y/o S40 de la horquilla 12 de I-CreI, para modificar laespecificidad de escisión en la posición 9 de dicho sitio diana de I-CreI (SEQ ID NO: 1) con un aminoácidoseleccionado del grupo constituido por A, C, D, E, G, H, K, N, P, Q, R, S, T, L, V, W e Y,
(c) seleccionar las variantes de I-CreI de la etapa (a) y/o (b) que son capaces de escindir una secuencia diana deADN constituida por un sitio I-CreI mutante en el que al menos el doblete nucleotídico aa en las posiciones - 9 a - 8y/o el doblete nucleotídico tt en las posiciones + 8 a + 9 se han sustituido por un doblete nucleotídico diferente.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/IB2006/003883.
Solicitante: CELLECTIS.
Nacionalidad solicitante: Francia.
Dirección: 8 rue de la Croix Jarry 75013 Paris FRANCIA.
Inventor/es: PAQUES,FREDERIC.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N9/22 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Ribonucleasas.
PDF original: ES-2393508_T3.pdf
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