EL GEN DEL FACTOR DE TRANSCRIPCIÓN OSNACX DEL ARROZ Y SU USO PARA MEJORAR LA TOLERANCIA DE LAS PLANTAS A LA SEQUÍA Y LA SAL.

Un polinucleótido aislado capaz de dar a una planta tolerancia al estrés por sequía y/o sal,

que consiste en una secuencia de nucleótidos como se muestra en la SEC ID N.º: 1, o una de sus variantes idéntica al menos en un 95 % que tenga la misma función biológica.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/CN2005/002251.

Solicitante: HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY.

Nacionalidad solicitante: China.

Dirección: SHIZISHAN STREET, 1 WUHAN, HUBEI 430070 CHINA.

Inventor/es: HU,Honghong, XIONG,Lizhong.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 20 de Diciembre de 2005.

Clasificación PCT:

  • A01H1/00 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A01 AGRICULTURA; SILVICULTURA; CRIA; CAZA; CAPTURA; PESCA.A01H NOVEDADES VEGETALES O PROCEDIMIENTOS PARA SU OBTENCION; REPRODUCCION DE PLANTAS POR TECNICAS DE CULTIVO DE TEJIDOS.Procedimientos de modificación de los genotipos (A01H 4/00 tiene prioridad).
  • A01H5/00 A01H […] › Angiospermas,es decir, plantas con flores, caracterizadas por sus partes vegetales; Angiospermas caracterizadas de forma distinta que por su taxonomía botánica.
  • C07K14/415 QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de vegetales.
  • C12N15/29 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Genes que codifican proteínas vegetales, p. ej. taumatina.
  • C12N15/63 C12N 15/00 […] › Introducción de material genético extraño utilizando vectores; Vectores; Utilización de huéspedes para ello; Regulación de la expresión.
  • C12N15/82 C12N 15/00 […] › para células vegetales.
  • C12N5/14 C12N […] › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células vegetales.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Lituania, Letonia.

PDF original: ES-2372607_T3.pdf

 


Fragmento de la descripción:

