NANOPARTÍCULAS DE DERIVADOS DE LA GEMCITABINA.

La presente invención tiene como objetivo proponer nuevos derivados de la 2',2'-difluoro-2'-desoxicitidina (gemcitabina) particularmente interesantes por su aptitud para organizarse en estado de nanopartículas. La gemcitabina es un agente anticancerígeno, análogo a la desoxicitidina, activo contra los tumores sólidos de tipo cáncer de colon, de pulmón, de páncreas, de pecho, de vejiga, de ovarios, etc. (Hertel L.W. et al., Cancer Res., 50; 1990, 4417-4422 y Plunkett W. et al., Anticancer Drugs, 6 (Supl. 6); 1995, 7-13). Su estructura química es similar a la de la citarabina (Ara-C), con la excepción de la presencia de dos átomos de flúor geminales localizados en la posición 2' del azúcar desoxirribosa. Esta diferencia estructural tiene por efecto ventajoso aumentar la lipofilia y la permeación membranaria de la molécula de gemcitabina en comparación con la de la citarabina, y por lo tanto conferirle una toxicidad más elevada (Heinemann V. et al., Cancer Res., 48; 1988, 4024-4031). El mecanismo de acción de la gemcitabina se puede explicar como sigue. La gemcitabina se activa a nivel intracelular mediante fosforilación en la posición 5' por acción de la desoxicitidinaquinasa, y se transforma así en su derivado trifosfato. Éste se incorpora entonces en la cadena del ADN en replicación con, como consecuencia, la parada de la elongación de la cadena y la muerte de la célula (Plunkett W. et al., Semin. Oncol., 22 (4 Supl. 11); 1995, 3-10). Sin embargo, la gemcitabina se metaboliza paralelamente, mediante la acción de la desoxicitidina desaminasa, localizada principalmente en la sangre, el hígado y el riñón, en su derivado uracilo que es totalmente inactivo (Heinemann V. et al., Cancer Res., 52; 1992, 533-539). En consecuencia, cuando la gemcitabina se administra por vía intravenosa, posee una actividad anticancerígena no óptima debido a su semi-vida plasmática significativamente reducida (Storniolo A.M. et al., Semin. Oncol., 24 (2 Supl. 7); 1997, S7-2-S7-7). Para proteger la gemcitabina contra esta desaminación, se ha propuesto acoplar de manera covalente su radical amino en la posición 4 con una cadena acíclica. Esta alternativa se considera en particular en la patente EP 986 570 que describe unos ésteres y amidas de la gemcitabina en los que los grupos 3'- y/o 5'-OH y/o el grupo N4-aminado son derivatizados con unas cadenas saturadas o mono-insaturadas de C18 a C20. Sin embargo, el aumento de la actividad anticancerígena observada con estos derivados lipófilos en comparación con la gemcitabina se obtiene, en este caso, en detrimento de su solubilidad en medio acuoso. En efecto, debido a su carácter tan lipófilo, estos derivados son difícilmente compatibles con una administración intravenosa. La presente invención tiene precisamente por objetivo proponer nuevos derivados de la gemcitabina dotados de una actividad anticancerígena superior a la gemcitabina debido a una estabilidad significativa a la metabolización y de una semi-vida plasmática prolongada y que sean sin embargo compatibles con una administración parenteral y en particular intravenosa. Más precisamente, la presente invención se refiere según un primer aspecto, a un derivado de 2'.2'-difluoro-2'desoxicitidina de fórmula general (I): en la que: R1, R2 y R3, idénticos o diferentes, representan, independientemente entre sí, un átomo de hidrógeno o un radical acilo hidrocarbonado por lo menos de C18 acíclico, no lineal, e insaturado y de tal conformación que es capaz de conferir a dicho compuesto de fórmula general (I), una forma compactada en particular de tipo nanoparticulada, en un medio disolvente polar, siendo dicho radical hidrocarbonado un radical escualenoilo o un derivado de éste, y siendo uno por lo menos de los 2 E05857322 09-11-2011   grupos R1, R2 y R3 diferente de un átomo de hidrógeno. La presente invención se refiere según otro de sus aspectos, a unas nanopartículas de derivados de gemcitabina de acuerdo con la presente invención. La presente invención se refiere según otro de sus aspectos a un procedimiento de preparación de estas nanopartículas, caracterizado porque comprende: - la solubilización de un derivado de la gemcitabina según la invención en por lo menos un disolvente orgánico a una concentración suficiente para obtener, durante la adición