Una emulsión de aceite en agua (Ac/Ag) que comprende:

(1) una disolución acuosa que contiene un antígeno o inmunógeno de vacuna capaz de inducir unarespuesta inmunitaria en un huésped;

(2) un alcohol graso etoxilado lipófilo no iónico;

(3) un aceite mineral;

(4) un tensioactivo hidrófilo no iónico, que es un alcohol graso etoxilado.

Nuevas formulaciones de vacunas

Esta solicitud reivindica prioridad respecto a la solicitud de EE.UU. nº de serie 11/107.000 presentada el 15 de abril, 2005, cuyo contenido se incorpora expresamente en el presente documento por referencia.

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a emulsiones de aceite en agua, a su uso como adyuvantes, y a composiciones farmacéuticas, inmunológicas o de vacunas que las comprenden.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

El uso de adyuvantes en vacunas es bien conocido. Un adyuvante es un compuesto que, cuando se combina con un inmunógeno de vacuna, aumenta la respuesta inmunitaria al inmunógeno de vacuna. Entre las estrategias que promueven la inmunogenicidad de una proteína, glicoproteína o péptido, están las que emulsionan los inmunógenos de vacuna (Nossal 1999, En: Fundamental Immunology. Paul (Ed.) , Lippincott-Raven Publishers, Philadelphia, Pa.; Vogel and Powell, 1995, En: Vaccine Design. The Subunit and Adjuvant Approach. Powell and Newman (Eds.) , Plenum Press, NY, N.Y. pág. 141) . Debido a la función esencial que tienen los adyuvantes en la mejora de la inmunogenicidad de los inmunógenos de vacunas, el uso de adyuvantes en la formulación de vacunas ha sido prácticamente ubicuo (Nossal, 1999, véase antes; Vogel y Powell, 1995, véase antes; cuyas enseñanzas se incorporan en el presente documento por referencia) . Los adyuvantes convencionales, bien conocidos en la materia, son de naturaleza diversa. Pueden consistir, por ejemplo, en sales inorgánicas insolubles en agua, liposomas, micelas o emulsiones, es decir, adyuvante de Freund. Se pueden encontrar otros adyuvantes en Vogel y Powell, 1995, mencionado antes. Aunque no hay un mecanismo de acción único de los adyuvantes, una característica esencial es su capacidad para aumentar significativamente la respuesta inmunitaria a un inmunógeno de vacuna, comparado con la respuesta inducida por el inmunógeno de vacuna solo (Nossal, 1999, véase antes; Vogel y Powell, 1995, véase antes) . En relación con esto, algunos adyuvantes son más eficaces para aumentar las respuestas inmunitarias humorales; otros adyuvantes son más eficaces para aumentar las respuestas inmunitarias mediadas por célula responses (Vogel y Powell, 1995, véase antes) ; y todavía otro grupo de adyuvantes aumenta las respuestas inmunitarias tanto humorales como mediadas por células frente a los antígenos de vacuna (Vogel y Powell, 1995, véase antes) .

En general, las emulsiones usadas en la formulación de vacunas comprenden una mezcla de aceite, disolución acuosa y tensioactivos. Algunas emulsiones incorporan un tensioactivo lipófilo tal como Span 80® y un tensioactivo hidrófilo tal como Tween 80®. Estas emulsiones pueden contener compuestos tales como lecitina o saponina, que se sabe que tienen propiedades tensioactivas.

El documento WO2005/009462 describe emulsiones de aceite en agua que comprenden una disolución acuosa que contiene un inmunógeno, un tensioactivo lipófilo no iónico (tal como Span 85) , un aceite mineral (tal como parafina) y un alcohol graso etoxilado hidrófilo no iónico (tal como Brij 96) .

Sin embargo, se pueden observar problemas de estabilidad con las emulsiones usadas como adyuvantes de vacunas, en particular durante el almacenamiento o el transporte. Las actividades enzimáticas de la lipasa o esterasa presentes en la disolución o suspensión de inmunógeno pueden hidrolizar los tensioactivos de la emulsión y conducir a una falta de estabilidad del adyuvante. Las lipasas o esterasas pueden venir, por ejemplo, del cultivo celular usado para el cultivo de virus o de bacterias. Esto es particularmente cierto cuando estas composiciones contienen inmunógenos concentrados, en especial inmunógenos concentrados no purificados. Típicamente, este es el caso con adyuvantes usados en vacunas inactivadas (muertas) . Este problema es incluso más importante con composiciones de vacunas multivalentes porque los inmunógenos están más concentrados en el mismo volumen de diluyente.