El gen del factor de transcripción OsNACx del arroz y su uso para mejorar la tolerancia de las plantas a la sequía y la sal. Campo técnico La presente invención se refiere a un polinucleótido aislado capaz de dar a una planta tolerancia al estrés por sequía y/o sal, que comprende una secuencia de polinucleótidos como se muestra en la SEC ID N.º: 1 capaz de dar a una planta tolerancia al estrés por sequía y/o sal. La presente invención también se refiere a un vector de expresión que comprende dicho nucleótido y a una célula huésped transformada o transfectada con dicho vector de expresión. La presente invención se refiere además a un uso de dicha secuencia de polinucleótidos o promotora en la mejora de la tolerancia de plantas al estrés por sequía y/o sal. Técnica anterior El crecimiento de las plantas está normalmente influenciado por muchos factores ambientales, entre los que el daño por sequía y/o sal son factores principales que dan como resultado una gran reducción de la producción de cosecha en muchas zonas. Por tanto, siempre es un objetivo principal en las investigaciones de ciencia y tecnología agrícola desarrollar especies de cultivo con tolerancia al estrés. Para resistir o adaptarse a factores ambientales desfavorables, las plantas reciben cambios extracelulares de las condiciones ambientales y los transfieren a través de muchas rutas al interior de las células para inducir la expresión de algunos genes de respuesta y generar algunas proteínas funcionales, sustancias osmorreguladoras, así como factores de transcripción para transmisión de señales y regulación de la expresión génica, de forma que las plantas sean capaces de elaborar respuestas correspondientes a los cambios ambientales y evitar daños provocados por el estrés por sequía, exceso de sal y/o baja temperatura. (Xiong y col, Cell signaling during cold, drought and salt stress. Plant Cell. 14 (supl), S165-S183, 2002). Los factores de regulación regulan con precisión la expresión de genes funcionales para responder a cambios ambientales. Cuando las plantas se enfrentan a estreses, un factor de transcripción como un gen de control es capaz de regular la expresión de una serie de genes corriente abajo para potenciar la tolerancia de las plantas a los estreses. Kawasaki y col (2001) utilizó micromatrices para analizar el perfil de expresión temprana del arroz bajo estrés por exceso de sal y divulgó que una gran cantidad de genes estaban inducidos o inhibidos y que la inducción y expresión de estos genes estaban reguladas por factores de transcripción (Kawasaki S, Borchert C, Deyholos M, Wang H, Brazille S, Kawai K, Galbraith D y Bohnert H J. Gene expression profiles during the initial phase of salt stress in rice, Plant Cell, 2001, 13: 889-905). Se encuentra que las familias de factores de transcripción de AP2/EREBP, dedos de cinc, Myb, bZIP en Arabidopsis thaliana están inducidas para expresarse o inhibirse bajo diferentes estreses (Shinozaki K y col, Monitoring the Expression Pattern of 1300 Arabidopsis Genes under Drought and Cold Stresses by Using a Full-Length cDNA Microarray, Plant Cell, 2001, 13: 61-72). Por tanto, se considera que estas familias de transcripción son muy importantes en la regulación durante el procedimiento de respuesta al estrés de las plantas. Por lo tanto, la separación e identificación de factores de transcripción que tienen una función reguladora esencial para la respuesta a los estreses y su uso para la mejora genética de los cultivos para resistir estreses son importantes y significativas para el cultivo de semillas. Basándose en la información conocida sobre los factores de transcripción de Arabidopsis thaliana, se han realizado algunos estudios para mejorar las tolerancias de las plantas. Las plantas de Arabidopsis thaliana transgénicas cultivadas usando EREB1A y DREB2A tienen mayores tolerancias a temperatura baja, sequía y salinidad alta que las de tipo natural (Liu Q y col, Two transcription factors, DREB1 and DREB2, with an EREBP/AP2 DNA domains separate two cellular signal transduction pathways in drought - and low-temperature-responsive gene expression, respectively, in Arabidopsis. Plant Cell. 1998, 10: 1391-1406). El grupo de investigación de Thomashow MF de la universidad estatal de Michigan (EE. UU.) también cultivó plantas con tolerancia a la congelación potenciada usando el gen CBF1 de Arabidopsis thaliana en transformación genética. El arroz es uno de los cultivos alimentarios más importantes. La tolerancia a la sequía y/o sal es especialmente importante para el arroz. Sin embargo, no se ha desarrollado hasta el momento ninguna planta de arroz transgénica con tolerancia a la sequía y/o sal. Por tanto, es significativo e importante descubrir los factores de transcripción asociados con la tolerancia a la sequía y/o sal para cultivar una planta de arroz con tolerancia a la sequía y/o congelación y, de este modo, incrementar la producción de arroz. Sumario de la invención Un objetivo de la presente invención es proporcionar un polinucleótido aislado capaz de dar a una planta, preferentemente arroz, tolerancia al estrés por sequía y/o sal, que consiste en una secuencia de nucleótidos como se muestra en la SEC ID N.