de la mezcla resultante, bajo agitación, en una fase acuosa, la formación instantánea de nanopartículas de dicho derivado en suspensión en dicha fase acuosa y, llegado el caso, - el aislamiento de dichas nanopartículas. La presente invención se refiere asimismo según otro de sus aspectos a la utilización de estos derivados y nanopartículas para la preparación de una composición farmacéutica dotada de una actividad anticancerígena o antivírica. Se refiere además a una composición farmacéutica que comprende, a título de materia activa, por lo menos un derivado de acuerdo con la presente invención, en particular en forma de nanopartículas. De manera inesperada, los inventores han constatado así que el acoplamiento covalente de la gemcitabina con por lo menos una molécula de un radical hidrocarbonado, por lo menos de C18 acíclico, no lineal, e insaturado, permitía, con la condición de que este radical hidrocarbonado posea una conformación apta para organizarse en forma compactada en un medio disolvente polar, acceder a unas nanopartículas a base de gemcitabina, siendo dicho radical hidrocarbonado un radical escualenoilo o un derivado de éste. Los derivados de gemcitabina son ventajosos por varias razones. Por su carácter tan hidrófobo e insoluble en agua, son capaces de organizarse espontáneamente en estado de partículas mediante nanoprecipitación. Teniendo en cuenta el tamaño pequeño de sus partículas, se pueden administrar en forma de una suspensión acuosa por vía intravenosa y por lo tanto son compatibles con la microcirculación vascular. Los derivados hidrocarbonados de C18 considerados según la invención se fijan generalmente mediante un enlace covalente a nivel de un grupo 3'- y/o 5'--OH y/o del grupo 4-amino de la gemcitabina. Convienen muy particularmente a la invención los derivados hidrocarbonados acíclicos, no lineales e insaturados, en particular tal como los derivados terpénicos tales como por ejemplo el escualeno y sus derivados. Ventajosamente, este derivado hidrocarbonado es un ácido carboxílico. En tal caso, este enlace covalente es más particularmente de naturaleza éster en el caso de los grupos 3' o 5'-OH, y amida en el caso del grupo 4-amino. Evidentemente, los derivados de gemcitabina según la presente invención pueden ser unos derivados que comprenden dos derivatizaciones, incluso tres derivatizaciones, pudiendo ser éstas idénticas o diferentes. Según una variante particular de la invención, los derivados según la invención poseen por lo menos un derivado acilo hidrocarbonado a nivel del grupo 4-amino. Está entonces representado por el radical R1-. Más particularmente, los derivados de gemcitabina de la invención responden a la fórmula general (IA): 3 E05857322 09-11-2011   en la que R2 y R3 son tal como los definidos anteriormente, y R'1 representa un radical escualenoilo o un derivado de éste. En el sentido de la invención, el término derivado de escualenoilo entiende abarcar los derivados de sustitución del radical escualenoilo en la medida en la que la presencia de este o de estos sustituyentes no tiene incidencia significativa sobre la conformación de origen del radical. En otras palabras, el radical debe de conservar su aptitud para compactarse o también para provocar una disminución significativa de la tensión superficial o también de la caída rápida de la tensión superficial, cuando se pone en presencia, a partir de una cierta concentración, con un disolvente polar. Este fenómeno se ilustra en particular en las figuras 1 ó 2. Más particularmente, R2 y R3 pueden representar entonces un átomo de hidrógeno. La presente invención se refiere muy particularmente al derivado 4-(N)-escualenoilgemcitabina (SQgem). De manera inesperada, los inventores han constatado así que los derivados de acuerdo con la presente invención y que comprenden, a título de radical hidrocarbonado, un radical escualenoilo, resultaban particularmente sensibles a la polaridad de los disolventes, tal como el escualeno. Han constatado así que la puesta en presencia de estos derivados de gemcitabina con un disolvente polar tal como el agua por ejemplo, conducía a la formación espontánea de partículas a escala del nanómetro y por lo tanto, ventajosamente, compatibles con una administración intravenosa. Las nanopartículas de los derivados de gemcitabina según la presente invención son accesibles con la ayuda de la tecnología clásica de nanoprecipitación tal como la descrita en Fessi H. et al., Int, J. Pharm., 55; 1989, R1-R4. Más precisamente,... [Seguir leyendo]