Otro problema con el uso de adyuvante está ligado al riesgo de efectos adversos tales como toxicidad

o inflamación local en el sitio de inyección. Por ejemplo, después de la inyección se puede producir una respuesta inflamatoria local y/o granulomas. Con el fin de limitar dicha reacción adversa, se pueden reducir los tensioactivos y otros componentes en la emulsión; sin embargo, la reducción puede producir entonces una disminución de la estabilidad de la composición de la vacuna. Por lo tanto, son necesario nuevos adyuvantes y composiciones de vacunas que contengan dichos adyuvantes con mayor seguridad y estabilidad.

La cita o identificación de cualquier documento en esta solicitud no es una admisión de que dicho documento está disponible como técnica anterior de la presente invención.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

En una primera realización, la presente invención proporciona una nueva emulsión de aceite en agua (Ac/Ag) , con mayor estabilidad en presencia de suspensiones de bacterias, parásitos o virus, en especial las concentradas y no purificadas o poco purificadas.

Otra realización de la presente invención proporciona una emulsión de aceite en agua (Ac/Ag) estable, segura y fácilmente administrable, en particular inyectable, que actúa como un vehículo para el suministro de una composición farmacéutica, que comprende al menos un principio activo, que puede ser más en particular, un inmunógeno.

Otra realización más de la presente invención proporciona una emulsión Ac/Ag estable, segura e inyectable, que actúa como un adyuvante para aumentar la respuesta inmunitaria inducida por un inmunógeno. En particular, la presente invención proporciona un adyuvante nuevo que, cuando se usa en una composición de vacuna que contiene un inmunógeno, aumenta la respuesta inmunitaria celular, respuesta inmunitaria humoral o, ventajosamente ambas, de la vacuna frente al inmunógeno.

Otra realización más de la presente invención proporciona una composición estable, segura e inmunogénica o vacuna que comprende una emulsión de Ac/Ag.

Otra realización de la presente invención proporciona un procedimiento para hacer una composición de vacuna usando el adyuvante de la presente invención; la composición de vacuna así obtenida; y los procedimientos de uso de la misma.

Otra realización más de la presente invención proporciona un kit que comprende un inmunógeno u otro producto farmacéutico en un primer vial, y un adyuvante hecho de acuerdo con la presente invención en un segundo vial, con el adyuvante diseñado para ser mezclado con el inmunógeno u otro producto de vacuna antes de usar.

En una realización, la presente invención proporciona una emulsión de aceite en agua (Ac/Ag) que puede comprender:

(1) una disolución acuosa que contiene un inmunógeno;

(2) un aceite mineral;

(3) un alcohol graso etoxilado lipófilo no iónico;

(4) un tensioactivo hidrófilo no iónico, que es un alcohol graso etoxilado.

Las emulsiones hechas de acuerdo con la presente invención se basan en una combinación de al menos dos tensioactivos seleccionados de los miembros de dos grupos diferentes de tensioactivos (tensioactivos lipófilos e hidrófilos) , y se puede usar uno o más tensioactivos pertenecientes a cada grupo.

En otra realización ventajosa más, la presente invención proporciona una composición de vacuna que comprende una nueva emulsión que puede contener al menos un inmunógeno adecuado para producir una respuesta inmunológica en un sujeto vacunado. La invención proporciona además dichas composiciones en las que la emulsión actúa como un adyuvante para aumentar la respuesta inmunitaria inducida por el inmunógeno, en particular, para aumentar la respuesta celular, la respuesta humoral o ventajosamente ambas.

En una realización ventajosa, el antígeno o inmunógeno es, o se obtiene de micoplasmas, ventajosamente Mycoplasma hyopneumoniae, porcine circovirus, ventajosamente porcine circovirus 2 o Helicobacter, ventajosamente Helicobacter cerdo o Helicobacter pylori.

En otra realización ventajosa, la presente invención proporciona un procedimiento para hacer una composición de vacuna en la que un inmunógeno, en especial un inmunógeno en forma liofilizada o en una disolución... [Seguir leyendo]

1. Una emulsión de aceite en agua (Ac/Ag) que comprende:

(1) una disolución acuosa que contiene un antígeno o inmunógeno de vacuna capaz de inducir una respuesta inmunitaria en un huésped;

(2) un alcohol graso etoxilado lipófilo no iónico;

(3) un aceite mineral;

(4) un tensioactivo hidrófilo no iónico, que es un alcohol graso etoxilado.

