Inmunoterapia retrovírica.

Uso de una composición que comprende un polipéptido antigénico retrovírico o ADN que codifica elpolipéptido para la fabricación de un medicamento para administrar a un sujeto mamífero una infección retrovírica,

en donde al sujeto se le administra posteriormente un agente que inhibe la producción de, y/o destruye, las células Treguladoras, y en donde el tiempo de administración del agente se selecciona de tal manera que ejerce un efectoproporcionalmente mayor contra las células T reguladoras que las células T efectoras, y en donde el agente seselecciona del grupo que consiste de fármacos anti-proliferativos, radiación y un anticuerpo que se uneespecíficamente a células T CD4+.

Inmunoterapia Retrovírica

CAMPO DE LA INVENCIÓN:

La presente invención proporciona un método para tratar una infección retrovírica en un sujeto mamífero. Más particularmente, la presente invención proporciona un método para tratar una infección retrovírica que conduce a una enfermedad relacionada con inmunodeficiencia en un sujeto humano.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN:

El virus de inmunodeficiencia humana (VIH) induce una infección persistente y progresiva que conduce, en la gran mayoría de casos, al desarrollo del síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) . Existen por lo menos dos tipos distintos de VIH: VIH-1 y VIH-2. En los humanos, la infección por VIH conduce eventualmente a incompetencia inmunológica, infecciones oportunistas, disfunciones neurológicas, crecimiento neoplásico, y finalmente la muerte.

El VIH es un miembro de la familia lentivirus de retrovirus. Los retrovirus son virus de envoltura pequeña que contienen un genoma de ARN de hebra sencilla, y se replican por medio de la inserción de un intermedio de ADN en el ADN anfitrión producido por una transcriptasa inversa codificada víricamente. Otros retrovirus incluyen, por ejemplo, virus oncogénicos tales como virus de la leucemia de células T humanas (HTLVI, - II, -III) , virus de leucemia en felinos, y los retrovirus del tipo C de murino.

La partícula vírica de VIH consiste de un núcleo vírico, compuesto en parte de proteínas cápsidas designadas p24 y p18, junto con el genoma de ARN vírico y aquellas enzimas requeridas para eventos replicativos tempranos. La proteínas gag miristiladas forman una cubierta vírica externa alrededor del núcleo vírico, que, a su vez, está rodeado por una envoltura de membrana de lípido derivado de membrana celular infectada. Las glucoproteínas de superficie de envoltura de VIH se sintetizan como una proteína precursora única de 160 kilodalton que se divide por una proteasa celular durante gemación vírica en dos glucoproteínas, gp41 y gp120. El gp41 es una glucoproteína de transmembrana y el gp120 es una glucoproteína extracelular que permanece no covalentemente asociada con gyp41, posiblemente en una forma trimérica o multimérica.

La infección por VIH es pandémica y las enfermedades asociadas con VIH representan un problema de salud mundial principal. Aunque se hacen esfuerzos considerables en el diseño de terapéuticos efectivos, actualmente existen fármacos anti-retrovíricos no curativos o terapias contra el SIDA. En intentos para desarrollar tales fármacos, se han considerado diversas etapas del ciclo de vida del VIH como objetivos para intervención terapéutica (Mitsuya et al., 1991) .

Se ha puesto atención al desarrollo de vacunas para el tratamiento de infección por VIH. Se ha mostrado que las proteínas de envoltura VIH-1 (gp160, gp120, gp41) son los antígenos principales para anticuerpos anti-VIH presentes en pacientes con SIDA (Barin et al., 1985) . Por lo tanto, hasta ahora, estas proteínas parecen ser candidatos más promisorios que actúan como antígenos para el desarrollo de la vacuna de anti-VIH. Diversos grupos han empezado a utilizar varias porciones de gp160, gp120, y/o gp41 como objetivos inmunogénicos para el sistema inmunológico anfitrión (US 5, 141, 867; WO 92/22654; WO 91/09872; WO 90/07119; US 6, 090, 392) . A pesar de estos esfuerzos, no se ha desarrollado una estrategia de vacuna efectiva para el tratamiento de infección por VIH.