1. Nanopartículas de un derivado de 2',2'-difluoro-2'-desoxicitidina de fórmula general (I): en la que: R1, R2 y R3, idénticos o diferentes, representan, independientemente entre sí, un átomo de hidrógeno o un radical acilo hidrocarbonado por lo menos de C18 acíclico, no lineal, insaturado y de tal conformación que es capaz de conferir a dicho compuesto de fórmula general (I), una forma compactada en un medio disolvente polar, siendo dicho radical hidrocarbonado un radical escualenoilo o un derivado de éste, y siendo uno por lo menos de los grupos R1, R2 y R3 diferente de un átomo de hidrógeno. 2. Nanopartículas según la reivindicación 1, caracterizadas porque dicho radical acilo hidrocarbonado es un radical escualenoilo. 3. Nanopartículas según la reivindicación 1 ó 2, caracterizadas porque dicho derivado comprende un derivado hidrocarbonado a título de radical R1. 4. Nanopartículas según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizadas porque dicho derivado responde a la fórmula general (IA): en la que R2 y R3 son tales como los definidos en la reivindicación 1, y R'1 representa un radical escualenoilo o un derivado de éste. 5. Nanopartículas según la reivindicación 3, caracterizadas porque R2 y R3 representan ambos un átomo de hidrógeno. 6. Nanopartículas de 4-(N)-escualenoilgemcitabina. 7. Nanopartículas según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizadas porque poseen un tamaño medio comprendido entre 30 y 500 nm. 8. Nanopartículas según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizadas porque están asociadas a por lo menos un derivado lipófilo del polietilenglicol. 9. Nanopartículas según la reivindicación 8, caracterizadas porque dicho derivado lipófilo del polietilenglicol es el polietilenglicol colesterol. 10. Procedimiento de preparación de nanopartículas según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque comprende por lo menos: 9 E05857322 09-11-2011   la solubilización de por lo menos un derivado de 2',2'-difluoro-2'-desoxicitidina de fórmula general (I): en la que: R1, R2 y R3, idénticos o diferentes, representan, independientemente entre sí, un átomo de hidrógeno o un radical acilo hidrocarbonado por lo menos de C18 acíclico, no lineal, insaturado y de conformación tal que es capaz de conferir a dicho compuesto de fórmula general (I), una forma compactada en un medio disolvente polar, siendo dicho radical hidrocarbonado un radical escualenoilo o un derivado de éste, y siendo uno por lo menos de los grupos R1, R2 y R3 diferente de un átomo de hidrógeno, en por lo menos un disolvente orgánico a una concentración suficiente para obtener, durante la adición de la mezcla correspondiente, bajo agitación, a una fase acuosa, la formación instantánea de nanopartículas en suspensión en dicha fase acuosa y, llegado el caso, el aislamiento de dichas nanopartículas. 11. Procedimiento según la reivindicación 10, en el que dicho derivado es tal como el definido en las reivindicaciones 2 a 6. 12. Procedimiento según la reivindicación 10 u 11, caracterizado porque se lleva a cabo en ausencia de tensioactivo. 13. Procedimiento según la reivindicación 10, 11 ó 12, caracterizado porque se lleva a cabo en presencia de un derivado lipófilo del polietilenglicol. 14. Procedimiento según la reivindicación 13, caracterizado porque dicho derivado lipófilo del polietilenglicol es el polietilenglicol colesterol. 15. Composición farmacéutica que comprende a título de materia activa por lo menos unas nanopartículas según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en asociación con por lo menos un vehículo farmacéuticamente aceptable. 16. Nanopartículas según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, a título de agentes anticancerígenos. 17. Nanopartículas según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, a título de agentes antivíricos. 18. Utilización de nanopartículas según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para la preparación de una composición farmacéutica dotada de una actividad anticancerígena o antivírica. E05857322 09-11-2011   11 E05857322 09-11-2011   12 E05857322 09-11-2011   13 E05857322 09-11-2011