Un péptido de una secuencia de aminoácidos expuesta en la SEC ID Nº : 24.

Péptido antigénico de unión a HLA-DR derivado de WT1

Campo técnico

La presente invención se refiere a péptidos antigénicos de unión a HLA-DRB1*0405 derivados de WT 1.

Técnica antecedente

El gen de WT1 (gen de tumor de Wilms 1) se ha identificado como uno de los genes causales del tumor de Wilms, que es un tumor renal infantil (Cell 60: 509, 1990, Nature 343: 774, 1990) . El gen de WT1 codifica el factor de transcripción WT1 que desempeña un papel importante en muchos procesos tales como proliferación, diferenciación y apoptosis de células y desarrollo de tejidos (Int. Rev. Cytol. 181: 151, 1998) . El gen de WT1 se definió originariamente como un gen supresor de tumores. Sin embargo, estudios posteriores pusieron de manifiesto que el gen de WT1 se expresa mucho en leucemia y diversos cánceres sólidos, incluyendo cáncer de pulmón y cáncer de mama, indicando que el gen de WT1 ejerce más bien una función oncogénica que promueve el crecimiento del cáncer. Además, se demostró que, cuando se estimularon células mononucleares de sangre periférica positivas para HLA-A*0201 o HLA-A*2402 in vitro con péptidos derivados de WT1, se indujeron linfocitos T citotóxicos (CTL) específicos de péptido y se destruyeron células leucémicas o de tumores sólidos que expresan endógenamente WT1. Estos resultados demostraron que WT1 es una molécula diana prometedora de la inmunoterapia del cáncer (Int. J. Hematol 76: 127, 2002) .

Se ha descrito que la presencia de células T auxiliares específicas para antígeno de cáncer es esencial para una inducción eficaz de CTL (Cancer. Res. 62: 6438, 2002) .

Las células T auxiliares (células T positivas para CD4) se inducen (se hacen proliferar) y se activan cuando reconocen un complejo de molécula de MHC de clase II y péptido antigénico en células presentadoras de antígeno. Las células T auxiliares activadas producen citocinas tales como IL-2, IL-4, IL-5, IL-6 y/o interferones y median el crecimiento, diferenciación y maduración de células B. Las células T auxiliares activadas también funcionan promoviendo el crecimiento, diferenciación o maduración de otros subconjuntos de células T, tales como células Tc y TD. Por lo tanto, las células T auxiliares activadas pueden activar el sistema inmune a través de la promoción del crecimiento y la activación de células B y T. Por lo tanto, se sugirió que era útil aumentar las funciones de las células T auxiliares que estaban bajo la influencia de péptido antigénico de unión a MHC-clase II (también denominado "péptido auxiliar") , por lo que se aumenta la eficacia (potencia) de la vacuna contra el cáncer en la inmunoterapia del cáncer (terapia de vacuna contra el cáncer) (J. Immunother., 24: 195, 2001) .

En cuanto a los péptidos derivados de WT1, sólo se conoce un péptido antigénico que se une a un subtipo de molécula de MHC de clase II, es decir, HLA-DRB1*0401 (Cancer Immunol. Immunother. 51: 271, 2002) . No hay péptidos derivados de WT1 que se haya descrito que se unen a subtipos diferentes.

Descripción de la invención

El propósito de la presente invención es proporcionar péptidos antigénicos de unión a HLA-DRB1*0405 derivados de WT1, y el uso del péptido como potenciador de la eficacia de vacunas contra el cáncer (un agente para aumentar la eficacia de una vacuna contra el cáncer) .

El presente inventor ha realizado un estudio intensivo sobre péptidos antigénicos derivados de WT1 ("péptidos auxiliares") que tienen una actividad de unión a antígeno de MHC de clase II y que aumentan la eficacia de vacunas contra el cáncer (potencia) en la inmunoterapia del cáncer. En consecuencia, el presente inventor ha descubierto por primera vez que WT1 contiene una porción o porciones peptídicas antigénicas que tienen una actividad de unión a HLA-DRB1*0405 entre varias subclases de MHC de clase II e inducción de células T auxiliares. Este descubrimiento condujo al desarrollo de un nuevo método terapéutico por el que se inducen y se potencian células T auxiliares específicas de WT1 en pacientes con cáncer positivo para HLA-DRB1*0405.

Recientes investigaciones pusieron de manifiesto que existen péptidos auxiliares promiscuos que son péptidos auxiliares capaces de unirse a múltiples moléculas de HLA de clase II e inducir células T auxiliares positivas para CD4 (British J. cancer, 85 (10) , págs. 1527-1534 (2001) ; J. Immunol., 169 págs. 557-565 (2002) ) . El presente inventor realizó una investigación sobre WT1332-347, que es uno de los péptidos antigénicos de unión a HLADRB1*0405 descritos anteriormente (péptidos auxiliares) para elucidar si es o no potencialmente un péptido auxiliar promiscuo. Como resultado, dicho péptido demostró ser un péptido auxiliar promiscuo que se une no sólo a una molécula de HLA-DRB1*0405 sino también a HLA-DRB1*1502. Por lo tanto, el péptido WT1332-347 de la presente invención es un péptido auxiliar aplicable a pacientes que tienen HLA-DRB1*1502, así como a los que tienen HLADRB1*0405. El presente inventor también descubrió que WT1 contiene una porción o porciones de péptido antigénico capaces de unirse a HLA-DRB1*1502, una de varias subclases de MHC de clase II, e inducir células T auxiliares por primera vez.