La presente invención proporciona una inmunoterapia alterna para tratar una infección retrovírica.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN:

El presente inventor ha notado que por lo menos dos poblaciones de células inmunes se producen en respuesta a retrovirus que infectan los mamíferos. Más particularmente, el sistema inmunológico de un mamífero infectado con un retrovirus es capaz de montar una respuesta inmune contra el virus a través de un grupo de células aquí denominado de manera general como “células efectoras”, sin embargo, también se produce una segunda población de células que regulan las “células efectoras”, denominado de manera general aquí como “células reguladoras”, que limitan la capacidad del mamífero para controlar efectivamente o erradicar la infección retrovírica.

Aunque no se desea estar limitado por la teoría, se propone que los humanos contienen muchas secuencias que son homólogas o casi homólogas a las secuencias retrovíricas fragmentadas a través de su genoma como elementos heredables estables. De acuerdo con lo anterior, las proteínas codificadas por estas secuencias se pueden reconocer como “auto’ durante el desarrollo de la respuesta inmunológica. La infección posterior mediante un retrovirus también se puede reconocer parcialmente como “auto”, limitando la capacidad del sistema

inmunológico de montar una respuesta inmunológica exitosa. Este propósito, por lo menos en parte, puede explicar porqué hasta ahora ha sido difícil desarrollar una vacuna efectiva contra el VIH.

Se ha proporcionado soporte para esta hipótesis por Rakowicz-Szulczynska y colaboradores (1998 y 2000) quienes han mostrado que algunos antígenos asociados con cáncer de mama son molecularmente e inmunológicamente similares a las proteínas codificadas por VIH-1. Se han hecho observaciones similares para otros cánceres. Adicionalmente, Coll et al. (1995) ha reportado anticuerpos que unen VIH-1 en pacientes con enfermedades autoinmunes tales como síndrome de Sjogren y lupus eritematoso sistémico. Adicionalmente, una búsqueda BLAST de la base de datos del genoma humano con las secuencias del genoma del virus de inmunodeficiencia humana indica muchas regiones de identidad significativas entre los dos genomas.

También se ha notado que el número relativo de células efectoras se expande en respuesta a un antígeno antes que se expandan las células reguladoras. Esto proporciona una oportunidad para evitar la producción de, o destruir, las “células reguladoras” mientras mantiene las “células efectoras”.

De acuerdo con lo anterior, la presente invención proporciona usos y un método como se define en las reivindicaciones adjuntas. En un primer aspecto se describe aquí un método para tratar una infección retrovírica en un sujeto mamífero, el método comprende administrar al sujeto una composición que aumenta las cifras de, y/o activa, las células efectoras dirigidas contra el retrovirus, y posteriormente administrar al sujeto un agente que inhibe la producción de, y/o destruye, las células reguladoras, en donde el tiempo de administración del agente se selecciona de tal manera que la actividad de las células efectoras no se reduce significativamente.

Existen muchas formas en las que se puede aumentar el número, y/o actividad, de las células efectoras dirigidas contra un retrovirus. En algunos casos, esto ocurriría por una infección inadvertida con el retrovirus, por ejemplo, un pinchazo de aguja de una jeringa que contiene el virus. Como se sabe, los trabajadores e investigadores de la salud corren el riesgo de infección vírica a través de lesión por pinchazo de aguja. De manera similar, el público en general también está expuesto a este peligro a través de jeringas desechadas, particularmente en la playa, y los asaltos con dichas jeringas. Por lo tanto, luego de exposición sospechosa a un retrovirus, particularmente VIH, el sujeto mamífero puede utilizar el método de la presente invención.

El método también se puede utilizar para tratar un sujeto mamífero que se ha infectado con un retrovirus durante algún tiempo. Aunque el sistema inmunológico de dicho sujeto que ya se ha expuesto al retrovirus, la adición de antígenos retrovíricos adicionales puede conducir a una respuesta de célula efectora adicional con oportunidad posterior a la ablación de los reguladores de estos nuevos efectores.

Los sujetos infectados con un retrovirus se pueden tratar con fármacos antiretrovíricos para mantener baja la carga vírica. Dichos sujetos también se pueden administrar con la composición para iniciar una nueva respuesta inmunológica de célula efectora mientras que la administración posterior del agente sometería a ablación a las células reguladoras.