2. La emulsión de la reivindicación 1, en la que el alcohol graso etoxilado lipófilo comprende aproximadamente 43 % (p/p) o menos del peso molecular de óxido de etileno (EO) ; o

en la que el alcohol graso etoxilado lipófilo comprende aproximadamente 43 % (p/p) o menos del peso molecular de óxido de etileno (EO) y en la que el alcohol graso etoxilado es un alcohol graso C9 a C22 y ventajosamente seleccionado del grupo que consiste en un alcohol oleico, cetílico, estearílico, isoestearílico, láurico, y combinaciones de los mismos, ventajosamente un alcohol oleico y más ventajosamente un alcohol oleico etoxilado con 1 a 4 EO; o

en la que el alcohol graso etoxilado hidrófilo comprende más de aproximadamente 43 % (p/p) de óxido de etileno; o

en la que el alcohol graso etoxilado hidrófilo comprende más de aproximadamente 43 % (p/p) de óxido de etileno y

en la que el alcohol graso etoxilado es un alcohol graso C9 a C22 y ventajosamente seleccionado del grupo que consiste en alcohol oleico, cetílico, estearílico, isoestearílico, láurico, y combinaciones de los mismos, ventajosamente un alcohol oleico y más ventajosamente un alcohol oleico etoxilado con 5 a 21 EO; o

en la que el alcohol graso etoxilado hidrófilo no iónico, es Steareth-10, Ceteth-10, Oleth-10, Oleth-20, Steareth- 21, Ceteth-20, Laureth-23, Steareth-20, Oleth-5, Ceteareth-6, Ceteareth-12, Ceteareth-20, Ceteareth-25, Ceteareth- 23, Laureth-9, Ceteth-7, C12-14 Pareth-5, C12-14 Pareth-7, C12-14 Pareth-9, C12-14 Pareth-12, C12-15 Pareth-10, Oleth-7, Ceteth-6, Laureth-21, Laureth-25, Ceteth-15, Ceteth-23, Ceteth-25, Oleth-15, Oleth-50, Beheneth-20 o cualquier combinación de los mismos; o

en la que el alcohol graso etoxilado lipófilo no iónico, es Laureth-4, Oleth-2, Steareth-2, Ceteth-2, C12-13 Pareth- 3, Oleth-3, C12-13 Pareth-4, Steareth-4, C12-15 Pareth-2, C12-15 Pareth-4, C12-14, Pareth-3 o cualquier combinación de los mismos; o

en la que la concentración total de tensioactivos, en peso por volumen de emulsión es de aproximadamente 0, 2 % a aproximadamente 6, 5 %, en particular de aproximadamente 1 % a aproximadamente 6 %, ventajosamente de aproximadamente 1, 5 % a aproximadamente 5 %, más ventajosamente de aproximadamente 2 % a aproximadamente 3 %.

3. La emulsión de la reivindicación 1, en la que el tensioactivo hidrófilo no iónico comprende un alcohol graso etoxilado hidrófilo no iónico, que comprende más de aproximadamente 43 % y menos de aproximadamente 71 % (p/p) de óxido de etileno (EO) y un alcohol graso etoxilado hidrófilo no iónico, que comprende aproximadamente 71 % (p/p) o más de óxido de etileno (EO) .

4. La emulsión de la reivindicación 3, en la que el alcohol graso etoxilado hidrófilo no iónico, que comprende más de aproximadamente 43 % y menos de aproximadamente 71 % (p/p) de óxido de etileno (EO) , es un alcohol oleico etoxilado con 5 a 14 EO; o

en la que el alcohol graso etoxilado hidrófilo no iónico, que comprende aproximadamente 71 % (p/p) o más de óxido de etileno (EO) es un alcohol oleico etoxilado con 15 EO o más; o

en la que la concentración del alcohol graso etoxilado hidrófilo no iónico, que comprende más de aproximadamente 43 % y menos de aproximadamente 71 % (p/p) de óxido de etileno, es de aproximadamente 1, 0 % a aproximadamente 5, 0 %, en particular de aproximadamente 1, 5 % a aproximadamente 4, 5 %, más ventajosamente de aproximadamente 2, 0 % a aproximadamente 3, 5 %, expresado como un porcentaje en peso por volumen de emulsión (p/v) ; o

en la que la concentración del alcohol graso etoxilado hidrófilo no iónico, que comprende aproximadamente 71 % (p/p) o más de óxido de etileno, es de aproximadamente 0, 01 % a aproximadamente 3, 0 %, en particular de aproximadamente 0, 05 % a aproximadamente 2, 5 %, más ventajosamente de aproximadamente 0, 1 % a aproximadamente 2, 0 % (p/v) ; o

en la que la concentración de alcohol graso etoxilado lipófilo no iónico, es de aproximadamente 0, 1 % a aproximadamente 2, 5 %, en particular de aproximadamente 0, 2 % a aproximadamente 2, 0 %, más ventajosamente de aproximadamente 0, 2 % a aproximadamente 1, 5 %, más ventajosamente de aproximadamente 0, 2 % a aproximadamente 1, 2 % (p/v) .