La presente invención se ha establecido basándose en estos descubrimientos.

La presente invención incluye lo siguiente.

(1) Un péptido que consiste en 10-25 aminoácidos contiguos en la secuencia de aminoácidos de WT1 humano mostrada en la SEC ID Nº : 1, que se une a HLA-DRB1*0405 e induce células T auxiliares.

(2) El péptido del (1) anterior, que comprende una secuencia de aminoácidos expuesta en una cualquiera de las SEC ID Nº : 2-23.

(3) El péptido del (2) anterior, que comprende la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEC ID Nº : 24.

(4) Un péptido de 10-25 aminoácidos, que comprende una secuencia de aminoácidos en la que el resto aminoacídico en la posición 1, 4, 6 y/o 9 de una secuencia de aminoácidos expuesta en una cualquiera de las SEC ID Nº : 2-23 se sustituye por otro resto aminoacídico, y que se une a un HLA-DRB1*0405 e induce células T auxiliares.

(5) El péptido del (4) anterior, que comprende una secuencia de aminoácidos en la que el resto aminoacídico en la posición 1, 4, 6 y/o 9 de una secuencia de aminoácidos expuesta en uno cualquiera de las SEC ID Nº : 2-23 se sustituye por un resto aminoacídico seleccionado de los aminoácidos siguientes:

fenilalanina, tirosina, triptófano, valina, isoleucina, leucina y metionina para la posición 1; valina, isoleucina, leucina, metionina, ácido aspártico y ácido glutámico para la posición 4; asparagina, serina, treonina, glutamina, lisina y ácido aspártico para la posición 6; y ácido aspártico, ácido glutámico y glutamina para la posición 9.

(6) El péptido del (5) anterior, que comprende una secuencia de aminoácidos en la que el resto aminoacídico en la posición 3, 6, 8 y/u 11 de la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEC ID Nº : 24 se sustituye por un resto aminoacídico seleccionado de los aminoácidos siguientes:

fenilalanina, triptófano, valina, isoleucina, leucina y metionina para la posición 3; valina, isoleucina, metionina, ácido aspártico y ácido glutámico para la posición 6; asparagina, serina, treonina, glutamina, lisina y ácido aspártico para la posición 8; y ácido aspártico, ácido glutámico y glutamina para la posición 11.

(7) Un péptido que consiste en 10-25 aminoácidos contiguos en la secuencia de aminoácidos de WT1 humano mostrada en la SEC ID Nº : 1, que se une HLA-DRB1*1502 e induce células T auxiliares.

(8) El péptido del (7) anterior, que comprende una secuencia de aminoácidos expuesta en una cualquiera de las SEC ID Nº : 46-56.

(9) El péptido del (7) anterior, que comprende la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEC ID Nº : 24.

(10) Un péptido que comprende un péptido descrito en uno cualquiera del (1) al (9) anteriores, junto con un péptido antigénico de cáncer.

(11) Un polinucleótido que codifica un péptido descrito en uno cualquiera del (1) al (10) anteriores.

(12) Un vector de expresión que contiene el polinucleótido descrito en el (11) anterior.

(13) Una célula que contiene el vector de expresión descrito en el (12) anterior.

(14) Un proceso para producir un péptido descrito en uno cualquiera del (1) al (10) anteriores, que comprende cultivar la célula descrita en el (13) anterior en la condición en la que puede expresarse el péptido.

(15) Un anticuerpo que se une específicamente a un péptido descrito en uno cualquiera del... [Seguir leyendo]

1. Un péptido de una secuencia de aminoácidos expuesta en la SEC ID Nº : 24.

2. Un polinucleótido que codifica el péptido descrito en la reivindicación 1.

3. Un vector de expresión que contiene el polinucleótido descrito en la reivindicación 2.

4. Una célula que contiene el vector de expresión descrito en la reivindicación 3.

5. Un proceso para producir el péptido descrito en la reivindicación 1, que comprende cultivar la célula descrita en la reivindicación 4, con la condición de que pueda expresarse el péptido.

6. Un anticuerpo que se une específicamente al péptido descrito en la reivindicación 1.

7. Una composición farmacéutica que comprende el péptido descrito en la reivindicación 1, un vector de expresión descrito en la reivindicación 3 o una célula descrita en la reivindicación 4, en asociación con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

8. La composición farmacéutica de la reivindicación 7, que es un agente terapéutico o preventivo para el cáncer.

9. La composición farmacéutica de la reivindicación 7, que es un inductor de células T auxiliares.

10. La composición farmacéutica de la reivindicación 7, que es un potenciador de la eficacia de vacunas contra el cáncer.

11. La composición farmacéutica de la reivindicación 10, en la que la vacuna contra el cáncer es una vacuna de péptido antigénico de cáncer.

12. Uso del péptido descrito en la reivindicación 1, un vector de expresión descrito en la reivindicación 3 o una célula descrita en la reivindicación 4, para la fabricación de un agente terapéutico o preventivo para el cáncer.

13. Una composición farmacéutica que comprende el péptido descrito en la reivindicación 1 en combinación con un péptido antigénico de cáncer.

14. La composición farmacéutica de la reivindicación 13, que se usa para tratar o prevenir el cáncer.

15. Uso de un péptido de la reivindicación 1 en combinación con un péptido antigénico de cáncer en la fabricación de un agente terapéutico o preventivo para el cáncer.