En una realización preferida del primer aspecto, el agente se administra aproximadamente cuando las cifras de célula T CD8+CD4 han alcanzado un pico en la respuesta... [Seguir leyendo]

1. Uso de una composición que comprende un polipéptido antigénico retrovírico o ADN que codifica el polipéptido para la fabricación de un medicamento para administrar a un sujeto mamífero una infección retrovírica, en donde al sujeto se le administra posteriormente un agente que inhibe la producción de, y/o destruye, las células T reguladoras, y en donde el tiempo de administración del agente se selecciona de tal manera que ejerce un efecto proporcionalmente mayor contra las células T reguladoras que las células T efectoras, y en donde el agente se selecciona del grupo que consiste de fármacos anti-proliferativos, radiación y un anticuerpo que se une específicamente a células T CD4+.

2. Uso de un agente que inhibe la producción de, y/o destruye, las células T reguladoras para la fabricación de un medicamento para administrarle a un sujeto mamífero una infección retrovírica, en donde el sujeto se le ha administrado previamente una composición que comprende un polipéptido antigénico retrovírico o ADN que codifica el polipéptido, y en donde el agente se administra en un momento seleccionado de tal manera que ejerce un efecto proporcionalmente mayor contra las células T reguladoras que las células T efectoras, y en donde el agente se selecciona del grupo que consiste de fármacos anti-proliferativos, radiación y un anticuerpo que se une específicamente a células T CD4+.

3. Uso de una composición que comprende un polipéptido antigénico retrovírico o ADN que codifica el polipéptido, y un agente que inhibe la producción de, y/o destruye, las células T reguladoras para la fabricación de un medicamento para administrarle a un sujeto mamífero una infección retrovírica, en donde el sujeto se le administra la composición antes del agente, y en donde el tiempo de administración del agente se selecciona de tal manera que ejerce un efecto proporcionalmente mayor contra las células T reguladoras que las células T efectoras, y en donde el agente se selecciona del grupo que consiste de fármacos anti-proliferativos, radiación y un anticuerpo que se une específicamente a células T CD4+.

4. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde el agente se administra aproximadamente cuando las cifras de célula T CD8+CD4 han alcanzado un pico en respuesta a la administración de la composición.

5. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde el agente se administra aproximadamente cuando la cifra de partículas víricas ha empezado a estabilizarse o aumentarse luego de la administración de la composición.

6. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde el polipéptido antigénico retrovírico se proporciona al sujeto al administrar una vacuna que comprende el polipéptido antigénico de retrovirus y un portador farmacéuticamente aceptable.

7. El uso de la reivindicación 6, en donde la vacuna comprende adicionalmente un adyuvante.

8. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde el polipéptido antigénico se proporciona al sujeto al administrar una vacuna de ADN que codifica el polipéptido antigénico retrovírico.

9. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde el polipéptido antigénico se proporciona al sujeto mediante el consumo de una planta transgénica que expresa el polipéptido antigénico retrovírico.

10. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde el sujeto se ha expuesto a terapia de fármaco antiretrovírica antes de que se administre la composición.

11. Uso de un fármaco antiretrovírico para la fabricación de un medicamento para administrarle a un sujeto mamífero una infección retrovírica, en donde el sujeto se expone a terapia de fármaco antiretrovírica, y se administra posteriormente con un agente que inhibe la producción de, y/o destruye, las células T reguladoras, en donde el agente se administra después que ha concluido la terapia de fármaco antiretrovírica y una expansión resultante en las cifras retrovíricas ha conducido a un aumento en las cifras, y/o activación, de células T efectoras dirigidas contra el retrovirus, y en donde el tiempo de administración del agente se selecciona de tal manera que ejerce un efecto proporcionalmente mayor contra las células T reguladoras que las células T efectoras, y en donde el agente se selecciona del grupo que consiste de fármacos anti-proliferativos, radiación y un anticuerpo que se une específicamente a células T CD4+.