5. La emulsión de la reivindicación 1, en el que la emulsión tiene una temperatura de inversión de fase (PIT) mayor o igual que 25 °C; o

en la que la emulsión tiene una temperatura de inversión de fase (PIT) mayor o igual que 25 °C y en la que la PIT es de aproximadamente 28 °C a aproximadamente 65 °C, más en particular de aproximadamente 33 °C a aproximadamente 60 °C.

6. La emulsión de la reivindicación 1, en la que la emulsión comprende en volumen por volumen de emulsión (v/v) de aproximadamente 2 % a aproximadamente 50 % de fase de aceite que incluye el o los aceites y los tensioactivos, en particular de aproximadamente 4 % a aproximadamente 40 %, ventajosamente de aproximadamente 8 % a aproximadamente 35 % y, más ventajosamente, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 30 % de fase de aceite; o

en la que la emulsión comprende en volumen por volumen de emulsión (v/v) de aproximadamente 2 % a aproximadamente 50 % de fase de aceite que incluye el o los aceites y los tensioactivos, en particular de aproximadamente 4 % a aproximadamente 40 %, ventajosamente de aproximadamente 8 % a aproximadamente 35 % y, más ventajosamente, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 30 % de fase de aceite, y en la que el aceite es un aceite mineral; o

en la que la emulsión comprende en volumen por volumen de emulsión (v/v) de aproximadamente 2 % a aproximadamente 50 % de fase de aceite que incluye el o los aceites y los tensioactivos, en particular de aproximadamente 4 % a aproximadamente 40 %, ventajosamente de aproximadamente 8 % a aproximadamente 35 % y, más ventajosamente, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 30 % de fase de aceite, y en la que el aceite es un aceite mineral, y en la que el aceite mineral es un aceite de parafina tal como aceite isoparafínico y/o aceite nafténico, escualano, escualeno, pristano, poliisobuteno, poliisobuteno hidrogenado, polideceno, poliisopreno, poliisopropeno y similares; o

en la que la emulsión comprende en volumen por volumen de emulsión (v/v) de aproximadamente 2 % a aproximadamente 50 % de fase de aceite que incluye el o los aceites y los tensioactivos, en particular de aproximadamente 4 % a aproximadamente 40 %, ventajosamente de aproximadamente 8 % a aproximadamente 35 % y, más ventajosamente, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 30 % de fase de aceite, y en la que el aceite es un aceite mineral y en la que el aceite mineral comprende una cadena de carbonos lineal o ramificada que tiene un número de átomos de carbono mayor que 15, ventajosamente de 15 a 32, y está exento de compuestos aromáticos; o

en la que el aceite es una mezcla de aceites que comprende al menos dos aceites en cualquier proporción; o

en la que el aceite es una mezcla de aceites que comprende al menos dos aceites en cualquier proporción y en la que la mezcla de aceites comprende al menos un aceite vegetal; o

en la que el aceite es una mezcla de aceites que comprende al menos dos aceites en cualquier proporción y en la que la mezcla de aceites comprende al menos un aceite vegetal, y en la que el aceite vegetal representa de aproximadamente 0, 1 % a aproximadamente 33 % de la fase de aceite, ventajosamente de aproximadamente 5 % a aproximadamente 15 % en v/v; o

en la que el aceite es una mezcla de aceites que comprende al menos dos aceites en cualquier proporción y en la que la mezcla de aceites comprende al menos un aceite vegetal, y en la que el aceite vegetal es aceite de cacahuete, aceite de nuez, aceite de girasol, aceite de cártamo, aceite de soja, aceite de onagra y similares.

7. La emulsión de la reivindicación 1, en la que el antígeno o inmunógeno de vacuna es Mycoplasma hyopneumoniae, porcine circovirus 2 o Helicobacter pylori.

8. La emulsión de la reivindicación 1, que además comprende un copolímero de bloques de polioxietileno-polioxipropileno hidrófilo no iónico.