º: 1, o una variante conservadora o secuencia degenerada que comprenda una o más sustituciones, deleciones, adiciones y/o inserciones en dicha secuencia de nucleótidos, o una secuencia hibridable con dicha secuencia de nucleótidos bajo condiciones moderadamente rigurosas, o una secuencia complementaria a ella, o una variante o un derivado que tenga al menos un 95 % de homología y la misma función biológica que dicha 2   secuencia de nucleótidos. En una realización de la presente invención, dicho polinucleótido consiste en la secuencia de ADN que se muestra en las posiciones 1374-2453 de la SEC ID N.º: 1. También se describe un promotor capaz de dar a una planta, preferentemente arroz, tolerancia al estrés por sequía y sal, que comprende una secuencia de nucleótidos como se muestra en la secuencia de ADN de las posiciones 1- 1373 de la SEC ID N.º: 1, o una variante conservadora o secuencia degenerada que comprenda una o más sustituciones, deleciones, adiciones y/o inserciones en dicha secuencia de nucleótidos, o una secuencia hibridable con dicha secuencia de nucleótidos bajo condiciones moderadamente rigurosas, o una secuencia complementaria a ella, o una variante o un derivado que tenga al menos un 95 % de homología y la misma o similar función biológica que dicha secuencia de nucleótidos. Dicho promotor puede consistir en la secuencia de ADN que se muestra en la secuencia de ADN de las posiciones 1-1373 de la SEC ID N.º: 1. Otro objetivo de la presente invención es proporcionar un vector de expresión que comprenda dicha secuencia de polinucleótidos y/o dicha secuencia promotora. Otro objetivo de la presente invención es proporcionar una célula huésped transformada o transfectada con dicho vector de expresión. Otro objetivo de la presente invención es proporcionar un uso de dicha secuencia de polinucleótidos para incrementar la tolerancia al estrés por sequía y/o sal en una planta, preferentemente arroz. Descripción detallada de la invención El objetivo de la presente invención es aislar un fragmento de ADN que comprenda la región codificante del gen del factor de transcripción completa, clonarla y usarla para la mejora de la tolerancia del arroz y otras plantas a la sequía. La presente invención se basa en el descubrimiento por análisis estructural del gen obtenido que pertenece a la familia de factores de transcripción NAC específicos de plantas, y por tanto dicho factor de transcripción se denomina OsNACx. En la presente invención, la expresión "polinucleótido aislado capaz de dar a una planta tolerancia al estrés por sequía y/o sal" representa la secuencia de polinucleótidos que se muestra en la SEC ID N.º: 1 y además comprende todas las variantes o derivados que tengan al menos un 95 % de homología y la misma función biológica que la secuencia que se muestra en la SEC ID N.º: 1. El término "aislado" significa cambiado "artificialmente" desde su estado natural y/o aislado de su entorno natural. Por tanto, si un componente "aislado" o sustancia presente en la naturaleza está "aislado", se ha cambiado o retirado de su entorno natural inicial o se ha sometido a ambos. Por ejemplo, un polinucleótido o polipéptido naturalmente presente en animales vivos no está "aislado", pero el mismo polinucleótido o polipéptido aislado a partir de su estado natural está "aislado", que es exactamente el término usado en el presente documento. El término "polinucleótido(s)" como se usa en el presente documento, significa un polímero de cadena sencilla o doble de bases de desoxirribonucleótidos o ribonucleótidos e incluye moléculas de ADN y de ARN correspondientes,... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Un polinucleótido aislado capaz de dar a una planta tolerancia al estrés por sequía y/o sal, que consiste en una secuencia de nucleótidos como se muestra en la SEC ID N.º: 1, o una de sus variantes idéntica al menos en un 95 % que tenga la misma función biológica. 2. Un polinucleótido aislado, que consiste en la secuencia de ADN como se muestra en las posiciones 1374-2453 de la SEC ID N.º: 1. 3. El polinucleótido de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicha planta se selecciona del grupo que consiste en arroz, tomate, patata, tabaco, pimiento, maíz, cebada, trigo, Brassica, Arabidopsis, girasol, soja, chopo y pino, preferentemente arroz. 4. Un vector de expresión que comprende el polinucleótido de acuerdo con la reivindicación 1 o un promotor enlazado de forma operable al polinucleótido de la reivindicación 2. 5. Una célula huésped transformada o transfectada con el vector de expresión de acuerdo con la reivindicación 4. 6. El uso del polinucleótido de acuerdo con la reivindicación 1 para incrementar la tolerancia al estrés por sequía y/o sal en una planta. 7. El uso de acuerdo con la reivindicación 6, en el que dicha planta se selecciona del grupo que consiste en arroz, tomate, patata, tabaco, pimiento, maíz, cebada, trigo, Brassica, Arabidopsis, girasol, soja, chopo y pino, preferentemente arroz. 29     31   32   33   34     36

 

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