12. Uso de un agente que inhibe la producción de, y/o destruye, las células T reguladoras para la fabricación de un medicamento para administrarle a un sujeto mamífero una infección retrovírica, en donde el sujeto se ha

expuesto a terapia de fármaco antiretrovírica, y en donde el agente se administra después que ha concluido la terapia de fármaco antiretrovírica y una expansión resultante en las cifras retrovíricas ha conducido a un aumento en las cifras, y/o activación, de células T efectoras dirigidas contra el retrovirus, y en donde el tiempo de administración del agente se selecciona de tal manera que ejerce un efecto proporcionalmente mayor contra las células T reguladoras que las células T efectoras, y en donde el agente se selecciona del grupo que consiste de fármacos anti-proliferativos, radiación y un anticuerpo que se une específicamente a células T CD4+.

13. Uso de un fármaco antiretrovírico, y un agente que inhibe la producción de, y/o destruye, las células T reguladoras para la fabricación de un medicamento para administrarle a un sujeto mamífero una infección retrovírica, en donde el sujeto se expone a terapia de fármaco antiretrovírica, y se le administra posteriormente el agente, y en donde el agente se administra después que ha concluido la terapia de fármaco antiretrovírica y una expansión resultante en las cifras retrovíricas ha conducido a un aumento en las cifras, y/o activación, de células T efectoras dirigidas contra el retrovirus, y en donde el tiempo de administración del agente se selecciona de tal manera que ejerce un efecto proporcionalmente mayor contra las células T reguladoras que las células T efectoras, y en donde el agente se selecciona del grupo que consiste de fármacos anti-proliferativos, radiación y un anticuerpo que se une específicamente a células T CD4+.

14. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 11 a 13, en donde el agente se administra aproximadamente cuando las cifras de célula T CD8+CD4 han alcanzado un pico en respuesta a la conclusión de la terapia de fármaco antiretrovírica.

15. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 11 a 13, en donde el agente se administra aproximadamente cuando las cifras de partículas víricas han alcanzado un pico, o se empiezan a reducir después de este pico, en respuesta a la conclusión de la terapia de fármaco antiretrovírica.

16. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, en donde el fármaco anti-proliferativo se selecciona del grupo que consiste de vinblastina y vinblastina anhidra.

17. El uso de de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16, en donde el retrovirus se selecciona del grupo que consiste de HTV-1, VIH-2, HTLV-1 y HTLV-2.

18. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, en donde el método se repite por lo menos una vez.

19. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18, en donde el sujeto mamífero es un humano.

20. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19 en donde el fármaco anti-proliferativo se selecciona de mecloretamina, ciclofosfamida, ifosfamida, melfalan, clorambucilo, hexametil-melamina, tiotepa, busulfan, carmustina, lomustina, semustina, estreptozocina, dacarbazina, metotrexato, fluorouracilo, floxuridina, citarabina, mercaptopurina, tioguanina, pentostatina, vinblastina, vinblastina anhidra, vincristina, etoposida, teniposida, dactinomicina, daunorubicina, doxorubicina, bleomicina, plicamicina, mitomicina, L-asparaginasa, cisplatina, mitoxantrona, procarbazina, mitotano, aminoglutetimida, prednisona, caproato de hidroxiprogesterona, acetato de medroprogesterona, acetato de megestrol, dietilstilbestrol, etinil estradiol, tamoxifen, propionato de testosterona, isótopos radioactivos, cadena A de ricino, taxol, toxina difteria y exotoxina A seudomonas.

21. Un método para determinar cuándo un agente que inhibe la producción de, y/o destruye, las células T reguladoras, se va a administrar a un sujeto mamífero una infección retrovírica que ha sido expuesto a un tratamiento que aumenta las cifras de, y/o activa, las células T efectoras dirigidas contra el retrovirus, el método comprende

(i) analizar una muestra previamente obtenida del sujeto para (a) las cifras de célula T efectora y/o (b) cifras o actividad de célula T reguladora, o un marcador de la misma, o

(ii) supervisar la carga vírica en el sujeto; en donde el agente se selecciona del grupo que consiste de fármacos antiproliferativos, radiación y un anticuerpo que se une específicamente a células T CD4+.

22. El método de la reivindicación 21, en donde el método incluye determinar las cifras de célula T CD8+CD4.

23. El método de la reivindicación 21, en donde el método incluye determinar números de célula T CD4+CD8.

24. El método of la reivindicación 21, en donde el método incluye determinar las cifras de partículas víricas.